阿特拉津对非洲爪蟾发育影响的分子毒理学研究

发布时间：2019-09-11 10:00

【摘要】：[研究目的] 本文将非洲爪蟾染毒不同浓度的阿特拉津,在2个不同时间点进行取样,分析和探讨阿特拉津对西栖类生存和发育的毒性。运用全基因组表达谱芯片技术筛选性腺组织的敏感基因和对性腺产生发育毒性可能存在的细胞信号通路；运用Real time RT-PCR技术分析阿特拉津对肝脏相关基因表达的影响,研究阿特拉津对非洲爪蛾肝脏的毒性作用。运用以上两种方法初步探索阿特拉津对非洲爪蟾发育毒性作用的机制。 [研究方法] 本次实验设对照组和4个阿拉津染毒组,分别是0.1、1、10和100μg/I.组,每组随机挑选30只非洲爪蟾蝌蚪。实验结束时,取非洲爪蟾的性腺和肝脏组织,进行称重和基本形态观察,并迅速置于液氮中保存。运用非洲爪蟾全基因组表达谱芯片和Real time RT-PCR技术,对性腺组织进行敏感基因和细胞信号通路的筛选,对肝脏组织进行相关基因表达的研究。 [研究结果] 1阿特拉津对非洲爪蟾一般生长发育情况的影响 阿特拉津对非洲爪蟾的体长、体重、性腺重没有显著影响(p0.05),0.1、1、10μg/L组的肝脏重量显著降低(p0.05)；10、100μg/L染毒组肝脏系数有所升高(p0.05)：0.1和100μ/L阿特拉津组的蝌蚪完成变态的时间较长于其他组,但差异无显著性(p0.05)；变态完成后,性别比没有发生显著变化(p0.05)；0.1、1、10和100μg/L剂量组均有雄性性腺出现不连续发育,存在不同程度的断裂。 2阿特拉津对雄性非洲爪蟾性腺敏感基因和细胞信号通路的筛选 通过GO分析,在分子功能、生物过程和细胞组成三个部分获得了差异基因聚集的多条功能条目。通过Pathway分析,我们得到了6条差异显著的细胞信号通路,分别是精氨酸和脯氨酸能量代谢通路、细胞周期通路、剪接体通路、碱基切除修复通路、核黄素代谢通路和孕酮介导的卵母细胞成熟通路。 3阿特拉津对非洲爪蟾肝脏相关基因表达的影响 阿特拉津使100μg/L组雄性非洲爪蟾的AR水平显著增高(p0.05),使100μg/L组非洲爪蟾HSP90表达水平显著升高(p0.05)，而对VTG、ER、HSP70和GR的表达水平无显著性影响(p0.05)。 [研究结论] 1阿特拉津使0.1、1、10μg/L组非洲爪蟾的肝脏重量显著降低,10、100μg/L染毒组肝脏系数有所升高,对其他一般生长情况无显著影响；阿特拉津在一定程度上抑制了非洲爪蟾蝌蚪的变态；性别比没有明显变化；各组均有发育不连续的雄性性腺,出现异常节段。 2阿特拉津对雄性非洲爪蟾性腺产生发育毒性可能与6条细胞信号通路相关,分别是精氨酸和脯氨酸能量代谢通路、细胞周期通路、剪接体通路、碱基切除修复通路、核黄素代谢通路和孕酮介导的卵母细胞成熟通路。G0分析后获得差异功能聚集的多条功能条目。 3阿特拉津使100μg/L组雄性非洲爪蟾肝脏内AR水平显著增高,使100μg/L组非洲爪蟾HSP90表达水平显著升高,而对VTG、ER、HSP70和GR的表达水平无显著性影响。
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R114

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本文编号：2534349