大豆蛋白对高尿酸血症大鼠的影响及其代谢相关机制的初步研究

发布时间：2017-12-11 20:36

  本文关键词：大豆蛋白对高尿酸血症大鼠的影响及其代谢相关机制的初步研究

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【摘要】：目的建立慢性高尿酸血症(hyperuricemia,HUA)大鼠模型,观察不同剂量大豆蛋白(soy protein,SP)对正常大鼠及HUA大鼠血清尿酸(serum uric acid,SUA)、代谢综合征(metabolic syndrome,MS)相关指标的影响,探讨SP影响HUA及MS的可能机制。方法第一部分采用氧嗪酸钾(potassium oxonate,PO)单用或联用酵母粉(yeast,YE)建立HUA模型。将雄性SD大鼠随机分为三组:正常对照组(control,CON)、PO组(腹腔注射250 mg/kg bw×d)、PO+YE组(腹腔注射PO 250 mg/kg bw×d+酵母粉灌胃1.5 g/只)。通过尿酸酶比色法检测SUA水平,甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法检测血甘油三酯(triglyceride,TG)、血总胆固醇(total cholesterol,TC)水平,肌苷酸氧化酶法检测血肌酐(creatine,CRE)水平,酶偶联速率法检测(urea nitrogen,BUN)水平,直接法测定高密度脂蛋白(high density lipoprotein cholesterol,HDL)、低密度脂蛋白(low density lipoprotein cholesterol,LDL)水平、无创尾套法检测血压水平、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)活性测定试剂盒检测XOD活性,腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)活性测定试剂盒检测ADA活性,苏木精伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察肾脏组织形态,建立慢性HUA大鼠模型。第二部分采用不同浓度SP饲养SD大鼠4w后,建立慢性HUA血症模型,并用高效液相色谱法检测饲料中嘌呤含量。造模前分为4组,分别给予22%酪蛋白(casein,CA),11%SP,22%SP,44%SP喂养。留取血清检测SUA、血BUN、血CRE、血脂水平,血XOD和ADA活性。GLU氧化酶-过氧化物酶法检测葡萄糖(glucose,GLU)水平,无创尾套法检测血压水平、XOD活性测定试剂盒检测XOD活性,ADA活性测定试剂盒检测ADA活性。4w后将22%SP喂养大鼠随机分出一组作为CON组,其余四组作为模型组建立HUA模型。造模4w后留血检测SUA、血BUN、血CRE、血脂、血XOD和ADA。葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法检测血糖(glucose,GLU)水平。HE染色法观察肾组织形态,采用代谢组学方法,应用核磁共振法、主成分分析法确定主要差异代谢产物。结果与CON组比较,PO单用、PO联合YE干预大鼠,实验2w时两处理组大鼠SUA水平开始增高,PO+YE组4w、6w增高最为明显,差异有统计学意义(P0.05)。6w时PO+YE组TG水平明显升高且高于CON组,差异有统计学意义(P0.05)。6w后血压及其它指标均未见异常,且肾脏组织未见损伤。给予不同浓度SP干预大鼠4w后,SUA水平检测结果显示,与SP-D组、SP-L组相比,SP-M组、SP-H组SUA水平升高(P0.05)。TG水平检测结果显示,与SP-D组、SP-L组、SP-M组相比,SP-H组TG水平下降,差异有统计学意义(P0.05)。ADA活性检测结果显示,ADA活性随SP浓度增加而升高(P0.05)。BUN水平检测结果显示,与SP-D组、SP-L组、SP-M组相比,SP-H组BUN水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。造模成功后,SUA水平检测结果显示,与CON组比较,各模型组SUA浓度均升高,且SP-M浓度最低,差异均有统计学意义(P0.05)。XOD活性检测结果显示,与CON组、SP-D组SP-L组、SP-M组比较,SP-H组XOD活性升高。GLU水平检测结果显示,与CON组比较,SP-D组、SP-L组GLU水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。TC水平检测结果显示,与SP-D组比较,SP-M组、SP-H组TC水平下降,差异有统计学意义(P0.05)。BUN水平检测结果显示,与CON组相比,SP-D组、SP-L组、SP-H组BUN水平升高,差异有统计学意义(P0.05)。代谢组学发现不同SP干预HUA大鼠血液中有11种主要代谢差异产物分别为丙氨酸、乳酸、丙酮酸、GLU、肌酸参与糖代谢途径;LDL、丙酮、极低密度脂蛋白、HDL、磷脂酰胆碱、脂质参与脂代谢途径。结论本实验成功建立慢性HUA大鼠模型,并发现SP对于HUA大鼠具有降UA作用并改善MS进程,中剂量SP为较适宜的大鼠摄入剂量。其可能的机制是中剂量SP通过降低SUA代谢中XOD、ADA活性,改变糖代谢、脂代谢途径中的代谢产物来影响疾病的发生发展。
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R151
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本文编号：1279844