玉米赤霉烯酮对人脐静脉血管内皮细胞的毒性作用研究

发布时间：2017-10-11 14:11

  本文关键词：玉米赤霉烯酮对人脐静脉血管内皮细胞的毒性作用研究

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【摘要】：玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)又称F-2毒素,它首先从有赤霉病的玉米中分离得到,它对人体、动物以及植物都有着严重的危害,它主要作用在家禽和谷类农作物中,给人们经济和生活造成了严重的损失以及危害。研究ZEN的毒素作用,对于发现和防预真菌毒素对人体、动物和植物的危害有着非常重要的意义。人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)是人体中最有代表性的组织细胞,它的细胞结构明显,所以常被用于各种医学研究。本文就以不同浓度的ZEN对HUVEC细胞的影响效果,来深入研究和分析ZEN的毒性作用。主要研究的是ZEN对HUVEC细胞活力、生长形态、氧化应激相关指标、线粒体膜电位以及细胞的凋亡等方面的影响。结果显示:(1)ZEN可促使HUVEC细胞形态明显改变,降低细胞活力和密度,增加细胞毒性。(2)ZEN能使LDH活性升高,抑制正常细胞生长和增殖,同时还能破坏细胞结构,造成细胞死亡。(3)ZEN可以显著升高HUVEC细胞中活性氧(ROS)水平,使细胞中MDA含量明显增加,明显抑制细胞中GSH、T-SOD、CAT的含量及活力;并能够抑制细胞的基因表达,造成细胞死亡。(4)ZEN能够使线粒体膜上的电位下降,从而造成线粒体的功能性障碍,同时破坏细胞中的细胞核和染色质,造成细胞极度萎缩。结论:ZEN拥有毒性作用,它可以改变细胞结构,促使氧化应激,抑制细胞的生长,造成细胞凋亡。而且它的毒性的强弱随着浓度的增加而增强。
【关键词】：玉米赤霉烯酮 HUVEC细胞 细胞增殖 氧化应激 细胞凋亡
【学位授予单位】：华南农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R114
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-6
• 缩写词与英汉全称6-9
• 1 前言9-21
• 1.1 ZEN结构和理化特性9-10
• 1.2 ZEN的毒性和危害10-11
• 1.2.1 生殖毒性10
• 1.2.2 免疫毒性10
• 1.2.3 致癌毒性10-11
• 1.2.4 细胞毒性11
• 1.3 ZEN的作用机制11-13
• 1.3.1 通过雌激素受体11-12
• 1.3.2 通过氧化应激12
• 1.3.3 通过破坏染色体12
• 1.3.4 通过抑制雄激素代谢12
• 1.3.5 通过其他途径12-13
• 1.4 ZEN的污染状况13
• 1.5 ZEN的检测方法13-15
• 1.5.1 毛细管电泳法13-14
• 1.5.2 液相色谱法14
• 1.5.3 薄层色谱法14
• 1.5.4 气相色谱法14-15
• 1.5.5 免疫学法15
• 1.6 ZEN的脱毒方法15-18
• 1.6.1 物理去除法16-17
• 1.6.2 化学去除法17
• 1.6.3 生物降解法17-18
• 1.7 ZEN等真菌毒素的预防措施18-20
• 1.7.1 土壤中霉菌的防预18-19
• 1.7.2 收获和储存谷物时的预防19
• 1.7.3 对已经被污染的谷物进行物理处理19-20
• 1.7.4 对已经被污染的谷物进行化学处理20
• 1.8 内容和目标20
• 1.9 目的和意义20-21
• 2 材料与方法21-31
• 2.1 细胞株21
• 2.2 实验试剂21-22
• 2.3 实验仪器22
• 2.4 细胞活力和毒性的相关检测22-24
• 2.4.1 细胞的增值和形态变化22-23
• 2.4.2 细胞活力检测23
• 2.4.3 细胞毒性（LDH）的检测23-24
• 2.5 细胞氧化应激及相关指标的检测24-30
• 2.5.1 ROS的检测24-25
• 2.5.2 丙二醛（MDA）的测定25
• 2.5.3 还原型谷胱甘肽（GSH）的测定25-26
• 2.5.4 细胞内T-SOD和CAT活性的检测26-28
• 2.5.5 ZEN对氧化应激相关基因表达的影响28-30
• 2.6 线粒体膜电位及凋亡相关检测30-31
• 2.6.1 线粒体膜电位的检测30-31
• 2.6.2 Hoechst33342染液检测31
• 2.7 数据统计分析31
• 3 结果与分析31-39
• 3.1 ZEN对HUVEC细胞活力和毒性相关检测结果31-34
• 3.1.1 ZEN对HUVEC细胞增殖和形态变化的影响31-33
• 3.1.2 ZEN对HUVEC细胞活力的影响33
• 3.1.3 ZEN对细胞内LDH产生的影响33-34
• 3.2 ROS及氧化应激相关指标检测结果34-37
• 3.2.1 ZEN对HUVEC细胞中ROS水平的影响34-35
• 3.2.2 ZEN对HUVEC细胞MDA活性的影响35
• 3.2.3 ZEN对HUVEC细胞内还原型GSH含量的影响35-36
• 3.2.4 ZEN对HUVEC细胞内SOD和CAT活性的影响36-37
• 3.2.5 ZEN对HUVEC细胞氧化应激有关基因表达的影响37
• 3.3 HUVEC细胞凋亡相关指标的检测37-39
• 3.3.1 线粒体膜电位的检测结果37-39
• 3.3.2 Hoechst33342检测结果39
• 4 讨论39-43
• 4.1 ZEN对HUVEC细胞活力及生长形态的影响39-40
• 4.2 ZEN对HUVEC的细胞毒性作用LDH（乳酸脱氢酶）的影响40
• 4.3 ZEN对HUVEC氧化应激相关指标的影响40-42
• 4.4 ZEN对HUVEC线粒体膜电位及凋亡的影响42-43
• 5 结论43-44
• 致谢44-45
• 参考文献45-46

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前8条

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本文编号：1012945