多不饱和脂肪酸提高发育期大鼠空间学习记忆的机制

发布时间：2017-10-28 20:11

  本文关键词：多不饱和脂肪酸提高发育期大鼠空间学习记忆的机制

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【摘要】：为了探讨饮食中添加DHA、红花籽油、核桃油、紫苏油、α-亚油酸对发育期大鼠空间学习记忆能力的影响,以及其分子机制。我们将56只初断乳的SPF级雄性SD大鼠随机分成7组:阴性对照组、必需脂肪酸缺乏对照组、DHA组(300mg/kg·d)、α-亚油酸组(1.32g/kg·d)、紫苏油组(2.45m L/kg·d)、核桃油组(2.45m L/kg·d)和红花籽油组(1.65g/kg·d)。每日灌胃给油,连续饲养八周后,首先进行Morris水迷宫行为学实验,观察大鼠空间学习记忆的变化;然后提取大鼠大脑细胞膜,使用气相色谱-质谱联用技术检测大鼠大脑组织细胞膜中脂肪酸的种类与含量;其次,采用Realtime-PCR技术检测大鼠海马组织中即刻早期基因(c-fos)、c AMP反应原件结合蛋白(CREB)和NMDA受体亚基(NR1)m RNA表达量,同时使用western-bolt技术检测大鼠海马组织中CREB与c-Fos蛋白的表达。最后,通过体外培养海马神经元细胞,构建细胞模型,并将其分为阴性对照组、DHA组、α-亚油酸组、紫苏油组、核桃油组、红花籽油组。培养24h后,观察海马神经元细胞的变化,并使用Realtime-PCR技术检测海马神经元细胞中c-fos、CREB和NR1的m RNA表达。结果显示:(1)与阴性对照组相比,DHA组、紫苏油组、α-亚油酸组、核桃油组、红花籽油组的大鼠逃避潜伏期明显缩短(P0.05和P0.01),穿越目标象限的时间比明显增加(P0.05和P0.01)。DHA组、紫苏油组、核桃油组、红花籽油组的大鼠穿越目标象限内平台的次数较阴性对照组显著增加(P0.05),α-亚油酸组无明显差异。在Morris水迷宫的结果比较中,必需脂肪酸缺乏对照组与阴性对照组相比,无显著性差异。(2)与阴性对照组相比,每组大鼠大脑细胞膜脂肪酸的种类相同;DHA组、紫苏油组、α-亚油酸组、核桃油组、红花籽油组的大鼠大脑组织细胞膜中n-3系列多不饱和脂肪酸含量和n-3PUFA/n-6PUFA的比值显著增加(P0.05和P0.01);DHA组、核桃油组与红花籽油组的大鼠大脑细胞膜中DHA/AA的比值显著升高(P0.05和P0.01)。必需脂肪酸缺乏对照组的大鼠大脑细胞膜脂肪酸含量与阴性对照组相比,无显著性差异。(3)与阴性对照组相比,DHA组、紫苏油组、α-亚油酸组、核桃油组、红花籽油组的大鼠海马组织中NR1、CREB和c-fos的m RNA表达量明显上调(P0.05和P0.01)。DHA组、紫苏油组、α-亚油酸组、核桃油组、红花籽油组的大鼠海马组织中CREB和c-Fos蛋白表达量显著上浮(P0.05)。必需脂肪酸缺乏对照组大鼠海马组织基因与蛋白的表达量与阴性对照组相比,无显著性差异。(4)与阴性对照组相比,DHA组、紫苏油组、α-亚油酸组、核桃油组、红花籽油组海马神经元细胞中NR1、CREB和c-fos的m RNA表达量显著上调(P0.05)。得出结论:(1)饮食添加适当剂量n-3PUFA的DHA、紫苏油,n-6PUFA的α-亚油酸、核桃油和红花籽油均能够提高发育期大鼠的空间学习记忆能力,但不同油脂效果不同。短期缺乏必需脂肪酸对发育期大鼠的空间学习记忆功能无影响。(2)DHA、紫苏油、红花籽油、核桃油和α-亚油酸可能是通过增加大鼠大脑细胞膜中n-3PUFA的含量与n-3PUFA/n-6PUFA的比值来提高大鼠学习记忆功能的。(3)DHA、紫苏油、红花籽油、核桃油和α-亚油酸提升发育期大鼠的空间学习记忆能力,可能是通过调控大鼠海马组织中cfos、CREB、NR1的m RNA表达与CREB、c-Fos蛋白的合成,促进长时程增强的产生来实现的。
【关键词】：多不饱和脂肪酸 空间学习记忆 NMDA受体亚基 c AMP反应原件结合蛋白 即刻早期基因
【学位授予单位】：武汉轻工大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-11
• 缩写词中英文对照表11-12
• 第1章 绪论12-26
• 1.1 研究背景12-13
• 1.2 PUFA的研究概况13-20
• 1.2.1 PUFA的简介13
• 1.2.2 PUFA的主要来源与代表油脂13-15
• 1.2.3 PUFA在生物体内的代谢15-16
• 1.2.4 PUFA的生理营养功能16-18
• 1.2.5 PUFA与学习记忆的关系18-19
• 1.2.6 PUFA增强学习记忆的可能机理19-20
• 1.3 学习记忆以及其机制的的研究概述20-21
• 1.4 与学习记忆相关的NR1、CREB、c-fos的研究进展21-24
• 1.4.1 NR1与学习记忆的研究进展21-22
• 1.4.2 CREB与学习记忆的研究进展22-23
• 1.4.3 c-fos与学习记忆的研究进展23-24
• 1.5 研究的目的与意义24
• 1.6 研究的思路和主要内容24-26
• 第2章 整体水平动物实验26-35
• 2.1 实验材料26-27
• 2.1.1 实验动物26
• 2.1.2 实验试剂26
• 2.1.3 实验仪器26-27
• 2.2 实验方法27-29
• 2.2.1 动物的分组与喂养27
• 2.2.2 Morris水迷宫实验27-29
• 2.2.3 统计学分析29
• 2.3 实验结果29-33
• 2.3.1 Bartlett的球形度检验结果29
• 2.3.2 定向航行实验结果29-31
• 2.3.3 空间探索实验结果31-33
• 2.4 讨论33-35
• 第3章 分子水平实验35-56
• 3.1 实验材料35-37
• 3.1.1 实验动物35
• 3.1.2 实验试剂35-36
• 3.1.3 实验仪器36
• 3.1.4 主要试剂的配置36-37
• 3.2 实验方法37-44
• 3.2.1 气相色谱 -质谱联用技术检测脑组织细胞膜脂肪酸的变化37-38
• 3.2.2 Real-time PCR技术检测海马组织中NR1、CREB、c-fos的表达38-41
• 3.2.3 Western-bolt技术检测海马组织中CREB、c-Fos蛋白的表达41-44
• 3.2.4 统计学分析44
• 3.3 实验结果44-52
• 3.3.1 大鼠大脑组织细胞膜脂肪酸的变化44-48
• 3.3.2 大鼠海马组织中NR1、CREB、c-fos m RNA的表达48-50
• 3.3.3 大鼠海马组织中CREB、c-Fos蛋白的表达50-52
• 3.4 讨论52-56
• 3.4.1 气相色谱 -质谱结果讨论52-53
• 3.4.2 Real-time PCR结果讨论53-54
• 3.4.3 Western-bolt结果讨论54-56
• 第4章 细胞水平实验56-64
• 4.1 实验材料56-57
• 4.1.1 实验动物56
• 4.1.2 主要试剂56
• 4.1.3 主要仪器56-57
• 4.1.4 主要试剂的配制57
• 4.2 实验方法57-59
• 4.2.1 海马神经元细胞的原代培养57-58
• 4.2.2 海马神经元细胞的分组58
• 4.2.3 海马神经元细胞中RNA的提取和目的基因的表达58-59
• 4.3 实验结果59-62
• 4.3.1 海马神经元细胞的培养59-60
• 4.3.2 海马神经元细胞中NR1、CREB、c-fos的表达60-62
• 4.4 讨论62-64
• 第5章 小结64-66
• 参考文献66-78
• 致谢78-79
• 攻读学位期间的研究成果79

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 王彪;毕强;孟晓娜;崔鑫;宗志红;邢伟;;慢性铝暴露对大鼠海马细胞外调节蛋白激酶2及cAMP反应元件结合蛋白mRNA和蛋白表达的影响[J];环境与健康杂志;2012年12期

2 成祥林;向明清;汪华;;天麻对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆和海马突触传递蛋白表达的影响[J];中华行为医学与脑科学杂志;2012年03期

3 郭艳芬;王丽梅;肖娜;刘志国;李金华;刘烈炬;;发育期补充DHA对大鼠空间学习记忆能力的影响[J];中国油脂;2011年09期

4 陈超刚,苏宜香,谭炳炎,冯翔,闻剑;多烯脂肪酸对海马神经元细胞脂肪酸构成和生长的作用[J];营养学报;2002年03期

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本文编号：1109753