人参皂苷Rg1对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及信号传导机制研究

发布时间：2017-07-26 12:28

  本文关键词：人参皂苷Rg1对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及信号传导机制研究

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【摘要】：[目的]通过氧化低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, ox-LDL)构建人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)氧化应激损伤模型,从细胞、分子以及蛋白质层面,探讨人参皂苷Rg1在内皮细胞炎症反应中的保护作用。[方法]将体外培养的HUVECs,随机分为空白对照组、ox-LDL不同时间(2 h、 6h、12h、24 h)处理组、不同浓度的人参皂苷Rg1 (5、10、20、50μmol/L)预处理组、10μmol/L人参皂苷Rg1+PD98059(5μmol/L)共同处理组等。应用蛋白质印迹分析方法(western blotting)检测,血管细胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)、细胞间黏附分子1(intercelluar adhesion molecule-1, ICAM-1)、核因子κB (nuclear factor-κB, NF-κB)以及MAP激酶信号系统的胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2, ERK1/2)的蛋白表达及变化规律；利用荧光探针DCFH-DA (2',7'-dichlorofluorescein diacetate)进行细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化的检测。[结果]在24小时内,50μg/mL Ox-LDL诱导HUVECs内ROS水平及VCAM-1、ICAM-1的表达上调,呈时间依赖性；同时HUVECs内NF-κB的激活及ERK1/2磷酸化水平上调,24h效果最明显。10μmol/L人参皂苷Rg1抑制由Ox-LDL的诱导HUVECs内VCAM-1、ICAM-1的表达以及ROS水平。添加ERK1/2的抑制剂PD98059(5μmol/L)后发现,10μmol/L人参皂苷Rg1使Ox-LDL诱导HUVECs内Iκ-B表达量进一步升高,而VCAM-1和ICAM-1的表达量进一步下调。[结论]人参皂苷Rg1对ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞损伤发挥保护作用,一方面是通过降低细胞内ROS水平,另一方面通过抑制HUVECs内ERK1/2磷酸化来降低黏附分子的表达水平来实现的
【关键词】：人参皂苷Rg1 动脉粥样硬化 细胞黏附分子 活性氧 MAP激酶信号系统
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R54
【目录】：

• 缩略词表5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-29
• 结果29-36
• 讨论36-40
• 结论40-41
• 参考文献41-47
• 综述47-57
• 参考文献51-57
• 攻读学位期间获得的学术成果57-58
• 致谢58-59

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本文编号：576409