白细胞介素8及其受体拮抗剂G31P对视网膜神经节细胞的影响

发布时间：2021-09-17 13:58

　　目的:青光眼作为全球不可逆性致盲的首要原因,是一组以视神经结构性损伤及视网膜神经节细胞进行性凋亡为特征的退行性视网膜疾病。近年来有研究显示细胞因子在青光眼发病过程中具有不可忽视的作用。在青光眼患者房水和外周血中检测发现CXCL8等细胞因子的异常表达,同时细胞体外培养实验曾报道CXCL8对神经元细胞表现为毒性作用,提示CXCL8可能参与了视网膜神经节细胞的凋亡及视神经损伤过程。白细胞介素8又称CXCL8,属CXC趋化因子亚家族,通过结合其受体CXCR1/2,广泛参与炎症,血管生成,肿瘤细胞增殖及迁移的调节。CXCR1/2拮抗剂G31P可与CXCR1/2高亲和力结合,阻断CXCL8发挥作用,在抗炎抗肿瘤等研究中应用广泛。本次实验目的为探究CXCL8对视网膜神经节细胞凋亡的损伤及其受体拮抗剂G31P能否减缓其影响。方法:1.细胞的培养:体外培养小鼠RGC-5细胞,常规培养于含10%FBS、100 U·m L^-1青、链霉素的DMEM-F12培养基中。静置于37℃、5%CO₂的细胞培养箱中,24h后换液。2.细胞分组:将处于对数生长期的RGC-5分成以... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

RGC-5细胞CXCR1和CXCR2表达情况.(A):正常对照组及CXCL8处理24h后RGC-5细胞内CXCR1/2mRNA表达水平.琼脂糖电泳结果显示RT.(B-C):PCR电泳统计学软件分析

图 2 CCK-8 试验检测对照组和不同浓度 CXCL8 处理3 G31P 拮抗 CXCL8 诱导的 RGC-5 细胞凋亡应用Hoechst 33258 染色法观察了 CXCL核的影响，以验证 CXCL8 对 RGC-5 细胞活性以及 G31P 处理是否可改变其作用。在 CXCL现为浓染片段化的蓝色荧光，有细胞凋亡的特胞染色质浓缩，凋亡现象减轻，正常对照组视通过流式细胞术对各组细胞凋亡率进行测胞凋亡的影响。由图 4 可以看出，相对于未处各期细胞总数由 2.8%±0.20%上升至 5.62%±0但在 G31P 预处理组，细胞凋亡数量明显减轻p<0.01)。以上结果显示，给予 CXCL8 刺激可诱

3 G31P 拮抗 CXCL8 诱导的 RGC-5 细胞凋亡应用Hoechst 33258 染色法观察了 CXCL8及CXCL8 和G31P核的影响，以验证 CXCL8 对 RGC-5 细胞活性的抑制作用是否与以及 G31P 处理是否可改变其作用。在 CXCL8 单独处理组可见染现为浓染片段化的蓝色荧光，有细胞凋亡的特征，而在 G31P 处胞染色质浓缩，凋亡现象减轻，正常对照组视野下几乎没有凋亡通过流式细胞术对各组细胞凋亡率进行测定，评估 G31P 对 胞凋亡的影响。由图 4 可以看出，相对于未处理细胞，CXCL8 各期细胞总数由 2.8%±0.20%上升至 5.62%±0.50%，差异具有统计但在 G31P 预处理组，细胞凋亡数量明显减轻，基本同正常对照p<0.01)。以上结果显示，给予 CXCL8 刺激可诱导 RGC-5 细胞发生受体拮抗剂 G31P 可减轻这种凋亡作用，从而起到保护作用。

【参考文献】：
期刊论文
[1]白细胞介素-4和白细胞介素-12对纯化培养小鼠视网膜神经节细胞存活的影响[J]. 魏炜,黄萍,张绍丹,黄琛,张绍敏,张纯,王薇.  中国实验动物学报. 2011(04)
[2]MMP-2/TIMP-2系统与原发性开角型青光眼的相关性分析[J]. 梁好,宋明胜.  西安交通大学学报(医学版). 2009(06)
[3]开角型青光眼患者外周血细胞因子与视神经损伤关系的研究[J]. 黄萍,齐越,徐永胜,张纯.  眼科研究. 2007(06)



本文编号：3398869