内吗啡肽-1后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

发布时间：2017-08-21 17:05

  本文关键词：内吗啡肽-1后处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

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【摘要】：背景:急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)的发生率逐年增多,首选有效治疗措施是恢复血液灌注,但是伴随而来的缺血再灌注损伤也成为临床一个亟待解决的难题,众多学者针对缺血再灌注损伤的解决措施进行了大量的研究,药物后处理相对于缺血预处理的时间限制性和缺血后处理的创伤性,成为改善缺血再灌注损伤的一种更为可行的措施。有研究证实外源性的阿片类药物可以拮抗缺血再灌注损伤,发挥一定的心肌保护作用。内吗啡肽(Endomorphin,E M)为1997年发现的内源性阿片肽,在机体中发挥着重要的功能,具有广阔的应用前景,EM有两种:EM-1(Tyr-Pro-Trp-Phe-NH2)和EM-2(Tyr-Pro-Phe-P he-NH2),其中EM-1在脑中的分布位置较为广泛且浓度更高,在心血管调节中可能发挥着重要作用,然而内吗啡肽对心肌缺血再灌注损伤的影响尚未见相关报道。因此,本研究通过复制心肌缺血再灌注损伤模型,观察EM-1后处理对心肌缺血再灌注损伤的影响,并初步探讨其可能的作用机制。目的:观察内吗啡肽-1(Endomorphin-1,EM-1)后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响,并初步探讨EM-1可能的作用机制。方法:实验大鼠随机分为10组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、缺血后处理组(IPO组)、EM-1后处理10、20和50μg/kg(EM10、EM20、EM50)三组、内吗啡肽-1 50μg/kg+纳洛酮3mg/kg后处理组(EM50+Nal组)、纳洛酮3mg/kg后处理组(Nal组)、内吗啡肽-1 50μg/kg+渥曼青霉素15μg/kg后处理组(EM50+Wort组)和渥曼青霉素15μg/kg后处理组(Wort组)。结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支30min,再灌注120min复制缺血再灌注模型。实验过程中动态监测心率(HR)、平均动脉压(MAP)和Ⅱ导联心电图(ECG)。再灌注结束后取动脉血检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(CTn I)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量或活性。光学显微镜检查心肌细胞形态。TTC双染色法测定心肌梗死面积。RT-PCR和Western-blot技术检测心肌组织中Bcl-2、Bax基因及caspase-3蛋白的表达。结果:与S组比较,IR组各时间点心率、平均动脉压和心率-血压乘积均显著降低(P0.05~P0.01);血浆中LDH活性、CK-MB和CTn I、IL-6和TNF-α含量增加,同时MDA含量增加和SOD活性降低(P0.05~P0.01);心肌细胞损伤明显。与IR组比较,IPO组和EM-1三个剂量组各时间点心率、平均动脉压和心率-血压乘积均有所增高(P0.05~P0.01);血浆中LDH活性、CK-MB和CTn I、IL-6和TNF-α含量有所下降,同时MDA含量降低和SOD活性增加(P0.05~P0.01),且EM对CK-MB、CTn I、IL-6、TNF-α和MDA含量及SOD活性的影响呈剂量依赖;心肌梗死面积减少(P0.05~P0.01);心肌细胞损伤减轻。与EM50组比较,EM50+Nal组和EM50+Wort组各时间点心率、平均动脉压和心率-血压乘积均有所降低(P0.05~P0.01);血浆中LDH活性、CK-MB和CTn I、IL-6和TNF-α含量增加,同时MDA含量增加和SOD活性降低(P0.05~P0.01);心肌梗死面积增加(P0.05~P0.01)。与IR组比较,EM50组Bcl-2/Bax比值增加和caspase-3蛋白表达减少(P0.05~P0.01);与EM50组比较,EM50+Wort组Bcl-2/Bax比值减少和cleaved caspase-3蛋白表达增加(P0.05~P0.01)。结论:内吗啡肽-1后处理可减轻心肌缺血再灌注损伤和抵抗细胞凋亡,其发挥效应的机制可能与血浆中IL-6和TNF-α含量降低、MDA含量降低及SOD活性增加有关,阿片受体和PI3K/Akt信号通路可能发挥一定的介导作用。
【关键词】：内吗啡肽-1 阿片受体 心肌缺血再灌注 药物后处理 心肌保护 细胞凋亡
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R542.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 第一部分 内吗啡肽-1 后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响10-33
• 1 前言10-11
• 2 材料与方法11-15
• 3 结果15-26
• 4 讨论26-29
• 5 小结29
• 参考文献29-33
• 第二部分 阿片受体在内吗啡肽-1 后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤影响中的作用33-47
• 1 前言33-34
• 2 材料与方法34
• 3 结果34-43
• 4 讨论43-44
• 5 小结44-45
• 参考文献45-47
• 第三部分 内吗啡肽-1 后处理心肌保护中的信号通路及对细胞凋亡的影响47-66
• 1 前言47
• 2 材料与方法47-49
• 3 结果49-60
• 4 讨论60-63
• 5 小结63
• 参考文献63-66
• 结论66-67
• 致谢67-68
• 附录A 中英文词汇及缩写对照表68-69
• 附录B 主要操作方法和试剂配制69-74
• 附录C 参与课题及发表论文情况74-76
• 附录D 综述76-83
• 参考文献80-83

【参考文献】

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1 祁元明,杨顶建,段昕,杨帆,李世荣,沈剑敏,王锐;内吗啡肽抑制苯肾上腺素和血管紧张素Ⅱ诱导的离体大鼠胸主动脉环收缩(英文)[J];Acta Pharmacologica Sinica;2002年01期

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本文编号：714067