长链非编码RNA AC026166.2-001在喉癌发生中的作用及其机制研究

发布时间：2021-11-23 06:23

　　研究目的长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）是非编码RNA中的一种,它的长度一般大于200nt。因为不具备翻译蛋白质的功能,它们经转录后大量存在于细胞核或胞浆内。大量存在的lncRNA在一段时间内被认为是无用的,但经过国内外学者大量研究发现lncRNA与肿瘤的发生、发展密切相关。之前有研究表明lncRNA AC026166.2-001在喉癌组织和转移淋巴结中的表达与癌旁组织存在差异,可作为喉癌病人诊断及预后的分子标志物。本研究进一步探讨lncRNA AC026166.2-001在喉癌细胞中的生物学作用及其发挥作用的相关机制。实验方法1.首先针对lncRNA AC026166.2-001核酸序列设计并合成过表达慢病毒包装颗粒和3条siRNA。2.应用慢病毒和小干扰技术通过转染进入喉癌细胞,对lncRNA AC026166.2-001的表达进行上调和下调。3.采用荧光定量逆转录-聚合酶反应（quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRTPCR）验证lncRNA AC02616... 

【文章来源】：宁波大学浙江省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

总RNA非变性1%琼脂糖凝胶电泳Fig.3.1Non-denaturing1%agarosegelelectrophoresisoftotalRNA

3.2 AC026166.2-001（A、B）和 GAPDH（C、D）溶解曲线及解链析Fig.3.2 The amplification curve and dissociation curve analysis of AC026166(A、B) and GAPDH (C、D)能获得实验荧光倒置显微镜观察转染效率病毒载体中包含一个绿色荧光蛋白标签，转染进细胞后可表达绿。AMC-HN-8 和 TU-212 喉癌细胞经慢病毒转染 4 天后，荧光倒置见大量绿色荧光蛋白的表达，由此可初步判定转染成功。由图可达 80%(图 3.3)。

图 3.3 绿色荧光蛋白Fig.3.3 Green fluorescent protein (GFP)证PCR 技术检测 LV5-AC026166.2-001 和 LV5-NC 分别 后 lncRNA AC026166.2-001 的表达量，从图中可以-001 转染喉癌细胞后，上述两种喉癌细胞中 lncRNA著上升（图 3.4）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]miRNA-17-5p靶向调节CDKN1A对鼻咽癌细胞增殖的影响[J]. 王雯珺,郭敏章,列璞怡,伍思培.  中国临床研究. 2016(02)
[2]miR-7抑制喉鳞癌Hep-2细胞增殖及迁移的研究[J]. 徐瑶,欧阳学农,陈曦,赵忠全,綦晓艳.  临床肿瘤学杂志. 2015(03)
[3]miRNA-7通过EGFR/PI3K/Akt通路抑制鼻咽癌5-8F细胞增殖[J]. 孙栋勋,黄栋栋,金巧智,陈武兵,蔡志毅.  中国病理生理杂志. 2014(10)
[4]放射敏感性、X线辐射剂量对鼻咽癌细胞miR-7表达的影响[J]. 陈智贤,孙爱民,陈勇,刘英,詹军芳,陈龙华,袁亚维.  南方医科大学学报. 2010(08)
[5]不同辐射抗拒鼻咽癌细胞微小RNA差异表达的研究[J]. 王旭丹,杨惠玲,郭禹标,梁志慧,赵睿颖,夏云飞,苏勇,Mong-Hong Lee,王瑾,郑芹.  中国病理生理杂志. 2007(06)



本文编号：3513306