早期暂时性听力剥夺损伤大鼠的空间记忆

发布时间：2022-12-18 04:12

　　背景:出生后一年内大约有62%的婴幼儿都会有中耳感染的经历,婴幼儿中由于中耳感染导致的听力剥夺非常普遍,已有研究表明,听力损失会改变中枢听觉功能的发育,但是它对高级脑功能的影响还基本未知。这些有中耳感染史的儿童在课堂表现中表现出行为和注意的缺陷,学业成绩比较差。然而,中耳炎对儿童发展的影响取决于几个因素,如性别、出生状况、遗传倾向和社会经济地位等之间的相互关系。因此,单纯由中耳感染引起的听力剥夺需要一个单一变量的模型。由听力损失导致的感觉剥夺会引起神经元的退化和认知功能减弱。而海马是情景记忆和空间记忆所必需的脑结构,学习记忆是由神经可塑性调节的,包括长时程增强,突触生成,内在兴奋性的调节以及成年的神经再生。因此,我们在建立暂时听力剥夺的模型的基础上,研究其对海马空间记忆的影响,并探讨其中的机制。方法:实验中通过在大鼠出生后14天进行鼓膜穿孔形成早期听力剥夺以建立暂时性听力剥夺组（THD）大鼠模型,对照组不进行鼓膜穿孔。然后对大鼠进行听觉脑干反应（ABR）检测以检测THD组大鼠听力损失情况。接着对其进行行为学检测,以检测THD组大鼠早期听力剥夺对学习记忆的损伤情况。通过一系列实验包括在体... 

【文章页数】：109 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 听觉系统
        1.1.1 声音与听觉
        1.1.2 听觉发育的关键期
            1.1.2.1 关键期的界定
            1.1.2.2 关键期的调控
            1.1.2.3 关键期听觉传入的影响
            1.1.2.4 关键期的兴奋与抑制平衡
        1.1.3 听皮层与学习记忆
            1.1.3.1 听皮层在信息处理加工中的作用
            1.1.3.2 听皮层可塑性与学习记忆
    1.2 听力损伤
        1.2.1 外周损伤对听觉系统形态结构的影响
            1.2.1.1 外周损伤对耳蜗的影响
                1.2.1.1.1 急性声暴露对耳蜗的影响
                1.2.1.1.2 老年性耳聋对耳蜗的影响
            1.2.1.2 外周损伤对螺旋神经节的影响
        1.2.2 听觉损伤对听觉系统神经元信号通路的影响
            1.2.2.1 听觉损伤对细胞信号的影响
            1.2.2.2 听觉损伤对神经化学信号的影响
        1.2.3 听觉损伤对听觉系统神经元电活动的影响
            1.2.3.1 对听神经电活动的影响
            1.2.3.2 对耳蜗核电活动的影响
            1.2.3.3 对下丘电活动的影响
            1.2.3.4 对内侧膝状体电活动的影响
            1.2.3.5 对听觉皮层电活动的影响
        1.2.4 听觉损伤对非听觉系统的影响
            1.2.4.1 视觉序列学习
            1.2.4.2 运动技能
            1.2.4.3 视觉注意
    1.3 海马
        1.3.1 海马的解剖结构
        1.3.2 海马的信号环路
        1.3.3 海马与学习记忆
            1.3.3.1 联合编码
            1.3.3.2 模式分离
            1.3.3.3 模式完成
            1.3.3.4 情景记忆
            1.3.3.5 空间定位
        1.3.4 海马学习记忆与突触可塑性
    1.4 NMDA受体
        1.4.1 NMDA与非NMDA离子型谷氨酸受体
        1.4.2 NMDA受体的亚基组成和分布
        1.4.3 NMDA受体和海马突触可塑性
    1.5 本研究要回答的问题
第二章 实验材料和方法
    2.1 听觉发育关键期的听力剥夺
    2.2 听觉脑干反应检测
    2.3 学习记忆的相关行为学检测
        2.3.1 旷场实验
        2.3.2 Y迷宫检测
        2.3.3 Morris水迷宫
    2.4 在体的电生理记录
        2.4.1 输入/输出(I/O)功能
        2.4.2 双脉冲反应(PPR)
        2.4.3 长时程增强(LTP)
    2.5 脑片记录
        2.5.1 脑片及溶液准备
        2.5.2 NMDA和AMPA受体介导的eEPSCs记录
        2.5.3 NMDA受体介导的mEPSCs记录
    2.6 免疫蛋白印迹
        2.6.1 蛋白样品的制备
        2.6.2 免疫印迹实验过程
    2.7 BrdU的给药和免疫组化计数
        2.7.1 BrdU的给药
        2.7.2 BrdU的免疫组化
        2.7.3 BrdU的计数
    2.8 Golgi-Cox染色
        2.8.1 切片处理
        2.8.2 染色步骤
    2.9 透射电子显微镜
    2.10 逆行示踪注射
    2.11 数据分析
第三章 结果
    3.1 早期鼓膜穿孔手术引起暂时性听力剥夺
    3.2 早期暂时性听力剥夺损伤学习记忆
        3.2.1 早期暂时性听力剥夺不影响旷场实验的行为表现
        3.2.2 早期暂时性听力剥夺损伤Y迷宫实验的行为表现
        3.2.3 早期暂时性听力剥夺损伤Morris水迷宫的行为表现
    3.3 早期暂时性听力剥夺损伤海马功能突触可塑性
        3.3.1 早期暂时性听力剥夺压抑输入/输出(I/O)曲线
        3.3.2 早期暂时性听力剥夺不影响双脉冲比率(PPR)
        3.3.3 早期暂时性听力剥夺损伤长时程增强(LTP)
    3.4 早期暂时性听力剥夺引起NMDA受体介导的mEPSC幅度下降
    3.5 早期暂时性听力剥夺不影响细胞膜特性
    3.6 早期暂时性听力剥夺引起NMDA受体诱发的兴奋性突触后电流下降,但对AMPA受体的无影响
    3.7 早期暂时性听力剥夺导致表达的NR2A/NR2B的比值增加
    3.8 早期暂时性听力剥夺引起海马CA1区锥体神经元的树突棘数目减少
    3.9 早期暂时性听力剥夺引起海马CA1区锥体神经元的突触后致密斑密度减少
    3.10 早期暂时性听力剥夺引起BrdU染色新生细胞数目减少
    3.11 听皮层到海马有直接联系
第四章 讨论
    4.1 实验结论
    4.2 实验结果分析
        4.2.1 听力损失模型的建立
        4.2.2 听觉与海马之间的联系
        4.2.3 行为学实验与NMDA受体与LTP联系
        4.2.4 NR2A和NR2B与LIP联系
        4.2.5 神经发生与LIP联系
    4.3 本研究的创新、不足之处及展望
参考文献
附录1 缩略词表
附录2 仪器设备
附录3 主要原始数据文件名称
附录4 海马脑片制作步骤
附录5 实验中主要溶液的配制步骤
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果
个人简历



本文编号：3721314