纳米铅和常规铅暴露对仔鼠海马及皮质氧化损伤的比较研究

发布时间：2019-07-18 20:42

【摘要】：目的比较纳米铅和常规铅暴露对生长发育期仔鼠海马及皮质的氧化损伤作用。方法将30只健康妊娠SPF级SD大鼠随机分为3组,分别为对照(生理盐水)组、纳米铅(10 mg/kg)组和常规铅(100 mg/kg)组,每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒,自母鼠妊娠至仔鼠断乳(PND21)。记录仔鼠的出牙时间、睁眼时间、翻正反射时间、爬行时间、张耳时间、断崖回避时间,采用Morris水迷宫对PND21仔鼠进行学习记忆能力测试,分别于PND1、PND21检测仔鼠海马和皮质中的铅、活性氧(ROS)、蛋白质糖基化终产物(AGEs)含量和抑制羟自由基能力。结果与对照组比较,纳米铅及常规铅暴露后仔鼠翻正反射时间、爬行时间及张耳时间延长,学习记忆能力降低;皮质、海马中铅、ROS和AGEs含量增高,而抑制羟自由基能力降低,差异均有统计学意义(P0.05)。与常规铅组比较,纳米铅组PND21仔鼠皮质和海马中ROS水平均升高,PND1时纳米铅组仔鼠海马抑制羟自由基能力下降,纳米铅暴露组PND21仔鼠海马和皮质中AGEs含量增高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论纳米铅和常规铅染毒可导致仔鼠生长发育期迟缓及皮质、海马的氧化应激,且随着染毒时间延长,纳米铅暴露致仔鼠皮质和海马氧化损伤程度高于常规铅暴露,这可能与纳米材料的特性有关。
文内图片：
图片说明： ），硝酸（美国Sigma公司），磷酸三丁酯、硫化钠均购自天津市大茂化学试剂厂，活性氧（ROS）试剂盒（北京普利莱基因技术有限公司），糖基化终末产物（AGEs）及抑制羟自由基试剂盒均购自南京建成生物试剂有限公司。纳米硫化铅的制备：根据南开大学环境科学学院提供的方法合成。将0.2mol的PbCl2·2H2O溶于500ml磷酸三丁酯中，高速搅拌下慢慢滴加0.1mol/L硫化钠水溶液500ml，静置10min后，离心，沉淀用蒸馏水与无水乙醇各洗涤3次，再用蒸馏水洗涤3次，待用。应用扫描电镜进行表征，纳米硫化铅的粒径约为20nm（图1）。将纳米硫化铅颗粒用高温灭菌生理盐水配制成100mg/ml纳米硫化铅混悬液，高压灭菌后备用；每次染毒前，超声振荡后混匀[5]。乙酸铅染毒溶液的制备：准确称取150mg乙酸铅溶于15ml蒸馏水中，配制成10mg/ml的乙酸铅溶液。1.2实验动物分组及染毒方法经伦理委员会批准，选择健康成年SPF级SD大鼠60只，体重为200～220g，，雌雄各半，由北京维通利华实验技术有限公司提供，动物许可证号：SCXK（京）2005—0001。大鼠在标准的SPF级动物房内饲养，室内温度保持在（25±2）℃，相对湿度为（50±2）％，昼夜交替各12h。实验期间，动物可自由摄食，饮水。适应性喂养1周后，将大鼠按雌∶雄为1∶1合笼饲养。每日清晨检查雌性大鼠有无阴栓，以发现阴栓为妊娠第1天。将妊娠大鼠随机分为3组，分别为对照（生理盐水）组、纳米铅（10mg/kg）组和常规铅（100mg/kg）组，每组10只。采用经口灌胃方式进行染毒，染毒容量为1ml/kg，自母鼠妊娠至仔鼠断乳（出生后21d，即PND21）。出生后每天称量仔鼠体重，观察并记录其出牙时间、睁眼时间、翻正反射时间、爬行时间、张耳时间、断崖回避时间。1.3仔鼠学习记忆能力测试采用Morris水
【作者单位】： 河北联合大学公共卫生学院河北省煤矿卫生与安全实验室;
【基金】：国家重点基础研究发展计划(2012CB525002) 国家自然科学基金(81373033)
【分类号】：R114

【参考文献】

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本文编号：2516058