大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷抑制黑色素瘤转移的机制研究
发布时间：2022-01-05 20:21
目的:研究大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷（中草药羊蹄的主要成分）对皮肤黑色素瘤转移的作用及其机制。方法:将人皮肤黑色素瘤A375细胞用不同浓度的大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷处理后,A375细胞的细胞活性通过CCK-8法进行检测;以划痕法检测A375细胞的迁移能力;以transwell法检测A375细胞的侵袭能力;RT-PCR及western-blot分别检测COX-2的m RNA转录及蛋白表达;ELISA法测定c-jun的活性;western-blot测定c-jun的磷酸化;分别以COX-2 si RNA和过表达质粒对COX-2进行沉默和过表达,以c-jun抑制剂SP60012和过表达质粒对c-jun进行抑制和过表达,检测COX-2和c-jun在黑色素瘤迁移和侵袭中的作用。结果:大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷有效降低了A375细胞的活性,并对A375细胞的迁移和侵袭均有抑制作用;大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷能够通过抑制m RNA转录水平以及COX-2的蛋白表达,从而抑制A375细胞的迁移侵袭;COX-2的过表达能够明显促进A375细胞的侵袭和迁移;而沉默COX-2能...
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷（PG）的化学结构示意图
青岛大学硕士学位论文14结果1PG对A375细胞活性的影响为了检测不同浓度PG对A375细胞在不同时间段活性的影响，将A375细胞分别给予不同浓度的PG（0、10、20、50μg/mL）进行预处理，再将A375细胞在培养箱中孵育24h、48h、72h后，加入CCK-8溶液进行检测，观察PG在不同时间段对A375细胞的活性的影响，我们发现：根据图1结果显示，PG在10μM剂量预处理细胞时，只有细胞培养时间达到72h后，与对照组相比，细胞活性才出现明显下降；而20μM剂量的PG预处理细胞，在48h和72h后检测，均发现细胞活性显著下降；50μM剂量的PG预处理后，三个时间点都显示PG能够明显抑制A375细胞的活性（p<0.05）。结果显示：PG对A375细胞具有显著的活性抑制作用，具有抗黑色素瘤的潜在实验价值；其次，我们在后续转移和侵袭的实验中，可以在细胞培养48h时，选择10μM、20μM剂量用于后续的实验。图1PG对A375细胞活性的影响（与对照组比较，*p<0.05）
青岛大学硕士学位论文163PG对A375细胞侵袭能力的影响以transwell实验测定肿瘤细胞的侵袭能力。PG以10μM和20μM剂量的预处理A375细胞，培养48h。根据图3结果显示：黑色素瘤细胞A375在48h培养后，经过PG预处理的组别与正常对照组比较，A375细胞侵袭能力被显著抑制（P<0.05），且随着PG浓度的增加，PG对A375细胞侵袭抑制程度不断增强（P<0.01）。根据上述结果说明：PG能够显著抑制A375细胞侵袭的作用，且随浓度增加不断增强，具有浓度依赖性。图3PG对黑色素瘤A375细胞侵袭能力的影响（与对照组比较，*p<0.05，**p<0.01）4PG对A375细胞中COX-2mRNA及蛋白表达的影响前期，通过PG对黑色素瘤细胞A375活性、迁移能力、侵袭能力的影响的实验结果表明，PG能够有效抑制A375细胞侵袭、迁移能力。随后，通过对PG抑制A375细胞的分子机制进行了研究。根据我们先前的研究表明：PG能够通过下调COX-2
【参考文献】：
期刊论文
[1]芦荟大黄素调控Notch-1/Akt/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响[J]. 刘豪杰,陈文礼,陈雪蕾. 中医学报. 2020(04)
[2]新型植物源杀菌剂——大黄素甲醚[J]. 农村新技术. 2020(03)
[3]中药羊蹄乙酸乙酯部位化学成分研究[J]. 赵跃丽,董洪强,张兰胜. 大理大学学报. 2020(02)
[4]大黄素甲醚氨基酸衍生物的合成及其杀菌活性[J]. 孟振国,朱祥,赵炽娜,常悦,吴清来,李俊凯. 林产化学与工业. 2020(01)
[5]羊蹄甲果荚总黄酮提取工艺优化及抗氧化性研究[J]. 张鹏,张蝶,唐森,谢济运. 当代化工. 2019(12)
[6]大黄酚通过调控星形胶质细胞相关蛋白表达保护小鼠脑缺血再灌注损伤[J]. 李江曼,王一頔,吴苗苗,刘彤,高佳璐,李炜. 中国临床药理学杂志. 2019(21)
[7]大黄化学成分及抗氧化、酶抑制特性研究进展[J]. 张莉,潘婧,吴欢. 海南医学. 2019(20)
[8]大黄素甲醚通过调控miR-21表达抑制乳腺癌细胞生存、促进其凋亡[J]. 白洁,英子伟,赵林,李伟杰,王聪,谢贤鑫,姜大庆. 实用药物与临床. 2019(02)
[9]基于体外肝代谢考察大黄素甲醚肝毒性作用[J]. 汪祺,王亚丹,杨建波,刘越,文海若,马双成. 中国中药杂志. 2019(11)
[10]大黄素甲醚对皮质酮损伤PC12细胞保护作用研究[J]. 谭谦,曾肆,童妍. 中国中医药信息杂志. 2018(10)
博士论文
[1]大黄素甲醚-8-O-β-葡萄糖苷（PG）诱导宫颈癌细胞凋亡机制的研究[D]. 贺媛琪.山东大学 2017
硕士论文
[1]大黄素甲醚调节实验性Ⅰ型糖尿病小鼠血糖和胰岛素水平及机制探讨[D]. 季娟.青岛大学 2017
本文编号：3571012
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷（PG）的化学结构示意图
青岛大学硕士学位论文14结果1PG对A375细胞活性的影响为了检测不同浓度PG对A375细胞在不同时间段活性的影响，将A375细胞分别给予不同浓度的PG（0、10、20、50μg/mL）进行预处理，再将A375细胞在培养箱中孵育24h、48h、72h后，加入CCK-8溶液进行检测，观察PG在不同时间段对A375细胞的活性的影响，我们发现：根据图1结果显示，PG在10μM剂量预处理细胞时，只有细胞培养时间达到72h后，与对照组相比，细胞活性才出现明显下降；而20μM剂量的PG预处理细胞，在48h和72h后检测，均发现细胞活性显著下降；50μM剂量的PG预处理后，三个时间点都显示PG能够明显抑制A375细胞的活性（p<0.05）。结果显示：PG对A375细胞具有显著的活性抑制作用，具有抗黑色素瘤的潜在实验价值；其次，我们在后续转移和侵袭的实验中，可以在细胞培养48h时，选择10μM、20μM剂量用于后续的实验。图1PG对A375细胞活性的影响（与对照组比较，*p<0.05）
青岛大学硕士学位论文163PG对A375细胞侵袭能力的影响以transwell实验测定肿瘤细胞的侵袭能力。PG以10μM和20μM剂量的预处理A375细胞，培养48h。根据图3结果显示：黑色素瘤细胞A375在48h培养后，经过PG预处理的组别与正常对照组比较，A375细胞侵袭能力被显著抑制（P<0.05），且随着PG浓度的增加，PG对A375细胞侵袭抑制程度不断增强（P<0.01）。根据上述结果说明：PG能够显著抑制A375细胞侵袭的作用，且随浓度增加不断增强，具有浓度依赖性。图3PG对黑色素瘤A375细胞侵袭能力的影响（与对照组比较，*p<0.05，**p<0.01）4PG对A375细胞中COX-2mRNA及蛋白表达的影响前期，通过PG对黑色素瘤细胞A375活性、迁移能力、侵袭能力的影响的实验结果表明，PG能够有效抑制A375细胞侵袭、迁移能力。随后，通过对PG抑制A375细胞的分子机制进行了研究。根据我们先前的研究表明：PG能够通过下调COX-2
【参考文献】：
期刊论文
[1]芦荟大黄素调控Notch-1/Akt/NF-κB信号通路对胃癌SGC-7901细胞生物学行为的影响[J]. 刘豪杰,陈文礼,陈雪蕾. 中医学报. 2020(04)
[2]新型植物源杀菌剂——大黄素甲醚[J]. 农村新技术. 2020(03)
[3]中药羊蹄乙酸乙酯部位化学成分研究[J]. 赵跃丽,董洪强,张兰胜. 大理大学学报. 2020(02)
[4]大黄素甲醚氨基酸衍生物的合成及其杀菌活性[J]. 孟振国,朱祥,赵炽娜,常悦,吴清来,李俊凯. 林产化学与工业. 2020(01)
[5]羊蹄甲果荚总黄酮提取工艺优化及抗氧化性研究[J]. 张鹏,张蝶,唐森,谢济运. 当代化工. 2019(12)
[6]大黄酚通过调控星形胶质细胞相关蛋白表达保护小鼠脑缺血再灌注损伤[J]. 李江曼,王一頔,吴苗苗,刘彤,高佳璐,李炜. 中国临床药理学杂志. 2019(21)
[7]大黄化学成分及抗氧化、酶抑制特性研究进展[J]. 张莉,潘婧,吴欢. 海南医学. 2019(20)
[8]大黄素甲醚通过调控miR-21表达抑制乳腺癌细胞生存、促进其凋亡[J]. 白洁,英子伟,赵林,李伟杰,王聪,谢贤鑫,姜大庆. 实用药物与临床. 2019(02)
[9]基于体外肝代谢考察大黄素甲醚肝毒性作用[J]. 汪祺,王亚丹,杨建波,刘越,文海若,马双成. 中国中药杂志. 2019(11)
[10]大黄素甲醚对皮质酮损伤PC12细胞保护作用研究[J]. 谭谦,曾肆,童妍. 中国中医药信息杂志. 2018(10)
博士论文
[1]大黄素甲醚-8-O-β-葡萄糖苷（PG）诱导宫颈癌细胞凋亡机制的研究[D]. 贺媛琪.山东大学 2017
硕士论文
[1]大黄素甲醚调节实验性Ⅰ型糖尿病小鼠血糖和胰岛素水平及机制探讨[D]. 季娟.青岛大学 2017
本文编号：3571012
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yiyaoxuelunwen/3571012.html
最近更新
教材专著
