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胚胎干细胞诱导分化为视网膜祖细胞的体外研究

发布时间:2024-10-03 01:45
   目的探讨小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cell,m ESC)诱导为视网膜祖细(retinal progenitor cells,RPC)的体外培养方法,为致盲性视网膜变性疾病的治疗提供种子细胞。方法用细胞免疫荧光染色法和流式细胞术对m ESC进行m ESC标记物阶段特异性胚胎抗原1、细胞增殖核抗原Ki67、细胞周期和碱性磷酸酶进行鉴定后,在无血清条件下悬浮培养形成拟胚体(embryoid bodies,EB)并添加抑制因子1、左右决定因子A和γ-促分泌酶抑制剂等诱导分化为RPC,并对其分化的细胞进行标记物兔来源配对盒基因6(paired box6,Pax6)、兔来源性别决定区Y框蛋白(Sox2)和鼠来源转录因子同源异型框蛋白(orthodentical homeobox 2,Otx2)的检测以及增殖能力和细胞周期的检测。结果 m ESC标记物碱性磷酸酶阳性表达,特异性胚胎抗原1阳性率为(80.66±0.64)%,Ki67和细胞周期检测显示有较高增殖能力。定向诱导分化后,RPC标记物Pax6、Sox2和Otx2阳性率分别为(50.87±2.97)%、(49.1...

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1材料与方法
2结果
3讨论



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