BXD小鼠视神经再生的基因背景研究
发布时间：2021-10-27 07:43
目的:本研究旨在利用BXD重组近交系小鼠研究基因遗传背景对小鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞轴突再生的影响。方法:本研究采用钳夹视神经的方法造成小鼠的视神经损伤。为研究视神经再生,我们构建了以腺相关病毒2（AAV2）为载体的含有磷酸酯酶与张力蛋白同源物（Pten）基因靶向性序列的小发夹RNA（sh RNA）质粒。通过玻璃体腔注射的方式使该质粒转染至小鼠视网膜神经节细胞并沉默其中Pten基因的表达,再联合玻璃体腔注射酵母聚糖（Zymosan）以及环腺苷酸拟似物（8-CPT-c AMP）造成轻度的眼内炎症反应来诱导视神经再生。我们将该联合治疗方案应用于9个种系的小鼠,包括7个BXD重组近交系小鼠（BXD11,BXD29,BXD31,BXD38,BXD40,BXD75,BXD102）以及它们的亲代小鼠（C57BL/6J和DBA/2J）。在视神经损伤2周后,检查视神经内距损伤部位0.5mm和1mm处的再生轴突的数量,并测量5个最长的再生轴突沿神经走行的距离和单个最长的再生轴突所达到的最远距离。将不同小鼠的再生轴突计数数据以及长度数据分别代入Gene Network数据库中进行基因组关联分析并绘制...
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
BXD重组近交系小鼠繁殖策略示意图
114 基因 Ppia 在正常视网膜及视神经损伤后的视网膜表达情况。常视网膜中的表达在所有 BXD 小鼠中表达稳定，而且与正常视神经损伤 5 天后的 Ppia 表达依然稳定，且组间未见明显差 GeneNetwork 数据库 mRNA 微阵列数据, 为本实验组前期数
天津医科大学博士学位论文 一、联合治疗诱导小鼠视神经损伤与再生应，这有助于视神经轴突的再生[3-4]。在视神经损伤的 12 天后，即小鼠处死的 2天前，向实验眼玻璃体腔内注射 2 μL 霍乱毒素 B 型亚单位（CTB）用来标记再生的轴突。在视神经损伤的 14 天后，即玻璃体腔注射 CTB 的两天后，通过腹腔注射甲苯噻嗪（100 mg/kg）与氯胺酮（15 mg/kg）的混合液将实验小鼠深度麻醉后处死并立即进行心脏灌注（PBS+4%PFA），于 PFA 中浸泡固定一日后进行解剖并获取视网膜及视神经（图 1.1.9）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Collapsin response mediator protein-2 plays a major protective role in acute axonal degeneration[J]. Jian-Nan Zhang,Jan C.Koch. Neural Regeneration Research. 2017(05)
[2]Calcium channel inhibition-mediated axonal stabilization improves axonal regeneration after optic nerve crush[J]. Vinicius T.Ribas,Paul Lingor. Neural Regeneration Research. 2016(08)
[3]The progress in optic nerve regeneration, where are we?[J]. Jennifer Wei Huen Shum,Kai Liu,Kwok-fai So. Neural Regeneration Research. 2016(01)
本文编号：3461167
【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校
【文章页数】：108 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
BXD重组近交系小鼠繁殖策略示意图
114 基因 Ppia 在正常视网膜及视神经损伤后的视网膜表达情况。常视网膜中的表达在所有 BXD 小鼠中表达稳定，而且与正常视神经损伤 5 天后的 Ppia 表达依然稳定，且组间未见明显差 GeneNetwork 数据库 mRNA 微阵列数据, 为本实验组前期数
天津医科大学博士学位论文 一、联合治疗诱导小鼠视神经损伤与再生应，这有助于视神经轴突的再生[3-4]。在视神经损伤的 12 天后，即小鼠处死的 2天前，向实验眼玻璃体腔内注射 2 μL 霍乱毒素 B 型亚单位（CTB）用来标记再生的轴突。在视神经损伤的 14 天后，即玻璃体腔注射 CTB 的两天后，通过腹腔注射甲苯噻嗪（100 mg/kg）与氯胺酮（15 mg/kg）的混合液将实验小鼠深度麻醉后处死并立即进行心脏灌注（PBS+4%PFA），于 PFA 中浸泡固定一日后进行解剖并获取视网膜及视神经（图 1.1.9）。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Collapsin response mediator protein-2 plays a major protective role in acute axonal degeneration[J]. Jian-Nan Zhang,Jan C.Koch. Neural Regeneration Research. 2017(05)
[2]Calcium channel inhibition-mediated axonal stabilization improves axonal regeneration after optic nerve crush[J]. Vinicius T.Ribas,Paul Lingor. Neural Regeneration Research. 2016(08)
[3]The progress in optic nerve regeneration, where are we?[J]. Jennifer Wei Huen Shum,Kai Liu,Kwok-fai So. Neural Regeneration Research. 2016(01)
本文编号：3461167
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