白介素（IL）-35在风湿性二尖瓣狭窄病变瓣膜的表达及刺激作用

发布时间：2024-05-18 11:17

　　[目 的]比较风湿性二尖瓣狭窄(RMS)患者与二尖瓣脱垂患者病变瓣膜IL-35表达量是否存在差异,并进一步分析不同病变程度的风湿性二尖瓣狭窄与IL-35之间存在的相关关系。比较同等浓度IL-35条件下对风湿性二尖瓣狭窄患者来源及健康对照组来源的外周血单个核细胞(PBMC)进行刺激是否存在不同的效果。明确IL-35与风湿性二尖瓣狭窄病变瓣膜狭窄程度的相关性,初步探索IL-35的生物学作用之一刺激自分泌的作用。[方 法]1、收集以二尖瓣狭窄为主的风湿性二尖瓣狭窄患者病变瓣膜组织,根据二尖瓣狭窄程度分为中度、重度二尖瓣狭窄两组及以二尖瓣脱垂患者病变瓣膜组织为对照组,分别为10例中度二尖瓣狭窄患者、12例重度二尖瓣狭窄患者、5例二尖瓣脱垂患者。其中,所有患者均行二尖瓣瓣膜置换手术。通过蛋白印迹法测定瓣膜组织中IL-35的相对表达量。2、收集RMS患者来源的PBMC及健康志愿者来源的PBMC,IL-35体外刺激PBMC获得最佳的刺激条件200ng/mLIL-35刺激48h,并在此条件下,刺激不同来源的PBMC,应用酶联免疫吸附技术测定刺激后PBMC胞内IL-35的表达量。[结 果]1、在瓣膜组织...

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【部分图文】：

图３．ＩＬ－１２家族的成员及各自的组成的亚基及信号传导通路（修改自ＣｈｏｉＪ??ｅｔａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｒｅｖｉｅｗｓ?ｉｎ?ａｌｌｅｒｇｙ＆?ｉｍｍｕｎｏｌｏｙ（２０１５）?４９?（３）：３２７－３３２）?〇??

ａｒｒｖｉｒｕｓ－ｉｎｄｕｃｅｄ??ｇｅｎｅ３，Ｅｂｉ３），两条链之间通过二硫键相结合Ｉ４１１。Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ等人于２００７年最初??报道，ＩＬ－３５是胸腺来源的天然调节性Ｔ细胞（Ｎａｔｕｒａｌ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?Ｔｃｅｌｌｓ，ｎＴｒｅｇｓ）??群体产生的，且具有强大的免....

图４．Ａ．经胸心脏多普勒彩超下观察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｂ．经食??

图４．Ａ．经胸心脏多普勒彩超下观察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｂ．经食??道心脏多普勒彩超下观察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｃ．正中开胸直下换??瓣手术观察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣．??２．２对照组的纳入标准??诊断为先天性二尖瓣脱垂的患者，并进行二尖瓣置换或者二尖瓣成形术。其??他入组条....

图５．为手术室所采不同病变程度的风湿性二尖瓣瓣膜组织

５．２．１血液样本??待符合条件的入组病人进入手术室后，从中心静脉置管中抽取１５ｍＬ静脉血，??分装于５支３ｍＬ规格的ＥＤＴＡ抗凝管中，盖紧盖子后置于平面上轻轻滚动数次??充分混匀，动作迅速轻柔，防止凝血和溶血。随后装于冰盒中转移至实验室。若??可立即分离则置于室温中平衡３０ｍｉ....

图７．比较ＲＭＳ患者来源的ＰＢＭＣ与健康志愿者来源的ＰＢＭＣ在同等刺激??

图６．前期我们探索合适的重组人ＩＬ－３５的浓度及刺激ＰＢＭＣ时间六孔板的??板布局。??３、经上述两步实验后，我们确定了最优的刺激条件，即２００ｎｇ／ｍＬＩＬ－３５朿ＩＪ??激４８Ｌ为了明确ＲＭＳ患者来源的ＰＢＭＣ与健康志愿者来源的ＰＢＭＣ在相同刺??激条件下胞内ＩＬ－３５的表达....

本文编号：3976851