腺病毒介导slit2基因转染人视网膜色素上皮细胞对RF/6A细胞迁移及管腔形成的影响

发布时间：2021-10-23 00:20

　　目的观察共培养模型下,腺病毒介导的slit2基因转染人视网膜色素上皮细胞（RPE）对猴脉络膜视网膜血管内皮细胞（RF/6A）迁移及管腔形成的影响。方法用腺病毒介导的slit2基因（Ad-slit2）转染RPE细胞,同时设空载体腺病毒转染组（Ad-null）及空白对照组。转染24 h及48 h后,采用RT-PCR及Western blot法分别检测RPE细胞中slit2、VEGF的mRNA及蛋白表达情况;ELISA法检测RPE细胞培养基上清液中VEGF的分泌水平;建立RPE&RF/6A共培养模型,采用Transwell小室法及Matrigel胶体外三维成型法分别检测过表达slit2基因的RPE细胞对RF/6A细胞迁移能力及管腔形成能力的影响,并计算迁移数目及管腔形成长度、管腔数。结果 Ad-slit2转染24、48 h后,RPE细胞在基因及蛋白水平表达slit2、VEGF均有明显增高;ELISA结果显示过表达slit2基因的RPE细胞其培养基上清液中分泌型VEGF水平增高;在RPE&RF/6A共培养下,空白对照组、Ad-null转染24 h组、Ad-slit2转染24 h... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2015,37(16)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1材料与方法
    1. 1实验细胞
    1. 2 实验试剂
    1. 3 细胞培养
    1. 4 RT-PCR 检测
    1. 5 Western blot 检测
    1. 6 ELISA 检测
    1. 7 迁移实验( Transwell 小室法)
    1. 8 管腔形成实验( Matrigel 胶体外三维成型法)
    1. 9 统计学分析
2 结果
    2. 1Ad-slit2 转染对 RPE 细胞 slit2 mRNA 及蛋白表达的影响
    2. 2Ad-slit2 转染对 RPE 细胞中 VEGF mRNA 及蛋白表达的影响
    2. 3 Ad-slit2 转染对 RPE 细胞培养基上清液内 VEGF分泌水平的影响
    2. 4 迁移实验
    2. 5 管腔形成实验
3 讨论



本文编号：3452099