胰岛素对3T3-L1脂肪细胞HDL生成相关功能蛋白ABCA1的影响及机制研究

发布时间：2022-02-20 12:22

　　背景与目的：动脉粥样硬化性心血管疾病是导致人类死亡的首要原因。而血脂异常是其最主要的危险因素之一。尽管他汀类药物的有效使用，甚至是剂量的加倍，且当LDL-C降至70mg/dL以下时，心血管剩余风险仍然存在。因此，为了更进一步降低心血管剩余风险，人们逐渐又开始了对其他影响心血管疾病风险因素的探索，如HDL-C。高胰岛素血症/胰岛素抵抗是动脉粥样硬化性心血管疾病的主要危险因素。HDL水平的降低常是高胰岛素血症最主要血脂谱改变之一，但其具体机制仍不明确。本研究以3T3-L1脂肪细胞为研究对象，旨在讨论高胰岛素环境对HDL生成相关功能蛋白ABCA1的影响，并且探索其具体信号通路机制，为心血管剩余风险的干预提供新的基础医学证据。方法：本实验以3T3-L1前脂肪细胞为研究对象，通过“鸡尾酒法”诱导分化为成熟的脂肪细胞；予以不同浓度的胰岛素（0nmol/L、10nmol/L、102nmol/L、103nmol/L）刺激，利用葡萄糖氧化酶法（GOD）检测细胞培养基剩余葡萄糖含量以确定是否成功建立胰岛素抵抗模型；利用液体闪烁计数技术检测细胞3H标记胆固醇流出；采用SYBR Green I嵌合荧光法通过实... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
缩略词表
中文摘要
ABSTRACT
前言
主要实验材料和试剂配置方法
    一、主要实验试剂
    二、主要实验仪器
    三、主要试剂的配置方法
主要实验技术与方法
    一、小鼠 3T3-L1 前脂肪细胞的培养及诱导分化
    二、油红 O 染色
    三、葡萄糖氧化酶（GOD）法葡萄糖消耗测定
    四、3H 标记胆固醇流出实验测定
    五、实时荧光定量 PCR（Real-Time PCR）检测 ABCA1 mRNA 表达
    六、蛋白印迹法（Western blot）检测 ABCA1 蛋白表达
    七、统计学处理
实验结果
    一、3T3-L1 前脂肪细胞经诱导分化后为成熟的脂肪细胞
    二、胰岛素抵抗模型的建立
    三、胰岛素呈浓度和时间依赖性抑制 3T3-L1 脂肪细胞胆固醇流出
    四、不同浓度的胰岛素对 ABCA1 mRNA 表达均无明显影响
    五、胰岛素呈浓度和时间依赖性抑制 ABCA1 蛋白水平的表达
    六、胰岛素可通过 calpain 和 proteasome 途径促进 ABCA1 蛋白的降解
    七、胰岛素是通过 IRS/PI3K/Akt 信号通路介导 ABCA1 蛋白的降解
讨论
结论
参考文献
文献综述
    参考文献
硕士期间研究成果
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]甘油三酯与冠心病发病关系及机制的研究进展[J]. 林旻洁,赵水平.  中国动脉硬化杂志. 2011(12)
[2]肥胖与高密度脂蛋白代谢异常研究进展[J]. 宁小晖,彭道泉.  中国动脉硬化杂志. 2009(12)



本文编号：3635035