KiSS1基因激活ERK1/2磷酸化通路抑制鼻咽癌转移的研究
发布时间:2023-06-04 04:16
目的:明确KiSS1及其受体基因(hOT7T175或GPR54)调节鼻咽癌细胞转移的分子机制。方法:(1)培养高转移活性的鼻咽癌细胞系SUNE-1-5-8F以及低转移鼻咽癌细胞系SUNE-1-6-10B,并通过实时聚合酶链式反应(RT-PCR)以及蛋白免疫印迹(Western Blot,WB)实验,检测KiSS1基因及其受体基因分别在两类细胞系中的表达,明确KiSS1基因及其受体KiSS1-R基因与鼻咽癌转移能力的关系;(2)通过蛋白免疫印迹法,检测经典细胞转移调控相关的黏着斑激酶FAK及ERK1/2信号通路的磷酸化激活,以及EZR蛋白的表达与鼻咽癌细胞转移能力的关系;(3)过表达KiSS1基因及KISSS1-R基因,并通过划痕实验及Transwell实验分析过表达KiSS1基因(SUNE-KISS1),过表达KiSS1-R(SUNE-1R)以及同时过表达KiSS1和KiSS1-R基因(SUNE-1R-KISS1)的SUNE-1-5-8F鼻咽癌细胞系的迁移能力;(4)通过Western blot检验过表达KiSS1基因及KiSS1-R基因后,p-FAK,p-ERK以及EZR蛋白的表达水...
【文章页数】:50 页
【学位级别】:硕士
【文章目录】:
中文摘要
Abstract
前言
材料与方法
1 实验材料
2 主要试剂
3 主要仪器
4 实验方法
实验结果
1.KiSS1基因表达水平与鼻咽癌细胞转移能力负相关
2.过表达KiSS1及KiSS1-R基因抑制SUNE-1-5-8F细胞转移能力
3.过表达KiSS1及其受体基因抑制SUNE-1-5-8F细胞侵袭能力
4.过表达KiSS1基因激活FAK磷酸化,抑制EZR表达
5.过表达KiSS1及其受体基因激活ERK1/2通路磷酸化
6.抑制ERK1/2通路激活逆转KiSS1基因过表达引起的转移抑制
7.抑制ERK1/2通路逆转KiSS1基因过表达引起的p-ERK1/2及p-FAK表达改变
8.KiSS1基因干扰降低ERK1/2通路磷酸化增加SUNE-1-5-8F细胞迁移能力
讨论
结论
参考文献
致谢
附录
附录A 英文词汇对照表
附录B 综述
参考文献
本文编号:3830671
【文章页数】:50 页
【学位级别】:硕士
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中文摘要
Abstract
前言
材料与方法
1 实验材料
2 主要试剂
3 主要仪器
4 实验方法
实验结果
1.KiSS1基因表达水平与鼻咽癌细胞转移能力负相关
2.过表达KiSS1及KiSS1-R基因抑制SUNE-1-5-8F细胞转移能力
3.过表达KiSS1及其受体基因抑制SUNE-1-5-8F细胞侵袭能力
4.过表达KiSS1基因激活FAK磷酸化,抑制EZR表达
5.过表达KiSS1及其受体基因激活ERK1/2通路磷酸化
6.抑制ERK1/2通路激活逆转KiSS1基因过表达引起的转移抑制
7.抑制ERK1/2通路逆转KiSS1基因过表达引起的p-ERK1/2及p-FAK表达改变
8.KiSS1基因干扰降低ERK1/2通路磷酸化增加SUNE-1-5-8F细胞迁移能力
讨论
结论
参考文献
致谢
附录
附录A 英文词汇对照表
附录B 综述
参考文献
本文编号:3830671
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