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第三代LMP1 CAR-T细胞的制备及对鼻咽癌细胞杀伤作用研究

发布时间:2021-12-19 01:57
  鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是耳鼻咽喉头颈外科最常见的恶性肿瘤,常因病灶复发和头颈部淋巴结转移而影响患者生存质量。目前放疗为鼻咽癌治疗的首选,但是由于鼻咽癌早期症状并不典型,患者往往错过治疗的最佳阶段,彻底清除鼻咽癌细胞存在较大困难。以T细胞过继治疗为基础发展而来的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞治疗技术因其特有的靶向性,特异性杀伤肿瘤细胞成为肿瘤免疫治疗的“新贵”。目前,以CD19为标靶的代表性CAR-T细胞治疗血液系统恶性肿瘤(特别是B细胞前体急性淋巴细胞白血病)取得明显的疗效,并被美国FDA批准上市。虽有CD19 CAR-T细胞顺利治愈复发性脑胶质瘤的个案,然而大部分实体瘤缺少特异性靶标和体内免疫逃逸机制,始终是CAR-T细胞应用于实体瘤必须攻克的两大难点。研究表明,鼻咽癌可由EB病毒感染所致。EB病毒介导鼻咽上皮细胞非极化,通过对EMT通路的调控诱导鼻咽部上皮细胞的转化,干扰正常鼻粘膜细胞的生理功能,促进鼻咽癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并且抑制其凋亡。EB病毒潜伏膜蛋白1(latent memb... 

【文章来源】:南京医科大学江苏省

【文章页数】:69 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

第三代LMP1 CAR-T细胞的制备及对鼻咽癌细胞杀伤作用研究


LMP1CAR慢病毒表达载体的构建

慢病毒,表达载体,细胞,转染


1 CAR 慢病毒表达载体在 X-293T 细胞中的表达。泳道;泳道 2:CD19 CAR 转染的 X-293T 细胞;泳道 3:LT 细胞。e expression of LMP1 CAR lentiviral expression vector in cted X-293T cells; 2: X-293T cells transfected by CD19 CActed by LMP1 CAR.

曲线,细胞表面抗原,T细胞,鼻咽癌细胞


图 1:T 细胞与 LMP1 CAR-T 细胞表面抗原的检测胞术检测鼻咽癌细胞表面抗原 LMP1 的表达数期生长的鼻咽癌细胞 CNE1、CNE2、HONE1、C666-1 人 LMP1 抗体,二抗选择 FITC 标记鼠源抗羊的荧光抗体照,流式细胞术检测鼻咽癌细胞表面抗原 LMP1 的表达检测鼻咽癌的结果如图红色曲线,同型对照抗体检测结果果表明,鼻咽癌细胞 CNE1 中 LMP1 的表达与同型对照LMP1 高表达;鼻咽癌细胞 CNE2 与 C666-1 中 LMP1 的表分,为 LMP1 低表达;而鼻咽癌细胞 HONE1 与 SUNE1 对照抗体并不能区分,为 LMP1 低表达甚至不表达(图 2)择 LMP1 高表达的鼻咽癌细胞株 CNE1,LMP1 低表达的及 LMP1 不表达的鼻咽癌细胞株 HONE1 用于后续的研究

【参考文献】:
期刊论文
[1]宫颈癌细胞高迁移率族警报素的分泌与肿瘤浸润淋巴细胞的相关性[J]. 李晶,魏枫,杨帆,郑禹,赵华,任秀宝.  中国肿瘤生物治疗杂志. 2017(03)
[2]T cells expressing a LMP1-specific chimeric antigen receptor mediate antitumor effects against LMP1-positive nasopharyngeal carcinoma cells in vitro and in vivo[J]. Xiaojun Tang,Yan Zhou,Wenjie Li,Qi Tang,Renjie Chen,Jin Zhu,Zhenqing Feng.  The Journal of Biomedical Research. 2014(06)



本文编号:3543560

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