Rho激酶抑制剂法舒地尔对人晶状体上皮细胞增殖、迁移及细胞外基质合成的影响

发布时间：2017-04-15 02:10

  本文关键词：Rho激酶抑制剂法舒地尔对人晶状体上皮细胞增殖、迁移及细胞外基质合成的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景与目的 保留囊带的白内障手术摘除术后晶状体上皮细胞(LECs)产生增殖、迁徙、胶原异常分泌、沉积及晶状体纤维再生致使后囊膜混浊（posterior capsularopacification，PCO）即后发性白内障。后发性白内障是最常见的手术后视力再次下降的长期并发症。白内障术中的机械性创伤及术后的炎症反应等均可引起房水中大量细胞因子的分泌及释放，这些细胞因子作为细胞外的刺激信号与晶状体上皮细胞膜上的表面受体结合后导致细胞内信号转导和细胞核内相应基因转录活化。在此过程中，胞内的信号传导通路对PCO的形成起着重要的作用。相关研究表明Rho激酶可以通过激活下游的关键靶效应分子Rho激酶来调节晶状体上皮细胞的多种生物学行为。法舒地尔(fasudil)是目前在临床及实验中最常用的Rho/Rho激酶信号路径的选择性抑制剂，不仅能抑制细胞内游离钙的活动，并且抑止细胞内肌球蛋白轻链(MLC)磷酸化的程度，从而抑制细胞骨架的合成。关于法舒地尔对晶状体上皮细胞的作用机制目前报道尚少，本实验通过使用不同浓度法舒地尔干预体外培养人晶状体上皮细胞，，选择不同时间点，分别观察其对细胞增殖、迁移及细胞外基质合成方面的影响，并探讨其作用机制。 实验方法 体外培养人晶状体上皮细胞HLE-B3，分为以下5组：对照组、药物处理组，药物处置组法舒地尔的浓度分别为10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L。作用12、24和48h选用CCK-8法检测细胞增殖。Transwell小室迁移实验检测细胞迁移能力。ELISA法检测各组细胞上清I型胶原（COL I）、纤维连接蛋白（FN）及细胞内α-SMA的表达。 结果 CCK-8法显示，经法舒地尔干预后细胞的增殖受到抑制，呈明显的浓度依赖性和时间依赖性（P0.05）。Transwell小室迁移实验显示，48小时后对照组细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数为(29.20±1.28)个，药物处理组（法舒地尔10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L）迁移的细胞数分别为（24.40±1.33、17.00±1.10、14.60±0.68、6.60±1.29）个，不同浓度的法舒地尔对HLE-B3细胞的迁移均有抑制作用（P＜0.05）。不同浓度法舒地尔干预组细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和I型胶原蛋白（COL I）含量及细胞内骨架蛋白α-SMA的表达显著低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 1．体外培养人晶状体上皮细胞HLE-B3表达一定量的COL I、FN及α-SMA。 2．Rho/Rho激酶信号转导通路抑制剂法舒地尔能抑制体外培养人晶状体上皮细胞增殖、迁移及细胞外基质的合成。
【关键词】：晶状体上皮细胞 法舒地尔 后发性白内障 Rho
【学位授予单位】：郑州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R779.66
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略词10-11
• 引言11-13
• 材料和方法13-17
• 结果17-21
• 讨论21-26
• 结论26-27
• 参考文献27-29
• 综述29-50
• 参考文献45-50
• 个人简历50-51
• 在校期间发表的学术论文及研究成果51-52
• 致谢52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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本文编号：307354