铁过载损伤中高危骨髓增生异常综合征患者骨髓间充质干细胞及促进转白的机制研究

发布时间：2022-02-24 13:53

　　目的:研究铁过载（IO）对中高危骨髓增生异常综合征（MDS）患者骨髓间充质干细胞（BM-MSC）数量、功能的影响及其损伤的相关机制,并揭示铁过载在促进MDS转白中的作用;研究砷剂联合地西他滨协同抗MDS细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,揭示两药协同诱导MDS细胞凋亡相关机制,为两药协同治疗MDS患者提供依据。内容:选取中高危MDS患者40例（IO MDS组18例:铁蛋白≥1000ng/ml;NIO MDS组22例:铁蛋白<1000ng/ml）,铁过载MDS/AML患者10例及健康对照19名。体外培养诱导BM-MSC,检测IO对中高危MDS患者BM-MSC数量及功能的影响,同时检测IO对BM-MSC内活性氧自由基（ROS）水平、凋亡率及其相关信号通路的影响,检测抗氧化或去铁处理对IO MDS组BM-MSC的影响。进一步探究铁过载促进MDS转白的相关机制。选取MDS细胞株体外培养,检测砷剂联合地西他滨对MDS细胞增殖及凋亡的影响,探究内质网应激相关信号通路在两药协同抗MDS细胞中的作用。方法:第一部分铁过载损伤中高危MDS患者BM-MSC及促进转白的机制研究。抽取无菌骨髓分离骨髓单个核细... 

【文章来源】：天津医科大学天津市211工程院校

【文章页数】：131 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究背景、现状
    研究目的、方法
一、铁过载对中高危MDS患者BM-MSC数量与功能的影响
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验对象
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 实验仪器及器材
        1.1.4 实验方法
        1.1.5 统计学方法
    1.2 结果
        1.2.1 BM-MSC数量及形态
        1.2.2 BM-MSC铁染色
        1.2.3 绘制BM-MSC增殖曲线
        1.2.4 BM-MSC成骨分化功能
        1.2.5 BM-MSC内 VEGFA及 CXCL12 基因相对表达量
        1.2.6 BM-MSC内 TGF-β1 基因表达水平及培养上清TGF-β1 浓度
    1.3 讨论
    1.4 结论
二、铁过载损伤中高危MDS患者BM-MSC的机制
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验对象
        2.1.2 主要实验试剂
        2.1.3 主要实验材料、仪器
        2.1.4 实验方法
        2.1.5 统计学方法
    2.2 结果
        2.2.1 BM-MSC内 ROS表达水平
        2.2.2 BM-MSC凋亡率
        2.2.3 BM-MSC内 caspase3及β-catenin基因相对表达量
        2.2.4 BM-MSC内增殖、凋亡及Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达水平
        2.2.5 抗氧化及去铁处理对IO MDS BM-MSC内 ROS水平的影响
        2.2.6 抗氧化及去铁处理对IO MDS BM-MSC凋亡率的影响
        2.2.7 抗氧化及去铁处理对IO MDS BM-MSC内 caspase3及β-catenin基因相对表达量的影响
        2.2.8 抗氧化及去铁处理对IO MDS BM-MSC内增殖、凋亡及Wnt/β-catenin相关蛋白表达水平的影响
        2.2.9 抗氧化及去铁处理对IO MDS BM-MSC内 VEGFA、CXCL12及TGF-β1基因相对表达量的影响
    2.3 讨论
    2.4 结论
三、铁过载促进MDS转白的相关机制
    3.1 对象和方法
        3.1.1 实验对象
        3.1.2 实验试剂
        3.1.3 主要实验仪器
        3.1.4 实验步骤
        3.1.5 统计学方法
    3.2 实验结果
        3.2.1 铁过载对中高危MDS患者基因突变的影响
        3.2.2 IO MDS/AML组与IO MDS组 BM-MSC形态与数量比较
        3.2.3 IO MDS/AML组与IO MDS组 BM-MSC内 ROS表达水平比较
        3.2.4 IO MDS/AML组与IO MDS组 BM-MSC凋亡率比较
        3.2.5 IO MDS/AML组与IO MDS组 BM-MSC内 VEGFA、CXCL12、caspase3及β-catenin基因相对表达量比较
        3.2.6 IO MDS/AML组与IO MDS组 BM-MSC内增殖、凋亡及Wnt相关蛋白表达水平比较
    3.3 讨论
    3.4 结论
四、砷剂联合地西他滨协同抗MDS细胞增殖、诱导细胞凋亡
    4.1 对象和方法
        4.1.1 实验对象
        4.1.2 主要实验试剂
        4.1.3 主要实验材料、仪器
        4.1.4 实验方法
        4.1.5 统计学方法
    4.2 结果
        4.2.1 砷剂联合地西他滨协同抗MUTZ-1 细胞增殖
        4.2.2 砷剂联合地西他滨协同抗SKM-1 细胞增殖
        4.2.3 砷剂联合地西他滨诱导MUTZ-1 细胞凋亡
        4.2.4 砷剂联合地西他滨诱导SKM-1 细胞凋亡
    4.3 讨论
    4.4 结论
五、砷剂联合地西他滨协同抗MDS细胞的机制
    5.1 对象和方法
        5.1.1 实验对象
        5.1.2 主要实验试剂
        5.1.3 主要实验材料、仪器
        5.1.4 实验方法
        5.1.5 统计学方法
    5.2 结果
        5.2.1 RNA-sequence方法测定砷剂联合地西他滨作用于MUTZ-1 细胞内基因变化
        5.2.2 砷剂联合地西他滨作用于MUTZ-1 细胞内DDIT3、ATF6、GRP78、GADD34及caspase3 基因相对表达量
        5.2.3 砷剂联合地西他滨作用于SKM-1 细胞内DDIT3、ATF6、GRP78、GADD34及caspase3 基因相对表达量
        5.2.4 砷剂联合地西他滨作用于MUTZ-1 细胞内ROS表达水平
        5.2.5 砷剂联合地西他滨作用于SKM-1 细胞内ROS表达水平
        5.2.6 砷剂联合地西他滨作用于MUTZ-1 细胞内蛋白表达水平
        5.2.7 砷剂联合地西他滨作用于SKM-1 细胞内蛋白表达水平
    5.3 讨论
    5.4 结论
六、抗氧化处理对砷剂联合地西他滨抗MDS细胞的影响
    6.1 对象和方法
        6.1.1 实验对象
        6.1.2 主要实验试剂
        6.1.3 主要实验材料、仪器
        6.1.4 实验方法
        6.1.5 统计学方法
    6.2 结果
        6.2.1 抗氧化处理降低砷剂联合地西他滨诱导MUTZ-1 细胞内ROS水平
        6.2.2 抗氧化处理降低砷剂联合地西他滨诱导SKM-1 细胞内ROS水平
        6.2.3 抗氧化处理降低砷剂联合地西他滨诱导MUTZ-1 细胞凋亡
        6.2.4 抗氧化处理降低砷剂联合地西他滨诱导SKM-1 细胞凋亡
        6.2.5 抗氧化处理降低砷剂联合地西他滨作用于MUTZ-1 细胞内质网应激相关基因表达水平
        6.2.6 抗氧化处理降低砷剂联合地西他滨作用于SKM-1 细胞内质网应激相关基因表达水平
    6.3 讨论
    6.4 结论
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 铁过载影响骨髓造血的特点及机制研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历



本文编号：3642860