马尾松花粉提取物对非酒精性脂肪肝小鼠的影响

发布时间：2017-10-23 20:32

  本文关键词：马尾松花粉提取物对非酒精性脂肪肝小鼠的影响

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【摘要】：现代社会人类高脂肪高热量的膳食结构、多坐少动的生活方式导致非酒精性脂肪肝（NAFLD）发病比例显著升高，已经成为一个重要的公共健康问题。松花粉作为中国传统药材，是药食兼用花粉品种，对于人体多种疾病具有防治效果，包括对肝脏具有保护作用。然而，其具体的防治作用机制尚不明了。本实验利用NAFLD小鼠模型，探讨评价马尾松花粉提取物（masson pine pollen extract，MPPE）预防和治疗非酒精性脂肪肝病的效果，并探讨其作用机制，为松花粉作为治疗脂肪肝的候选药物或者相关的保健品提供理论依据。本课题研究主要包括以下三部分内容。 1. MPPE对NAFLD小鼠的预防作用：前两周三个剂量的松花粉组灌胃相应剂量的MPPE，然后在给予高脂鼠粮同时给予MPPE连续6周，共计8周。收集小鼠尿液，用于代谢组学分析。实验结束后处死小鼠，测定相关指标。制作肝脏石蜡切片，观察肝脏脂肪蓄积情况。 结果显示：与模型组相比，MPPE降低血清TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平及肝匀浆MDA含量，升高HDL-C水平及增加SOD、GSH活性。苏木精-伊红染色结果显示MPPE可显著改善高脂饮食引起小鼠肝脏的炎症与坏死。经MPPE预防后，小鼠的尿液代谢开始发生改善，有向空白组接近的趋势。 2. MPPE对NAFLD小鼠的治疗作用：先以高脂鼠粮喂养小鼠6周建立脂肪肝模型，，再以灌胃不同剂量的MPPE连续治疗3周，共计9周。测定指标与预防作用一致。研究结果表明：与模型组相比，MPPE降低血清TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平及肝匀浆MDA含量，升高HDL-C水平及增加SOD、GSH活性。病理学结果显示MPPE能显著减轻肝脏病理学损伤程度，表现为肝细胞脂肪变性及炎症的减轻。代谢组学研究表明，小鼠尿液代谢产物发生了变化，以高剂量MPPE效果最好。 3. MPPE及LZ、WWZ两种复方对NAFLD小鼠影响：先喂食高脂鼠粮6周建立非酒精性脂肪肝模型，从第7周开始MPPE组和复方组分别灌胃相应剂量受试物，而护肝片组灌胃护肝片，高脂模型组和空白组灌胃等体积的生理盐水，每天一次，连续3周，共计9周。结果显示：与模型组相比，MPPE降低血清TC、TG、LDL-C、AST、ALT水平及肝匀浆MDA含量，升高HDL-C水平及增强SOD活力。经MPPE及LZ、WWZ两种复方干预后，肝脏损伤均得到了良好的改善，然而MPPE与LZ、WWZ复方之间结果差异不显著。 总之，MPPE对高脂饮食诱导的小鼠肝损伤具有显著的保护作用，其作用机制可能与抗自由基脂质过氧化反应、调节脂质代谢紊乱有关。但是MPPE的成分尚不明确，有待进一步的分析研究。
【关键词】：马尾松花粉提取物 非酒精性脂肪肝 预防作用 治疗作用
【学位授予单位】：山东师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R151
【目录】：

• 缩写5-6
• 摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 第一章 综述10-22
• 1. 马尾松花粉及其作用10-12
• 1.1 马尾松花粉10
• 1.2 松花粉的作用10-12
• 2. 非酒精性脂肪肝12-19
• 2.1 非酒精性脂肪肝的发病机制13-16
• 2.2 影响 NAFLD 的因素16-18
• 2.3 非酒精性脂肪肝模型的建立18-19
• 3. 代谢组学研究19-20
• 3.1 代谢组学的发展历史19
• 3.2 代谢组学的研究方法19-20
• 4.研究的意义及目的20-22
• 第二章 马尾松花粉提取物预防小鼠非酒精性脂肪肝及代谢组学的研究22-39
• 1. 材料与试剂22-24
• 1.1 实验材料22-24
• 1.2 溶液的配制24
• 2. 仪器与设备24-25
• 3. 方法步骤25-27
• 3.1 马尾松花粉提取物25
• 3.2 动物模型的建立25
• 3.3 样品收集与处理25-26
• 3.4 肝脏病石蜡切片的方法及步骤26
• 3.5 色谱和质谱条件26
• 3.6 数据分析26-27
• 4. 实验结果27-36
• 4.1 松花粉提取物对小鼠血清中 TG、TC 含量及 AST、ALT 活性的影响27-28
• 4.2 松花粉提取物对血清中 LDL-C、HDL-C 含量及血清和肝组织 SOD 活性的影响28-30
• 4.3 松花粉提取物小鼠肝脏 MDA、GSH 含量的影响30
• 4.4 小鼠肝脏病理学结果30-32
• 4.5 小鼠尿液代谢组学分析32-36
• 5. 讨论36-39
• 第三章 马尾松花粉提取物治疗小鼠非酒精性脂肪肝及代谢组学的研究39-54
• 1. 材料与试剂39-40
• 1.1 实验材料39-40
• 1.2 鼠粮的制作40
• 2. 仪器和设备40
• 3. 实验方法及步骤40-42
• 3.1 马尾松花粉提取物40
• 3.2 动物模型的建立40-41
• 3.3 样品收集与处理41
• 3.4 肝脏病理学检测41
• 3.5 色谱和质谱条件41
• 3.6 数据分析41-42
• 4. 实验结果42-47
• 4.1 松花粉提取物对小鼠血清中 TG、TC、AST 和 ALT 含量的影响42-43
• 4.2 松花粉提取物对血清中 LDL-C、HDL-C 含量及血清和肝组织 SOD 活性的影响43-45
• 4.3 松花粉提取物小鼠肝脏 MDA、GSH 含量的影响45-46
• 4.4 小鼠肝脏病理学结果46-47
• 5. 小鼠尿液代谢组学分析47-52
• 5.1 总离子流色谱图47-49
• 5.2 小鼠尿液的 PLS-DA 分析49-52
• 6. 讨论52-54
• 第四章 MPPE 及两种复方对小鼠非酒精性脂肪肝的影响54-61
• 1. 材料与试剂54
• 1.1 实验材料54
• 1.2 鼠粮的制作54
• 2. 仪器和设备54-55
• 3. 实验方法及步骤55-56
• 3.1 MPPE 及 LZ、WWZ 复方55
• 3.2 动物模型的建立55
• 3.3 样品收集与处理55-56
• 3.4 数据分析56
• 4. 实验结果56-59
• 4.1 MPPE 及 LZ、WWZ 复方对小鼠血清中 TG、TC、AST 和 ALT 含量的影响56-57
• 4.2 MPPE 及 LZ、WWZ 复方对小鼠血清中 LDL-C、HDL-C 及肝脏组织 SOD 活性及 MDA 含量的影响57-59
• 5. 讨论59-61
• 总结61-62
• 参考文献62-68
• 致谢68-69
• 攻读学位期间发表论文情况69

【参考文献】

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