可溶性环氧化物水解酶抑制剂经微小RNA-1调节PI3K通路机制的研究

发布时间：2023-05-26 20:29

　　目的： 1.研究可溶性环氧化物水解酶抑制剂(soluble epoxide hydrolase inhibitor sEHi) t-AUCB(trans-4-(4-(3-adamantan-1-yl-ureido)-cyclohexyloxy)-bensoic acid)干预对原代乳小鼠心肌细胞心肌缺血模型中内向整流型钾电流(IK1)幅度的影响。 2.探讨t-AUCB调控微小RNA-1(microRNA-1miR-1)机制,明确miR-1参与P13K通路的调控。 方法： 体外部分： 选取出生1天的昆明小鼠乳鼠,培养原代心肌细胞,分5组进行不同的干预：(1)空白对照组(Ctl);(2) micrONTM mmu-miR-1a-3p agomir (agomiR-1)转染组(agomiR-1);(3) agomiR-1转染+t-AUCB干预组(agomiR-1+t-AUCB);(4) micrONTM mmu-miR-1a-3p agomir negative control组(Neg Ctl);(5) agomiR-1转染+DMSO干预组(agomiR-1+DMSO)。最后以全细胞模式记...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
目录
主要中英文縮略语词表
前言
第一部分 体外部分
    第一章 材料与方法
        1 实验动物
        2 仪器设备与试剂
        3 可溶性环氧化物水解酶抑制剂(tAUCB)保存液的配制
        4 原代乳小鼠心肌细胞培养
        5 实验分组
        6 膜片钳全细胞记录具体步骤
        7 统计与分析
    第二章 结果
        1 原代乳小鼠心肌细胞形态学
        2 AgomiR-1转染后模拟心肌缺血情况下,t-AUCB对原代乳小鼠心肌细胞IK₁电流密度大小的影响
    第三章 讨论
    第四章 结论
第二部分 体内部分
    第一章 材料与方法
        1 实验动物
        2 仪器设备与试剂
        3 可溶性环氧化物水解酶抑制剂(t-AUCB)原液的配制
        4 T-AUCB对心梗后小鼠缺血区心肌组织中p-AKT、p-GSK3β的影响
        5 小鼠心肌梗死模型的建立
        6 尾静脉注射mmu-miR-1a-3p agomir转染小鼠及实验分组
        7 PI3K抑制剂wortmannin干预实验分组
        8 标本取材
        9 免疫印迹法(Western Blot)检测
        10 实时荧光定量多聚链式反应(Real time PCR)
        11 统计与分析
    第二章 结果
        1 不同浓度(0.2 、1、5mg/L)t-AUCB对小鼠心梗后缺血区心肌组织p-AKT表达的影响
        2 不同浓度t-AUCB(0.2、1、5mg/L)对小鼠心梗后缺血区心肌组织p-GSK3β表达的影响
        3 AgomiR-1转染后t-AUCB对小鼠心梗后缺血区心肌组织p-AKT表达的影响
        4 agomiR-1转染后t-AUCB对小鼠心梗后缺血区心脏组织p-GSK3β表达的影响
        5 PI3K抑制剂wortmannin对t-AUCB干预后小鼠心梗后缺血区心肌KCNJ2 mRNA表达的影响
        6 PI3K抑制剂wortmannin对t-AUCB干预小鼠心梗后缺血区心肌GJA1mRNA表达的影响
    第三章 讨论
    第四章 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3823236