甲醛对肝细胞脂代谢相关基因表达的影响

发布时间：2018-06-19 14:53

  本文选题：甲醛 + 肝细胞　； 参考：《山西医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：目的:通过观察甲醛(FA)对HepG2细胞内外甘油三酯(TG)和游离胆固醇(FC)含量以及脂代谢相关基因表达水平的影响,来探讨甲醛致肝损伤的可能机制。方法:以0.004、0.02、0.1 mmol/L FA分别处理人肝癌HepG2细胞24和48 h,采用POD酶法测定细胞内外TG和FC含量,采用QRT-PCR法检测细胞内与TG代谢相关基因:固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)、二脂酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAPα)、酯酰肉碱转移酶1(CPT1)、微粒体甘油三酯转运蛋白(MTTP)、载脂蛋白B100(apoB100)、载脂蛋白E(apoE)、羧酸脂酶3(CES3)、二脂酰甘油酰基转移酶1(DGAT1)、包被蛋白II(COPⅡ)、Sar1b和与FC代谢相关基因:固醇调节元件结合蛋白2(SREBP-2)、SREBP裂解激活蛋白(SCAP)、胰岛素诱导基因1(Insig1)、羟甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、低密度脂蛋白受体(LDLR)的表达水平。结果:第一部分:(1)与阴性对照组相比,甲醛各剂量组染毒48 h可使HepG2细胞内TG含量明显减少(P0.05),染毒24 h可使上清中TG含量明显增加(P0.05);(2)与阴性对照组相比,染毒48 h,甲醛各剂量组细胞内PPAPα基因表达水平明显降低(P0.05);染毒24 h,0.004 mmol/L FA组或染毒48 h,0.1 mmol/L FA组细胞内CPT1基因表达水平明显降低(P0.05);(3)与阴性对照组相比,染毒24 h,0.004 mmol/L FA组或染毒48 h,甲醛各剂量组细胞内MTTP基因表达水平明显升高(P0.05);染毒24 h,甲醛各剂量组或染毒48 h,0.004 mmol/L FA组细胞内apoB100基因表达水平明显升高(P0.05)。第二部分:(1)与阴性对照组相比,甲醛各剂量组染毒24和48 h均可使HepG2细胞内FC含量明显增加(P0.05),且0.004和0.02 mmol/L FA染毒48 h还可使上清中FC含量明显减少(P0.05);(2)与阴性对照组相比,染毒24 h,甲醛各剂量组细胞内HMGCR基因表达水平明显升高(P0.05),染毒48 h,0.1 mmol/L FA组细胞内HMGCR基因表达水平明显降低(P0.05);(3)与阴性对照组相比,染毒48 h,0.02和0.1 mmol/L FA组细胞内LDLR基因表达水平明显升高(P0.05)。结论:(1)甲醛可能通过减少HepG2细胞内PPARα及CPT1基因的表达来抑制肝脏脂肪酸的β-氧化,同时可能通过增加MTTP和apoB100基因的表达来促进VLDL的分泌外排。(2)短期内甲醛可能通过增加HepG2细胞内HMGCR基因的表达来促进FC的合成,随着作用时间的延长可能通过增加LDLR基因的表达而使细胞内FC水平升高,进而反馈抑制HMGCR基因的表达。本课题为山西省留学回国人员科技活动择优资助项目“甲醛对肝脏脂肪代谢的影响及其可能机制(编号:晋人社厅函[2014]376号)”。
[Abstract]:Aim: to investigate the possible mechanism of hepatic injury induced by formaldehyde by observing the effects of formaldehyde on the content of triglyceride (TG) and free cholesterol (FCC) in HepG2 cells and the expression of genes related to lipid metabolism in HepG2 cells. Methods: human hepatoma HepG2 cells were treated with 0.004 and 0.02mol / L FA for 24 h and 48 h, respectively. The contents of TG and FC in HepG2 cells were measured by POD enzymatic assay. QRT-PCR was used to detect the genes related to TG metabolism in cells: steroid regulatory element binding protein 1 (SREBP-1), diacylglycerol acyltransferase (2) DGAT-2, peroxisome proliferator activator receptor (PPAP 伪), esterylcarnitine transferase (1) CPT _ (1), microsomal triglyceride transposition (TG). Transporter MTTPN, apolipoprotein B100 apo B100, apolipoprotein EapoEN, carboxylidase 3Ces3, diacylglyceryltransferase 1n DGAT1, encapsulated protein II cop 鈪，

本文编号：2040254