CCD-RSM对增加骨密度保健功能食品的研究及配方设计

发布时间：2017-11-15 08:24

本文关键词：CCD-RSM对增加骨密度保健功能食品的研究及配方设计

【摘要】：本课题主要研究生物碳酸钙(Biological Calcium Carbonate)、胶原蛋白(Collagen)、硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate, CS)、氨基葡萄糖(Glucosamine, GS)四种主要功能成分复合协同增加骨密度的作用。细胞模型选取的是MC3T3-E1前体成骨细胞,通过采用星点设计(Central Composite Design, CCD)-效应面优化法(Response Surface Method,RSM)进行四因素五水平的CCD,通过采用Design Expert8.06实验设计软件来优化得到最优的实验方案,开展四种主要功能成分的复合协同增加骨密度的作用的研究,并通过采用碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, ALP)活性检测以及矿化结节检测,最终得到这四种主要功能成分的最优配方,尤其探讨了四种主要功能成分的最佳组合配方,为提高成分组合的科学性和临床性,增加骨密度的功能食品提供了科学方法以及实验依据。在筛选出四种主要功能成分的最优配方的基础上,继续采用CCD-RSM,分别选择麦芽糊精(Maltodextrin)、木糖醇(Xylitol)、L-苹果酸(L-malic acid)的添加量为影响钙胶原蛋白增加骨密度咀嚼片综合感官评分的考察因素,进行三因素五水平的CCD,通过采用Design Expert8.0.6实验设计软件以及方差分析对实验数据结果进行分析,即对钙胶原蛋白咀嚼片的综合感官品质的影响的主次因素为：麦芽糊精L-苹果酸木糖醇,并且三个考察因素之间存在极明显的交互作用。因此,最终确定了钙胶原蛋白咀嚼片的最优配方。本论文主要结果如下：1、采用(3-4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法(3-4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide),即MTT法来计算细胞的存活率,分析计算MC3T3-E1前体成骨细胞的增殖率。2、采用Design Expert8.0.6实验设计软件,处理实验结果建立多元二次回归数学模型预测。根据建立的多元二次拟合方程绘制出考察因素对效应指标影响的趋势的二维等高线图和三维效应图,根据绘制的二维等高线图和三维效应图选择最佳的组合比例,并进行验证实验。根据各组实验数据对各项指标进行偏差值的计算,来证明建立的多元二次回归数学模型对实验结果预测准确度的大小。3、实验预测值为(62.75%±0.08),实验测得值是(65.69%±0.05)四者协同对MC3T3-E1前体成骨细胞的增殖作用,通过CCD的31组实验得到的最大增值率为65.69%,而市售某胶原软骨素钙片增加骨密度的增值率为60.74%,通过得出的实验数据可知市售某胶原软骨素钙片中主要成分的作用不如生物碳酸钙、胶原蛋白、CS、GS四者协同增加骨密度的作用显著。其中31组实验中的前4组为较优配方用于第三章节的验证实验的实验分组。4、通过改良的Gomori氏钙钴法检测碱性磷酸酶活性来确定成骨细胞(Osteoblast,OB)的分化程度以及功能状态。5、通过采用茜素红染色法检测矿化结节来筛选出该实验的最佳配方。6、通过4和5的实验研究,在4组较优方案中最终确定第1组方案为最佳配方,第1组中四种主要功能成分的剂量为增加骨密度功能食品的最佳配方比例。7、根据得到的增加骨密度保健功能食品配方的最佳配方,验证多元二项式拟合方程的有效性,通过重复验证实验,感官评分的实测值为8.79,多元二项式拟合方程的预测值为8.73,二者相差0.06比较接近,表明该模型是科学合理有效的,该方程能够较好地预测并筛选出理论综合的感官评分,具有现实指导意义,可用于钙胶原蛋白咀嚼片的研发。8、综合考虑效应面能够指出考察因素各自最优区域为：麦芽糊精的添加量为10%、木糖醇的添加量为3.1%、L-苹果酸的添加量为0.15%。9、探讨CCD-RSM在保健食品中多因素、多水平的实验中的应用。
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：TS218;R151

【参考文献】

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1 颜军礼;李蒙;李瑞玉;吴立萍;孙艳浮;李会龙;;中药复方对成骨细胞增殖及骨密度的影响[J];中国组织工程研究;2013年33期

2 向成浩;蒋从斌;杨万波;余鹏;刘勇;;盐酸氨基葡萄糖治疗膝骨关节炎的临床研究[J];华西医学;2012年12期

3 高路;岳婷婷;卢媛媛;魏挺;;胶原蛋白对骨质疏松患者关节疼痛的影响[J];中国临床研究;2012年09期

4 于广利;赵峡;张天民;;硫酸软骨素的结构特点及其质量控制[J];食品与药品;2010年05期

5 刘海容;王亮;曹敏;白颖;;建立骨质疏松俱乐部为平台的健康教育新模式[J];中国骨质疏松杂志;2010年04期

6 李根林;尹君;杜志谦;;研究补肾方药对去势大鼠骨质疏松模型骨生物力学性能的影响应注意的几个问题[J];中医正骨;2009年07期

7 许伯慧;柯学;平其能;;星点设计-效应面法优化氢氯噻嗪盐酸可乐定复方缓释制剂处方[J];中国药科大学学报;2008年06期

8 刘秀菊;张继先;牟忠祥;王世立;;复方硫酸软骨素对大鼠骨质疏松症的治疗作用[J];食品与药品;2008年05期

9 刘艳杰;项荣武;;星点设计效应面法在药学试验设计中的应用[J];中国现代应用药学;2007年06期

10 邓敦;曹成福;石继祥;纪斌;姜玉祥;周军杰;;复方中药治疗原发性骨质疏松的实验研究进展[J];中国中医骨伤科杂志;2007年08期