微小RNA-610对血小板源生长因子诱导的血管平滑肌细胞影响的分子机制研究

发布时间：2023-06-17 20:58

　　目的探讨微小RNA-610(miR-610)对血小板源生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的血管平滑肌细胞(VSMCs)的增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法双荧光素酶报告基因分析法验证miR-610对起始识别复合物1(ORC1)的靶向作用。将VSMCs分为8组:空白组、实验组(PDGF-BB处理)和第1至第6转染组(分别转染miR-NC、miR-610模拟物、si-NC、si-ORC1、miR-610+pcDNA、miR-610+pcDNA-ORC1后,进行PDGF-BB处理)。用噻唑蓝法、Transwell实验分别检测细胞活性和迁移、侵袭能力。结果 miR-610靶向负性调控ORC1表达。空白组、实验组、第1转染组至第6转染组细胞活力(48 h)分别为0.41±0.04,0.64±0.07,0.72±0.07,0.48±0.05,0.65±0.06,0.48±0.05,0.45±0.05和0.64±0.06;这8组的迁移细胞数分别为(38.46±6.38),(86.39±8.16),(89.34±8.25),(52.39±5.11),(86.73±8.23),(59.63±5.25...

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【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
    2 实验方法
        2.1 细胞培养、分组和处理[4]
        2.2 以qRT-PCR检测miR-610和ORC1基因表达水平[5]
        2.3 以MTT法检测细胞活力[5]
        2.4 以Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力[5]
        2.5 以蛋白质印记检测蛋白表达水平[6]
        2.6 双荧光素酶报告实验[6]
    3 统计学处理
结 果
    1 PDGF-BB对VSMCs 中miR-610和ORC1表达的影响
    2 miR-610过表达对PDGF-BB诱导的VSMCs 增殖的影响
    3 miR-610过表达对PDGF-BB诱导的VSMCs 迁移、侵袭及相关蛋白表达的影响
    4 抑制ORC1表达对PDGF-BB诱导的VSMCs 增殖、迁移、侵袭及相关蛋白表达的影响
    5 ORC1过表达逆转了miR-610过表达对PDGF-BB诱导的VSMCs增殖、迁移、侵袭及相关蛋白表达的作用
    6 miR-610靶向调控ORC1的表达
讨 论



本文编号：3834126