TgN（p53mt-LMP1）/HT转基因小鼠鼻咽黏膜上皮细胞生物学表型特征与p53信号传导通路相关性及益气解毒方干预研

发布时间：2021-09-24 01:34

　　本研究分三部分完成。第一部分TgN（p53mt-LMP1）/HT小鼠鼻咽黏膜上皮细胞生物学表型与p53信号传导通路特征相关性的动态研究目的：明确TgN （p53mt-LMP1）/HT转基因小鼠鼻咽/鼻腔上皮细胞生物学表型与P53信号传导通路特征相关性。方法：G10代模型鼠按月龄随机分为3组,12、15、18月龄组,每组各12只。每组另设未转基因野生小鼠对照组,每组12只。采用HE染色法和电镜观察不同月龄转基因小鼠鼻腔/鼻咽黏膜病理变化及用免疫组化、Western-blot法检测p53信号通路相关蛋白（包括p53、p21、CDK2和cyclinD1）的表达水平。并对各蛋白表达水平进行相关性分析。结果：TgN（p53mt-LMP1）/HT转基因小鼠鼻咽/鼻腔黏膜异型性改变随月龄增加而呈现加重趋势,TgN（p53mt-LMP1）/HT转基因小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞细胞核、线粒体形态发生改变,对照组无相应改变。各月龄转基因鼠鼻咽/鼻腔p53蛋白表达水平随月龄增长而呈现增加趋势,其中15月、18月龄小鼠鼻咽上皮细胞p53蛋白表达水平高于12月龄小鼠,差异有统计学意义（P值均小于0.05）,；各... 

【文章来源】：湖南中医药大学湖南省

【文章页数】：112 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 TgN(p53mt-LMP1)/HT小鼠鼻咽黏膜上皮细胞生物学表型与p53信号传导通路特征相关性的动态研究
    1 材料与方法
        1.1 主要仪器设备
        1.2 实验材料
            1.2.1 主要试剂
            1.2.2 主要试剂的配制
        1.3 实验方法
            1.3.1 动物分组
            1.3.2 取材
            1.3.3 鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞生物学表型特征观察
            1.3.4 鼻咽/鼻腔黏膜上皮p53通路关键蛋白表达活性的免疫组织化学检测
            1.3.5 鼻咽/鼻腔黏膜上皮p53通路关键蛋白表达活性的Western-blot验证
            1.3.6 TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因模型鼠癌前病变判断
        1.4 统计学分析
    2 结果
        2.1 鼻咽黏膜上皮细胞生物学表型特征
            2.1.1 常规病理组织学特征
            2.1.2 超微病理学特征
        2.2 各月龄小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白表达水平
            2.2.1 各月龄小鼠鼻咽黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白表达水平
            2.2.2 各月龄小鼠鼻腔黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白表达水平
            2.2.3 各月龄转基因小鼠鼻咽上皮p53通路关键蛋白之间表达相关性分析
            2.2.4 各月龄转基因小鼠鼻腔上皮p53通路关键蛋白之间表达相关性分析
        2.3 各月龄转基因小鼠鼻咽/腔黏膜p53通路关键蛋白表达Western-blot法验证(IOD值)
            2.3.1 各月龄小鼠鼻咽黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白表达水平
            2.3.2 各月龄小鼠鼻腔黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白表达水平
            2.3.3 各月龄小鼠鼻咽黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白之间表达相关性分析
            2.3.4 各月龄小鼠鼻腔黏膜p53通路关键蛋白之间表达相关性分析
    3. 讨论
        3.1 TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻腔/鼻咽黏膜上皮细胞生物学表型
        3.2 各月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠与正常野生鼠p53通路关键蛋白比较
        3.3 各月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠p53信号传导通路特征
        3.4 各月龄TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻咽/鼻腔p53通路关键蛋白表达水平与癌前病变关系
        3.5 小结
第二部分 益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞生物学表型及p53信号传导通路的影响
    1 材料与方法
        1.1 主要仪器设备
        1.2 实验材料
            1.2.1 主要试剂与药物
            1.2.2 实验用药品、主要试剂的配制
        1.3 实验方法
            1.3.1 动物分组
            1.3.2 动物干预
            1.3.3 取材
            1.3.4 鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞生物学表型特征观察
            1.3.5 鼻腔/鼻咽黏膜上皮细胞p53传导通路关键蛋白表达水平的免疫组织化学法检测
            1.3.6 鼻腔/鼻咽黏膜上皮细胞p53传导通路关键蛋白表达水平的Western-blot法验证
            1.3.7 鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞癌前病变判断标准
        1.4 统计学分析
    2 结果
        2.1 实验小鼠一般情况
        2.2 各组小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞生物学表型特征
            2.2.1 各组小鼠常规病理组织学特征
            2.2.2 各组小鼠超微病理学特征
        2.3 各组小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞P53通路关键蛋白表达水平
            2.3.1 各组小鼠鼻咽黏膜上皮细胞P53通路关键蛋白表达水平
            2.3.2 各组小鼠鼻腔黏膜上皮细胞P53通路关键蛋白表达水平
        2.4 各组小鼠鼻咽/鼻腔黏膜上皮细胞P53通路关键蛋白表达水平验证
            2.4.1 各组小鼠鼻咽黏膜上皮细胞P53通路关键蛋白表达水平
            2.4.2 各组小鼠鼻腔黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白表达水平
    3. 讨论
        3.1 祖国医学对鼻咽癌的认识及益气解毒方对其干预研究状况
        3.2 益气解毒方干预TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻咽/腔黏膜癌前病变形态学观察
        3.3 益气解毒方对TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠鼻咽/腔黏膜上皮细胞p53通路关键蛋白表达的影响
第三部分 DNP诱发TgN(p53mt-LMP1)/HT转基因小鼠多系统肿瘤初步观察
    1 材料与方法
        1.1 主要仪器
        1.2 主要实验药品、试剂及配制
        1.3 实验动物分组及处理
    2 结果
        2.1 各组小鼠发生其他部位恶性病变情况分析
    3 讨论
结论
综述(EBV-LMP1与p53对鼻咽上皮细胞癌变的影响)
参考文献



本文编号：3406832