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SDF-1/CXCR4介导的对PI3K/Akt信号的调控对Tip内皮细胞迁移能力的影响

发布时间:2024-05-11 12:04
  第一部分人外周血内皮祖细胞及Tip血管内皮细胞的分离培养与鉴定[目的]探讨人外周血内皮祖细胞的分离与培养方法,拟证实人外周血是内皮祖细胞除了骨髓以外的另一个理想来源。并在一定的体外培养条件下将外周血内皮祖细胞定向诱导分化为Tip血管内皮细胞,研究其生物学活性,不仅为进一步实验研究提供所需的细胞来源,还为干细胞源性血管新生机制提供可靠的实验室依据。[方法]采用Ficoll密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,将其重悬于EGM-2-MV培养基中培养,每日于倒置相差显微镜下观察细胞的生长形态及内皮祖细胞集落形成形态,每隔2天换一次液并于倒置相差显微镜下观察细胞形态,培养至21天时观察Tip血管内皮细胞形态,并收集该时期的贴壁细胞进行流式细胞术、RT-PCR、Western Blot检测Tip血管内皮细胞中PDGF-B、D114血管内皮细胞系特异性基因的表达情况。[结果]分离获得的单个核细胞培养4天后多数呈贴壁生长,7天后形成梭状的内皮样细胞,部分细胞积聚成团形成克隆集落,继续培养21天后的细胞呈鹅卵石样改变,并伸出伪足相互连接形成类似血管腔样结构,形态学表现为Tip血管内皮细胞的形态特点,通...

【文章页数】:62 页

【学位级别】:硕士

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缩略词表
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英文摘要
引言
第一部分 人外周血内皮祖细胞及Tip血管内皮细胞的分离、培养与鉴定
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
第二部分 Tip血管内皮细胞Transwell迁移实验
    前言
    材料与方法
    实验结果
    讨论
    结论
    参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间获得的学术成果
致谢



本文编号:3969924

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