苯并芘对小鼠T淋巴细胞的抑制作用及相关信号转导通路的调控

发布时间：2017-11-14 19:13

本文关键词：苯并芘对小鼠T淋巴细胞的抑制作用及相关信号转导通路的调控

【摘要】：苯并芘是一种广泛存在于烟熏和烧烤食品中的多环芳烃类污染物，具有致癌、致突变等多种毒性，对人危害极大，同时苯并芘对人体的毒作用具有有潜伏性、蓄积性。本研究旨在非细胞毒性剂量作用下，研究苯并芘对BALB/c小鼠T淋巴细胞的免疫抑制作用及对相关信号转导通路的调控，为阐明苯并芘的免疫毒性机制，寻找更敏感有效、易检测的毒性生物学标志物提供实验依据。本论文从体外研究苯并芘对BALB/c小鼠T淋巴细胞的免疫抑制作用：分离培养小鼠脾脏T淋巴细胞悬液，，采用MTT法筛选苯并芘对T细胞的无细胞毒性的剂量范围，考察刀豆蛋白（ConA）诱导T细胞的增殖情况，筛选出适合剂量作为研究的低中高剂量组（0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL）；ELISA法检测苯并芘对ConA诱导的T细胞分泌的细胞因子（IL-2、IFN-γ、IL-4）的影响；通过检测细胞内[Ca2+]i浓度和CaM蛋白表达，考察苯并芘对细胞内Ca2+通路的影响；WesternBlotting法检测苯并芘对ConA诱导的T细胞的NFAT、NF-κB通路的影响。体外实验结果表明：苯并芘对小鼠T淋巴细胞非细胞毒剂量范围为0-0.4μg/mL，选取0.1μg/mL、0.2μg/mL、0.4μg/mL为低中高剂量组；苯并芘能够抑制ConA诱导的T淋巴细胞的增殖；在细胞水平检测到苯并芘对细胞因子IL-2、IFN-γ、IL-4有抑制作用；苯并芘能够抑制T淋巴细胞内[Ca2+]i浓度、抑制CaM蛋白的表达；苯并芘对T细胞的NFAT、NF-κB通路具有抑制作用，上述所有抑制作用均呈剂量相关性。综上，苯并芘对小鼠T淋巴细胞有抑制作用，并参与对NFAT、NF-κB信号转导通路的调控。综上所述，苯并芘对BALB/c小鼠T淋巴细胞在非细胞毒性下、较低剂量范围具有免疫抑制作用，且抑制作用呈剂量依赖性；苯并芘的免疫抑制作用可能是通过NFAT、NF-κB通路实现的。本研究有助于寻找到苯并芘摄入后对人体早期产生损害的并易于检测的毒性生物学标志物，为修订苯并芘的安全限量，更好地保障食品安全提供实验依据。
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R114

【参考文献】

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