PCSK9通过降解ApoER2拮抗apoE/ApoER2的抗炎作用

发布时间：2022-07-14 09:50

　　动脉粥样硬化（Atherosclerosis,AS）是一种慢性炎症性疾病,血管壁的炎症是其发展过程中的主要表现之一。内皮细胞是贴衬于血管腔面的单层扁平上皮,其损伤及功能障碍不仅是AS的起始环节,同时在扩大血管炎症反应中也起了关键的作用。载脂蛋白E（apolipoprotein E,apoE）是血浆脂蛋白的结构蛋白,在血浆富含甘油三酯脂蛋白代谢中起重要作用。除通过参与脂质代谢影响AS发生、发展外,apoE的抗炎作用对于抑制AS发生发展也十分重要。载脂蛋白E受体2（apolipoprotein E receptor-2,ApoER2）是一个广泛存在于细胞膜上的跨膜内吞受体蛋白,其作为apoE的受体对apoE具有高度的亲和性。有研究表明,apoE与内皮细胞膜上的ApoER2结合刺激内皮一氧化氮合酶产生及内皮细胞迁移,同时也减弱单核细胞-内皮细胞粘附。前蛋白转化酶枯草溶菌素9（proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9）是近年来发现的一种新的蛋白水解酶,其通过调节肝细胞膜上的低密度脂蛋白受体（low density lipoprote... 

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 炎症在动脉粥样硬化过程中的作用
    1.2 载脂蛋白E/载脂蛋白E受体2与AS的关系
        1.2.1 载脂蛋白E在AS中的作用
        1.2.2 载脂蛋白E受体2在AS中的作用
        1.2.3 apoE/ApoER2通过抗炎作用的发挥抑制AS的发生发展
    1.3 前蛋白转化酶枯草溶菌素9与AS
        1.3.1 前蛋白转化酶枯草溶菌素的结构与功能
        1.3.2 PCSK9与炎症
    1.4 PCSK9与apoE/ApoER2的抗炎作用间的关系
第二章 实验材料
    2.1 细胞和主要试剂
    2.2 主要仪器设备
第三章 实验方法
    3.1 常用试剂配制
    3.2 细胞培养
        3.2.1 细胞复苏
        3.2.2 细胞传代
        3.2.3 细胞冻存
    3.3 蛋白质印迹法-Western blot
        3.3.1 贴壁细胞蛋白质提取
        3.3.2 BCA蛋白定量
        3.3.3 SDS-PAGE凝胶配制
        3.3.4 电泳
        3.3.5 转膜(湿转法)
        3.3.6 封闭、抗体孵育及ECL化学发光检测
    3.4 酶联免疫吸附试验-Elisa
    3.5 统计分析
第四章 实验结果
    4.1 LPS对HUVECs中TLR4,PCSK9和炎症因子表达的影响
    4.2 apoE3对LPS所致的HUVECs中PCSK9, ApoER2, TNF-α 和IL-6表达的影响
    4.3 人重组apoE蛋白对HUVECs中PCSK9,ApoER2的影响
    4.4 人重组apoE蛋白对Hep G2细胞PCSK9,ApoER2的影响
    4.5 PCSK9通过降解ApoER2拮抗apoE/ApoER2抗炎作用
第五章 讨论
第六章 结论
参考文献
综述
    References
攻读学位期间的科研成果
课题资助
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]血管内皮细胞衰老与心血管疾病的相关性[J]. 卿即娜,陈红阳,尹琳洁,尹凯.  中国动脉硬化杂志. 2019(02)
[2]载脂蛋白E基因多态性与中国人群散发型阿尔茨海默病相关性的Meta分析[J]. 任昌菊,张超,鄢金柱,左红霞,翁鸿.  中国循证医学杂志. 2014(07)
[3]载脂蛋白E基因多态性与血脂水平的关系[J]. 祝成亮,周新,刘芳,胡汉林.  中国动脉硬化杂志. 2005(02)
[4]载脂蛋白E研究进展[J]. 张雪梅,刘秉文.  中国动脉硬化杂志. 2001(02)



本文编号：3660900