靶向线粒体吩噻嗪类化合物的合成及抗肿瘤活性研究

发布时间：2022-01-13 03:01

　　目的:合成两种具有线粒体靶向的吩噻嗪衍生物,从而探讨两个化合物对肿瘤增殖、迁移、侵袭、自噬和凋亡的影响,并进一步探索其对肿瘤的作用机制。方法:采用离域的阳离子基团与吩噻嗪结构相连合成有正电性的吩噻嗪衍生物经分离纯化后选用肿瘤细胞AGS、H520、Lovo、Hela、Hu-7、U87等为研究对象,用MTT实验对两种化合物抗肿瘤活性进行筛选后并进一步考察该化合物的最适给药时间和进行后续实验的给药浓度。接下来用MTT、平板克隆形成实验、transwell迁移实验、transwell侵袭实验、自噬和凋亡实验考察药物对肿瘤细胞的克隆形成、迁移、侵袭、自噬和凋亡的影响并用线粒体探针验证化合物是否能靶向肿瘤细胞线粒体。然后用分子对接实验、Western blotting实验探索该化合物抗肿瘤的分子机制。最后用siRNA和dsRNA转染实验进一步验证实验发现的分子机制。结果:通过MTT实验发现与阳性对照组相比化合物一对实验中所有肿瘤细胞活性较好,且适宜给药时间为24 h并选用0、2和4μM作为接下来实验的给药浓度,而化合物二效果远不及阳性对照组。化合物一达到2μM时就可抑制肿瘤细胞AGS、Lovo、H... 

【文章来源】：湖北科技学院湖北省

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

最常见的肿瘤表型之一是葡萄糖代谢的改变

26图1（A）用MTT方法测定化合物一给药24h对肿瘤细胞AGS，C6，H520，H1975，Hela，HuH-7，NC1-N87，MRMT-1和Lovo增殖的影响。（B）用MTT方法测定化合物二给药24h对肿瘤细胞AGS，C6，H520，H1975，Hela，HuH-7，NC1-N87，MRMT-1和Lovo增殖的影响。（C）用化合物一处理AGS，MRMT-1和Lovo三种细胞给药12、24和36小时后，通过MTT测定法测量细胞增殖能力。（D）阳性对照氯丙嗪和原料2-氯吩噻嗪（给药浓度0、5、10、15、17.5、20、25、30、40和60μM））对AGS，MRMT-1和Lovo三种肿瘤细胞给药24h的增殖能力的影响。将未给药的肿瘤细胞用作为对照组，将其细胞活力设置为100％。*P<0.05，**P<0.01和***P<0.001。

272化合物一对肿瘤细胞平板克隆形成的影响平板克隆形成实验反映了单个细胞的集落形成能力。为了检测化合物一堆肿瘤细胞单克隆形成的影响我们进行了平板克隆实验并选用Lovo，MRMT-1，AGS细胞作为研究对象。除了给药后浓度为0.5μM外，化合物一对AGS和MRMT-1细胞单克隆形成有显著抑制作用，而其所有浓度对lovo细胞中均表现出明显抑制作用（图2A-B）。图2（A）化合物一（给药浓度：0、0.5、1和2μM；处理时间7天）对癌细胞AGS，MRMT-1和Lovo平板克隆形成实验的影响。（B）克隆形成率统计图。将未给药的细胞作为对照组，将其单克隆形成力设为100％。***P＜0.001。

【参考文献】：
硕士论文
[1]氯丙嗪与三氟拉嗪对肺癌的作用及机制研究[D]. 陈波.天津科技大学 2016



本文编号：3585937