PiR-16通过靶向hnRNPK调节血管平滑肌细胞的功能和机制的研究

发布时间：2024-01-16 19:34

　　目的:研究piRNA调控人的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells of human,HA-VSMC)增殖迁移的作用和机制,可能为动脉粥样硬化临床靶向治疗提供新的潜在靶点。方法:(1)APOE-/-小鼠高脂喂养12周构建动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)小鼠模型;高通量测序、实时荧光定量聚合链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和低脱氧核糖核苷三磷酸反转录法(RTLP)筛选和鉴定发挥潜在作用的候选基因小分子非编码piRNA(PIWI-interacting RNA,piRNA);检测目的piRNA在各组织和细胞系中表达,选定合适细胞系。(2)piRNA敲低和过表达验证其是否调控HA-VSMC功能;CCK8、Ed U、transwell和细胞划痕实验检测piRNA对HA-VSMC增殖和迁移的影响。(3)生物信息学方法预测目的piRNA下游靶标蛋白,RT-qPCR和蛋白免疫印迹验证其表达变化。(4)合成沉默靶蛋白表达基因,验证是否在细胞中成功表达;CCK...

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
引言
1 材料与方法
    1.1 实验试剂与材料
    1.2 实验仪器与设备
    1.3 溶液配置
    1.4 实验方法
2 实验结果
    2.1 高通量测序筛选发挥潜在功能的piRNA
    2.2 piR-16抑制HA-VSMC的增殖和迁移
    2.3 piR-16可以靶向调节hnRNPK蛋白表达
    2.4 hnRNPK可以调节HA-VSMC的增殖和迁移
    2.5 piR-16可以通过靶向hnRNPK调节HA-VSMC的增殖和迁移
    2.6 piR-16可以在通过甲基化调节hnRNPK的表达量
    2.7 piR-16可以在动物体内抑制动脉粥样硬化的发生
    2.8 piR-16在临床样本中的表达情况
3 讨论与展望
结论
参考文献
综述
    综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
缩略词表
致谢



本文编号：3879099