溶血磷脂酸对骨髓间充质干细胞凋亡和自噬的调节及其相互关系的研究

发布时间：2024-03-01 19:44

　　干细胞移植因其可能促进心肌梗死(myocardial infarction, MI)后损伤心肌的修复和再生已经成为当前的研究热点。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, MSCs)具备许多其它干细胞没有的优点而被认为是细胞移植治疗心肌梗死的理想种子细胞。MSCs主要通过分化成心肌细胞、促进血管新生或者旁分泌作用等实现心肌损伤后的修复。然而,心肌梗死导致心肌缺血缺氧和大量氧自由基的产生使移植的干细胞存活率急剧下降,严重影响了干细胞效应功能的发挥。因此,深入了解心脏微环境中干细胞凋亡和抗凋亡机制能够为提高干细胞的治疗效果提供有效的理论依据。我们之前的研究已经对缺氧无血清和过氧化氢刺激诱导的MSCs凋亡及其机制进行了深入研究,并且进一步证明了溶血磷脂酸(Lysophophatidic acid, LPA)作为一种内源性的生物活性磷脂信号小分子可以通过G蛋白偶联的LPA受体有效抑制缺氧无血清(hypoxia/serum deprivation, H/SD)诱导的MSCs的凋亡,但是LPA对过氧化氢诱导的MSCs凋亡是否起抑制作用尚不清楚。自噬是...

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图1-1大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养

细胞分布均勾，呈指纹样螺旋生长；继续传2-3代后，细胞生长状态良好，保持螺旋生长方式不变，细胞呈分布均勾(Passage2和Passage3)(图1-1)。实验中我们使用第2-3代（Passage2-3)MSCs。Passage0 Passage1 Passage....

图1-2过氧化氢诱导MSCs的调亡呈浓度和时间依赖性

现出皱缩、不饱满、体积变小、细胞核碎裂、染色质聚集着色能力增强，呈亮蓝色亮点，表明H2O2导致MSCs细胞发生了调亡（图1-2A)。其中，50|aM和lOOpMH2O2诱导细胞调亡的百分比约为10%,而150nM，200^iM和250|^MH202诱导的调亡细胞百分比分别约为20....

图1-3LPA抑制过氧化氢诱导的MSCs的调亡

图1-3LPA抑制过氧化氢诱导的MSCs的调亡。用不同浓度LPA预处理MSCslh，然后进行H2O2处理4h。（A)和（C)为Hoechst33342染色MSCs细胞，放大倍数为40X。（B)和（D)为AnnexinV/PI双染标记MSCs后进行流式细胞学检测。Annexin....

图1-4LPA通过Lparl/3/Gi蛋白偶联的途径抑制过氧化氢诱导的大鼠MSCs调亡

北化办和K学院中科学院 \4丨：研究卞学位论的siRNA明显敲低（图1-5C)。免疫印迹结果显示：与negative-siRNA相比，Gi2-siRNA和Gi3-siRNA分別敲低并没有完全逆转LPA的抗调亡作用，但是它们同时敲低显著减弱了LPA的抗御亡效应（图1-5D)。由此....

本文编号：3915736