pEGFP/Ang-1转染大鼠BMSCs视网膜下移植对糖尿病大鼠视网膜血管渗漏的影响

发布时间：2024-07-05 00:19

　　目的 利用毕氏酵母血管生成素1重组质粒(pEGFP/Ang-1)转染大鼠BMSCs,将转染后的BMSCs行视网膜下移植,从而确认血管紧张素1(Ang-1)转染BMSCs对糖尿病大鼠视网膜的保护作用。 方法 选取雄性SD大鼠4⁶只,无菌条件下取出股骨和胫骨,剪去骨骺端,用培养基反复冲洗骨髓腔分离BMSCs,并结合反复贴壁法使其进一步纯化鉴定。利用毕氏酵母血管生成素1重组质粒(pEGFP/Ang-1)转染大鼠BMSCs,将转染后的Ang-1/BMSC视网膜下移植。另选SD大鼠96只,随机分为正常大鼠组(CON)、空白对照糖尿病组(DM1)、糖尿病大鼠+视网膜下移植BMSCs组(DM2)、糖尿病大鼠+视网膜下移植Ang-1/BMSCs组(ANG)。尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病模型,成模后DM2组视网膜下移植BMSCs,ANG组视网膜下移植Ang-1/BMSCs,分别4w、8w、12w处死动物。用伊凡思蓝方法检测视网膜的渗透量;用免疫组化观察移植细胞在视网膜中的分布融合情况,Western blot方法检测各组大鼠视网膜Ang-1的表达情况。 结果 DM1、D...

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图13两组细胞的Ang-1蛋白Westernb注：1、转染组2、未转染

1512图13两组细胞的Ang-1蛋白Westernblot表达注：1、转染组2、未转染二、大鼠一般情况、血糖和体重变化随着时间的延长，糖尿病大鼠皮毛稀疏发黄，伴有不同程度的精神萎靡，饮水量和尿量明显增加，但体重增长缓慢，甚至消瘦。视网膜移植Ang-1/BMSCs、BMS....

图14各组大鼠体重比较

二、大鼠一般情况、血糖和体重变化随着时间的延长，糖尿病大鼠皮毛稀疏发黄，伴有不同程度的精神萎靡，饮水量和尿量明显增加，但体重增长缓慢，甚至消瘦。视网膜移植Ang-1/BMSCs、BMSCs后体重无明显改善（表4，图14），血糖无变化（表5，图15）。表4各组大鼠体重....

图15各组大鼠血糖比较

表5各组大鼠血糖的变化（x±s，mmol/L,n=8）组别4周组8周组12周组CON3.71±0.53.7±0.283.76±0.63DM123.7±3.77*24.80±5.19*25.7±2.36*DM223.3±5.19*△24.9±4....

图16EB在甲酰胺溶液中的标准曲线

图16EB在甲酰胺溶液中的标准曲线与CON组相比DM1、DM2大鼠视网膜渗透量明显增加，差异有统计学义（P<0.01）。随着糖尿病时间的延长DM1、DM2组EB渗透量明显增加，48周、12周分别增加了1.7倍、1.9倍、2.2倍。而ANG较DM1组和DM2EB渗透降低了17.....

本文编号：4000749