疣孢菌NS0172菌株和链霉菌S035菌株的次级代谢产物研究

发布时间：2022-01-26 09:02

　　安莎霉素是一类结构独特、生物活性多样的大环内酰胺类抗生素,主要存在于放线菌和少数的植物。基因组测序和生物信息学分析结果表明,放线菌蕴藏着巨大的次级代谢潜能。对放线菌的基因进行遗传操作,获得基因簇过表达突变株,即可能获得目标化合物,这将对新药的发现有重要贡献。本论文研究以AHBA合酶基因阳性菌株疣孢菌（Verrucosispora sp.NS0172）和链霉菌（Sreptomyces sp.S035）的过表达突变株为实验材料,进行了次级代谢产物的分离纯化,共获得了30个化合物,通过MS、NMR等方法确定了它们的结构,其中20个为新化合物,包括1个开环三酮安莎霉素和12个开环四酮安莎霉素类化合物。Verrucosispora sp.NS0172菌株分离自厦门潮间带,PCR实验结果表明它是一株AHBA合酶基因阳性菌,有产生安莎霉素类化合物的潜力。本课题组的李稳硕士过表达vas10和vas12基因,分别构建了NS0172-OELAL和NS0172-SARP突变株。作者从NS0172-OELAL突变株的YMG琼脂培养基产物中分离得到了 1个已知化合物;从NS0172-SARP突变株的YMG琼脂培... 

【文章来源】：山东大学山东省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【部分图文】：

图３．３化合物Ａｌ?（１）的ＣＯＳＹ和ＨＭＢＣ相关信号??

体平板小批量发酵对照菌株ＮＳ０１７２和突变株ＮＳ０１７２－ＳＡＲＰ，常规处理后将其??粗体物进行ＨＰＬＣ检测（洗脱条件见表３．２），发现保留时间１２－１５?ｍｉｎ含有差异峰??（图３．４）。因此对突变株０１７２－ＳＡＲＰ的次级代谢产物进行了研究。??１３??

?Ｐ９?（１０）?Ｐ１０（１１）??图３．６分离自突变菌株ＮＳ０１７２－ＳＡＲＰ的化合物的结构??（见电子版文件夹ＮＳ０１７２－ＳＡＲＰ）??３．３．４．１化合物Ｐ１?（２）的结构解析??化合物Ｐ１为浅黄色油状物，易溶于ＭｅＯＨ，将其溶于ｍｅｔｈａｎｏｌ－山中进行??ＮＭＲ测定。??高分辨质谱测得化合物Ｐ１的准分子离子峰为ｍ／ｚ?３２２．１６５７?［Ｍ?＋?Ｈ］＋，推测??其分子量为３２１０＆，分子式为（：１７１１２办０５，不饱和度为７。１１？＾［１１、１３（：－１＾１??和ＨＳＱＣ信号（表３．４）显示化合物Ｐ１含有１７个碳原子，包括２个甲基，３个??亚甲基，７个次甲基（包括１个氧取代的次甲基和５个烯碳），５个季碳（包括??２个羰基碳）。根据１ＨＪＨＣＯＳＹ相关信号（表３．３）可以确定Ｃ－７－Ｃ－１３片段。??Ｈ－３?与?Ｃ－１?和?Ｃ－５，?Ｈ－１?与?Ｃ－３、Ｃ－５?和?Ｃ－７?以及?Ｈ－５?与?Ｃ－ｌ、Ｃ－３?和?Ｃ－７?之间存??在的ＨＭＢＣ信号（表３．４），表明化合物含有一个三取代的苯环单元，然后再根??据Ｈ－１３与Ｃ－１４之间存在ＨＭＢＣ信号

【参考文献】：
期刊论文
[1]海洋真菌次级代谢产物化学成分及生物活性的研究进展[J]. 杨加庚,梅益勤,裴月湖.  沈阳药科大学学报. 2013(01)
[2]产紫青霉中的活性成分[J]. 王涛,张祎,齐秀兰,裴月湖.  沈阳药科大学学报. 2001(05)

硕士论文
[1]三株土壤放线菌次级代谢产物的研究[D]. 尉飞飞.山东大学 2018



本文编号：3610214