靶向TGF-βⅡ型受体胞外段核酸适配子S58结构优化筛选及结合位点预测研究

发布时间：2021-04-05 00:21

　　研究背景：青光眼滤过手术是目前治疗青光眼最重要的方法，但是手术失败的主要原因是手术后滤过泡的瘢痕纤维化。临床上往往术中使用5-氟尿嘧啶（5-FU）、丝裂霉素（MMC）等抗代谢药物来抑制术后滤过泡的疤痕形成，以提高手术成功率，但仍然有诸如滤过泡渗漏、低眼压、眼内炎、角膜损伤等并发症的发生。因此，寻求一种更为安全、有效、毒性小的药物作用于抗青光眼术后抑制瘢痕形成是目前的研究热点。滤过泡的瘢痕化与多种致纤维化因子的活性密切相关，其中转化生长因子-β（transforming growthfactor-β，TGF-β）的作用至关重要，其亚型TGF-β2在眼部瘢痕疾病的发生中起主要作用。TGF-β与其Ⅱ型受体（TGF-β receptorⅡ，TβRⅡ）结合作为致组织纤维化的启动环节中的关键步骤，促使成纤维细胞转分化为具有收缩功能的肌成纤维细胞，合成大量的细胞外基质，在组织瘢痕化的发生中起至关重要的作用。因此，通过拮抗或者封阻TGF-β与TβRⅡ的结合，可以作为青光眼术后抗瘢痕治疗新的研究途径。本课题组在前期的研究中使用SELEX技术筛选得到了靶向TβRⅡ胞外段的核酸适配子S58，并在体外实验中验... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：61 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HTFs的光镜图像(×40)

剪切后的 ssDNA 中 S58-5 即 S58 3’端剪切 5bp 的结合力最强，但仍较 S58 降低。因此不论从 5’端还是 3’端开始剪切 S58，得到的结构优化后 DNA 亲和力与 S58 相比均下降。图 2 不同浓度的核酸适配子 S58 与 TβRⅡ的亲和力

第三军医大学硕士学位论文 2 可见，核酸适配子 S58 在浓度为 5nmol/L、10nmol/L 时与 TβRⅡ378arc/s、389 arc/s，比低浓度 1nmol/L、2nmol/L 时明显要高。图 3 5nmol/L 下，S58 与 TβRⅡ的结合反应峰值维持在 350arc/s，峰值 8~9min。其次为 S58 3’端剪切 5bp 结合反应峰值达 200 arc/s，S58 合反应峰值达 160 arc/s，S58 3’端剪切 15bp 仅为 130 arc/s，峰值平台in。S58 5’端剪切的结合反应峰值均仅达 80~120 arc/s，峰值平台期维切后的 ssDNA 中 S58-5 即 S58 3’端剪切 5bp 的结合力最强，但仍较 S从 5’端还是 3’端开始剪切 S58，得到的结构优化后 DNA 亲和力与

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3118774