高糖“代谢记忆”对糖尿病大鼠视网膜神经病变的影响
本文关键词：高糖“代谢记忆”对糖尿病大鼠视网膜神经病变的影响，由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】：目的： 研究高糖“代谢记忆”对糖尿病大鼠视网膜中神经递质Glu与GABA表达以及神经细胞凋亡的影响，探讨胰岛素替代治疗与血糖回归后能否有效抑制这些前期高血糖引起的病理变化。 方法： 体重为200±20g的6周龄雄性SD大鼠（清洁级）60只，随机分组法分成三组：正常组（NC组）；糖尿病模型组（DM组）；代谢记忆组（DI组）。糖尿病模型组与代谢记忆组大鼠给予一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ，Sigma公司)60mg/kg,诱导实验性1型糖尿病模型，72h后取尾静脉血，血糖值≥16.7mmol/L者为糖尿病大鼠；正常对照组大鼠则注射等量0.1mmol/L柠檬酸缓冲液（pH4.5）。 DM组实验整个阶段都不行血糖干预。DI组，糖尿病病程6周后开始接受6周胰岛素（Insulin）强化治疗组；DI组每日早8时、晚8时中长效胰岛素（诺和灵N）颈背部皮下注射各1次，单只总用量为6-8IU/D，每3日测次血糖便于调整胰岛素剂量，目标血糖值控制于10mmol/L以下。其余各组给予等剂量的生理盐水皮下注射。 DM组6周时取15只作为DM1组，过量麻醉处死取眼球，制成石蜡块或-80℃冻存备用。DM组其余15只大鼠作为DM2组。各组12周时取材。高效液相色谱法检测各组大鼠视网膜中Glu、GABA的浓度；RT-PCR与免疫组化半定量分析GAD的表达；TUNEL法计数视网膜神经细胞凋亡。 结果： DI组视网膜中Glu和GABA浓度较DM1组和NC组升高，较DM2组降低，组间差异有统计学意义（P0.05），但DI组Glu/GABA比值与DM2组差异无统计学意义（P0.05）。NC组、DM1组、DI组与DM2组GAD mRNA相对表达量分别为：0.5774±0.0690、0.4724±0.0511、0.4087±0.0266、0.3113±0.0239，组间差异有统计学意义（P0.05），DI组与DM1组mRNA表达均较NC组明显降低（P0.05），DI组较DM2组明显升高（P0.05）。GAD免疫组化OD值分析检测结果趋势同RT-PCR一致。神经细胞凋亡计数，NC组、DM1组、DI组与DM2组四组分别为：（4.6±1.9）㳠、（8.9±2.2）㳠、（11.5±2.3）㳠、（15.9±3.2）㳠。各组差异有统计学意义（P0.05），DI组较NC组、DM1组明显升高（P0.05），较DM2组降低（P0.05）。 结论： 后期胰岛素强化治疗能部分降低糖尿病大鼠视网膜递质Glu与GABA的含量及神经细胞的凋亡率，但无法使其回归到正常水平，且对高血糖引起Glu/GABA的比值升高没有影响。Glu与GABA的紊乱可能参与高糖“记忆”引起视网膜继续损害。
【关键词】：糖尿病视网膜病变 谷氨酸 γ-氨基丁酸 胰岛素 谷氨酸脱羧酶 高效液相色谱
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R774.1;R587.2
【目录】：
- 英文缩写一览表4-6
- 中文摘要6-8
- ABSTRACT8-11
- 前言11-14
- 实验材料14-18
- 实验方法18-27
- 结果27-38
- 讨论38-43
- 结论43-44
- 参考文献44-48
- 致谢48-49
- 综述49-57
- 参考文献54-57
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本文关键词：高糖“代谢记忆”对糖尿病大鼠视网膜神经病变的影响，由笔耕文化传播整理发布。
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