大鼠视神经挫伤后视网膜炎性因子的表达及意义

发布时间：2017-06-08 14:06

  本文关键词：大鼠视神经挫伤后视网膜炎性因子的表达及意义，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]观察视神经挫伤后不同时间点视网膜神经节细胞(RGCs)凋亡率及视网膜上促炎因子、抑炎因子(IL-1β、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α、TGF-β)mRNA表达,探讨RGCs凋亡与炎性因子两者之间可能的关系,为临治疗外伤性视神经损伤提供一定的实验依据。[方法]采用50g力度夹持钳夹持的方法建立大鼠视神经挫伤模型；成年SPF级雌性SD大鼠140只随机分假手术组(n=70)和手术组(n=70)。手术组做视神经挫伤模型,假手术组仅分离视神经,不进行夹持。手术组与假手术组再分别按损伤后时间点分为7个亚组,每亚组10只大鼠,分别为6h组、12h组、24h组、3d组、5d组、7d组、14d组。两组在相应时间点取材(n=10),行HE染色及TUNEL凋亡实验(n=5),检测视网膜RGCs在相应时间点的形态变化和凋亡情况,并对两组RGCs凋亡率进行比较；行Real-time PCR实验(n=5),比较两组促炎因子(IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α)以及抑炎因子(IL-4、IL-10、IL-13、TGF-β)在相应时间的mRNA表达情况；就RGCs凋亡率和炎症因子的表达的意义进行探讨；并对各因子与损伤时间点进行Pearson相关性分析。[结果]HE染色显示：手术组损伤后12h及24小时即可见RGCs细胞层出现空泡肿胀,RGCs核固缩,视神经纤维稀疏扭曲,胶质细胞排列紊乱；伤后3d和5d时RGCs排列稀疏,核固缩明显,视神经纤维水肿和空泡变性,胶质细胞部分坏死；伤后7-14d可见RGCs数量明显减少,视神经纤维水肿减轻,空泡变性减少,神经纤维走向紊乱,胶质细胞瘢痕样增生。假手术组视网膜及视神经病理结构与无明显变化。TUNEL凋亡实验显示：3天时手术组与假手术组凋亡率分别为12.6%、7.5%,组间比较P0.05：5天时手术组与假手术组凋亡率分别为14.9%、7.5%,组间比较P0.05：7d-14d与假手术组比较均有统计学差异。Real-time PCR方法显示：视神经挫伤后早期,促炎因子(IL-1β、TNF-α、IL-6、L-8)表达量升高,与假手术组比较,差异有统计学意义,其升高趋势多在3d前,早于RGCs凋亡率；IL-1p在挫伤后6h-3d内表达量与时间成正相关(r=0.643)：TNF-α伤后早期高表达,伤后5d恢复至正常水平；IL-6伤后5d前均高表达,与假手术组比较,差异有统计学意义,5d后逐渐下降,5d-14d的表达量与时间成负相关(r=-0.58)；IL-8的表达与与假手术组比较,差异无统计学意义；抑炎因子IL-4和IL-10表达量变化趋势两组相同,无统计学差异；IL-13伤后3d前表达量升高,3d时明显下降,后期与假手术组无差异；TGF-β在3d时下降,3d以后表达逐渐升高,但是与假手术组无统计学差异。[结论]大鼠视神经挫伤后早期可导致视网膜视神经节细胞凋亡；视网膜视神经节细胞凋亡可能与伤后促炎因子高表达有关。
【关键词】：外伤性视神经损伤 视网膜神经节细胞 细胞凋亡 促炎因子 抑炎因子
【学位授予单位】：昆明医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R774.6
【目录】：

• 本文主要英汉缩略语对照表5-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-11
• 引言11-16
• 材料与方法16-27
• 结果27-40
• 讨论40-50
• 结论50
• 问题与展望50-51
• 参考文献51-58
• 综述58-65
• 参考文献62-65
• 攻读硕士学位期间文章发表情况65-66
• 致谢66

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