木香烃内酯对K562/A02细胞阿霉素耐药的逆转作用研究
发布时间：2022-01-13 08:13
目的探索木香烃内酯对白血病耐药细胞系K562/A02阿霉素耐药的逆转作用。方法将木香烃内酯与K562/A02细胞共培养72 h后,采用MTT法检测木香烃内酯对细胞生长的抑制作用。不同浓度木香烃内酯处理K562/A02细胞24 h后,采用Annexin V和PI双染法检测木香烃内酯对细胞的凋亡。不同浓度木香烃内酯与阿霉素共培养72 h后采用MTT法检测木香烃内酯对K562/A02细胞的耐药逆转情况。采用流式细胞仪检测木香烃内酯处理24 h之后K562/A02细胞阿霉素蓄积以及细胞膜表面P-糖蛋白（P-gp）的表达。结果木香烃内酯对K562/A02细胞的生长具有明显抑制作用,呈显著的剂量相关性。与对照组比较,2.550μmol/L木香烃内酯组K562/A02细胞存活率显著降低（P<0.05、0.01、0.001）。随着木香烃内酯浓度的增加,凋亡细胞的比例明显增加。与对照组比较,不同浓度木香烃内酯组细胞凋亡比例显著升高（P<0.05、0.01、0.001）。加入5μmol/L木香烃内酯后,使K562/A02细胞对阿霉素的敏感性提高12倍。木香烃内酯处理后K5...
【文章来源】：现代药物与临床. 2016,31(06)
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
不同浓度木香烃内酯对K562/A02细胞凋亡的影响
fcostunolideonK562/A02cell与对照组比较，2.5～50μmol/L木香烃内酯组K562/A02细胞存活率显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。木香烃内酯对K562/A02细胞的IC50为5.61μmol/L，且在最高浓度50μmol/L时，细胞的存活率最低，见表1。3.2木香烃内酯诱导K562/A02细胞凋亡不同浓度木香烃内酯处理K562/A02细胞24h后，细胞出现明显凋亡。根据细胞凋亡的状态可以把细胞分为两类，AnnexinV＋为凋亡细胞，AnnexinV-/PI-组为活细胞。根据实验结果可知，随着木香烃内酯浓度的增加，凋亡细胞的比例明显增加，见图2。表1木香烃内酯对K562/A02细胞存活率的影响（x±s，n=3）Table1EffectofcostunolideonsurvivalratesofK562/A02cell(x±s,n=3)组别浓度/(μmol·L1)细胞存活率/%对照—99.96±0.86木香烃内酯0.25104.51±6.670.586.36±6.291.080.28±14.222.581.93±0.64*553.86±0.32**1026.48±1.54***2024.89±0.45***5019.89±1.61***与对照组比较：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001*P<0.05**P<0.01***P<0.001vsthecontrolgroup图2不同浓度木香烃内酯对K562/A02细胞凋亡的影响Fig.2EffectsofvariousconcentrationsofcostunolideonapoptosisofK562/A02cells对照组细胞凋亡比例为（6.03±0.83）%，木香烃内酯浓度在2.5、5、10μmol/L时细胞凋亡比例分别为（15.10±1.73）%、（29.13±3.61）%、（91.07±1.91）%。与对照组比较，不同浓度木香烃内酯组细胞凋亡比例显著升高（P＜0.05、0.01、0.001）。同时木香烃内酯处理之后活细胞的比例明显下降，见图3。105104103102102103104105102103104105AnnexinV-FITCAnnexinV-FITC
为5、2.5μmol/L。每个浓度设置3个复孔。放入37℃孵箱中24h后，将细胞吸入流式管中，1500r/min离心8min后弃上清，沉淀用100μLPBS重悬，标记5μLP-gp-PE，室温孵育30min后，离心弃上清，用500μLPBS重悬，流式细胞仪检测P-gp的荧光强度值。2.6统计分析采用GraphPadPrism5软件进行配对t检验，检验对照组和实验组的差异。3结果3.1木香烃内酯对K562/A02细胞生长的抑制作用木香烃内酯处理72h后，K562/A02细胞的生长受到明显抑制，在低于50μmol/L的浓度范围内，K562/A02细胞生长的抑制具有显著的剂量相关性，见图1。图1木香烃内酯对K562/A02细胞的抑制作用Fig.1InhibitionofcostunolideonK562/A02cell与对照组比较，2.5～50μmol/L木香烃内酯组K562/A02细胞存活率显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。木香烃内酯对K562/A02细胞的IC50为5.61μmol/L，且在最高浓度50μmol/L时，细胞的存活率最低，见表1。3.2木香烃内酯诱导K562/A02细胞凋亡不同浓度木香烃内酯处理K562/A02细胞24h后，细胞出现明显凋亡。根据细胞凋亡的状态可以把细胞分为两类，AnnexinV＋为凋亡细胞，AnnexinV-/PI-组为活细胞。根据实验结果可知，随着木香烃内酯浓度的增加，凋亡细胞的比例明显增加，见图2。表1木香烃内酯对K562/A02细胞存活率的影响（x±s，n=3）Table1EffectofcostunolideonsurvivalratesofK562/A02cell(x±s,n=3)组别浓度/(μmol·L1)细胞存活率/%对照—99.96±0.86木香烃内酯0.25104.51±6.670.586.36±6.291.080.28±14.222.581.93±0.64*553.86±0.32**1026.48±1.54***2024.89±0.45***5019.89±1.61***与对照组比较：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001*P<0.05**P
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药逆转肿瘤多药耐药性的研究进展[J]. 刘海晔. 中草药. 2015(07)
本文编号：3586052
【文章来源】：现代药物与临床. 2016,31(06)
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
不同浓度木香烃内酯对K562/A02细胞凋亡的影响
fcostunolideonK562/A02cell与对照组比较，2.5～50μmol/L木香烃内酯组K562/A02细胞存活率显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。木香烃内酯对K562/A02细胞的IC50为5.61μmol/L，且在最高浓度50μmol/L时，细胞的存活率最低，见表1。3.2木香烃内酯诱导K562/A02细胞凋亡不同浓度木香烃内酯处理K562/A02细胞24h后，细胞出现明显凋亡。根据细胞凋亡的状态可以把细胞分为两类，AnnexinV＋为凋亡细胞，AnnexinV-/PI-组为活细胞。根据实验结果可知，随着木香烃内酯浓度的增加，凋亡细胞的比例明显增加，见图2。表1木香烃内酯对K562/A02细胞存活率的影响（x±s，n=3）Table1EffectofcostunolideonsurvivalratesofK562/A02cell(x±s,n=3)组别浓度/(μmol·L1)细胞存活率/%对照—99.96±0.86木香烃内酯0.25104.51±6.670.586.36±6.291.080.28±14.222.581.93±0.64*553.86±0.32**1026.48±1.54***2024.89±0.45***5019.89±1.61***与对照组比较：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001*P<0.05**P<0.01***P<0.001vsthecontrolgroup图2不同浓度木香烃内酯对K562/A02细胞凋亡的影响Fig.2EffectsofvariousconcentrationsofcostunolideonapoptosisofK562/A02cells对照组细胞凋亡比例为（6.03±0.83）%，木香烃内酯浓度在2.5、5、10μmol/L时细胞凋亡比例分别为（15.10±1.73）%、（29.13±3.61）%、（91.07±1.91）%。与对照组比较，不同浓度木香烃内酯组细胞凋亡比例显著升高（P＜0.05、0.01、0.001）。同时木香烃内酯处理之后活细胞的比例明显下降，见图3。105104103102102103104105102103104105AnnexinV-FITCAnnexinV-FITC
为5、2.5μmol/L。每个浓度设置3个复孔。放入37℃孵箱中24h后，将细胞吸入流式管中，1500r/min离心8min后弃上清，沉淀用100μLPBS重悬，标记5μLP-gp-PE，室温孵育30min后，离心弃上清，用500μLPBS重悬，流式细胞仪检测P-gp的荧光强度值。2.6统计分析采用GraphPadPrism5软件进行配对t检验，检验对照组和实验组的差异。3结果3.1木香烃内酯对K562/A02细胞生长的抑制作用木香烃内酯处理72h后，K562/A02细胞的生长受到明显抑制，在低于50μmol/L的浓度范围内，K562/A02细胞生长的抑制具有显著的剂量相关性，见图1。图1木香烃内酯对K562/A02细胞的抑制作用Fig.1InhibitionofcostunolideonK562/A02cell与对照组比较，2.5～50μmol/L木香烃内酯组K562/A02细胞存活率显著降低（P＜0.05、0.01、0.001）。木香烃内酯对K562/A02细胞的IC50为5.61μmol/L，且在最高浓度50μmol/L时，细胞的存活率最低，见表1。3.2木香烃内酯诱导K562/A02细胞凋亡不同浓度木香烃内酯处理K562/A02细胞24h后，细胞出现明显凋亡。根据细胞凋亡的状态可以把细胞分为两类，AnnexinV＋为凋亡细胞，AnnexinV-/PI-组为活细胞。根据实验结果可知，随着木香烃内酯浓度的增加，凋亡细胞的比例明显增加，见图2。表1木香烃内酯对K562/A02细胞存活率的影响（x±s，n=3）Table1EffectofcostunolideonsurvivalratesofK562/A02cell(x±s,n=3)组别浓度/(μmol·L1)细胞存活率/%对照—99.96±0.86木香烃内酯0.25104.51±6.670.586.36±6.291.080.28±14.222.581.93±0.64*553.86±0.32**1026.48±1.54***2024.89±0.45***5019.89±1.61***与对照组比较：*P＜0.05**P＜0.01***P＜0.001*P<0.05**P
【参考文献】：
期刊论文
[1]中药逆转肿瘤多药耐药性的研究进展[J]. 刘海晔. 中草药. 2015(07)
本文编号：3586052
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