TRAIL蛋白修饰载有卡巴他赛的聚合物胶束的制备与表征

发布时间：2020-11-15 21:45

　　 在癌症治疗中采用两种或两种以上药物的联合给药方式已广泛受到人们关注。卡巴他赛(Cabazitaxel、CTX)是一种紫杉烷类药物,能够加强微管蛋白聚合从而抑制细胞有丝分裂和间期细胞功能,但由于其商业剂型递药辅料的毒副作用及本身水溶性差而影响了其疗效与安全性,使用胶束递药可以提高药物水溶性及靶向性。然而,对于不同癌症细胞胶束的EPR效应有差异,并且CTX并非对所有癌细胞都有作用,为改善载有CTX胶束的靶向作用并且增强其对癌细胞的抑制作用,本课题合成制备了 TRAIL蛋白偶联修饰载有CTX的聚合物胶束(TRAIL-M-CTX),取得主要结果如下:1)以开环聚合法制备可生物降级的嵌段聚合物分子单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸(mPEG-PLA),经核磁氢谱检测聚合物分子量为mPEG2000-PLA1889,然后通过芘荧光探针法检测聚合物形成胶束的临界胶束浓度(CMC)为0.069mg/ml,说明制备的mPEG2000-PLA1889能够在较低浓度下形成热力学稳定的胶束。2)制备了 TRAIL偶联修饰的载有CTX聚合物胶束(TRAIL-M-CTX)。该纳米颗粒首先由两亲性共聚物mPEG-PLA、COOH-PEG-PLA(购买所得)和CTX通过纳米沉淀法自组装形成未偶联的胶束,然后用TRAIL蛋白偶联修饰胶束表面,制备得到的TRAIL-M-CTX粒径为39.75nm,药物包封率为94.07%。通过核磁共振氢谱,傅里叶变换红外光谱和动态激光散射证实了蛋白与胶束之间偶联成功。3)选用不同TRAIL敏感性的两种人癌细胞系(NCI-H460、MCF-7),体外活性分析显示与TRAIL蛋白和CTX相比,TRAIL-M-CTX具有更高的抗癌活性,并显示出TRAIL-M-CTX胶束的TRAIL和CTX组分对MCF-7细胞的协同增效作用。细胞摄药研究表明,TRAIL蛋白质偶联修饰的胶束比未偶联修饰的胶束能更有效地内化到MCF-7细胞中。MCF-7细胞的细胞周期测定表明,TRAIL-M-CTX引起sub-Gl细胞群的显着增加,从而促进癌细胞的凋亡。
【学位单位】：华东理工大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R943
【部分图文】：

作为药物的一种生物活性化合物递送工具。其中脂质体，固体脂质纳米颗粒，树状聚合??物，硅或碳材料和磁性纳米颗粒等已经在ＮＤＤＳ中有作为纳米载体的实例用于治疗各种??疾病，这些递药系统与常规一些物质大小比较如图１．２所示［１３］。ＮＤＤＳ可通过对肿瘤组??

?第３页??织的增强的透过与滞留（ｅｎｈａｎｃｅｄ?ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ?ａｎｄ?ｒｅｔｅｎｔｉｏｎ，ＥＰＲ）效应来实现组织耙向??性将药物定向传递到肿瘤细胞组织及细胞（图１．３）?［１４］，造成ＮＤＤＳ具有这种效应的主??要原因是由于正常组织与癌细胞组织结构不同：在正常组织中由于微血管结构完整，分??子量大的颗粒不易透过血管壁，而在肿瘤组织中，由于微血管结构中促进血管生成的信??号过强，抑制血管生成的信号缺失。血管生长过快，同时血管内缺乏平滑肌细胞，内皮??细胞间没有紧密连接并且缺乏周细胞使得血管丰富、具有较宽的血管壁间隙、结构不完??整，致使内皮细胞之间存在着巨大的孔隙［１５］，大分子的纳米颗粒可通过孔隙进入血管，??而淋巴管缺失，使得淋巴液回流受阻，所以在肿瘤组织中大分子纳米颗粒不会被淋巴液??回流带走，使得大分子纳米粒子滞留于肿瘤组织中［１６］。??｜?Ｍａｃｒｏｓｃａｌｅ?｜??江，＿?．西：顧：：??Ｉ?｜?心她?｜?ＩＪＮＡｄ．？ｍｃｔｔ２．５ｎｍ?｜?｜?＇?Ｈ：ｖｄ＾ｎ『》ｕ？？．?｜??Ｉ?ｌＯＯＯＯＯＯＯｎｍ?ｄｕｍｗｉｒ?■?ｌ〇〇〇ｎｍ?｜?＼?｜?０１?ｍｎ???Ｌ?Ｉ?ＴＴＴ?‘?ＩＷＯＯｒｎｎ?Ｉ?Ｖ?｜?］?｜?｜??Ｌ＿ｌｒＺＺＺ＾－?ｉ－圓?＾?ｊｉ?｜??１?ｊ???Ｉｆｔ１?１０Ｊ?Ｈ）１?ＵＴ＊?１〇？?１０６?＿〇■

将这些受体为靶点，在聚合物胶束表面修饰这些受体的配体与之特异性结合??即可通过主动靶向作用将化疗药物按预期递送至肿瘤部位或肿瘤细胞［３７］，受体介导的靶??向机制如图１．５所示｜１２１。有相关文献报道：在胶束表面上连接转铁蛋白，以此作为紫杉??醇（ＰＴＸ）的递药系统载体，制成主动靶向性胶束，和没有连接转铁蛋白的胶束相比，??对于Ｓ－１８０实体瘤肿瘤部位ＰＴＸ累积量明显提升，而无论是在体外还是体内，细胞内??ＰＴＸ抑瘤效果都明显增加［３８］。??
【参考文献】

相关期刊论文 前2条

1 武曲;霍美蓉;周建平;;新型药物递送系统研究新进展[J];中国药科大学学报;2013年02期

2 李晓然;袁晓燕;;聚乙二醇-聚乳酸共聚物药物载体[J];化学进展;2007年06期

本文编号：2885243