乙醇对雄性小鼠生殖力的影响

发布时间：2019-09-20 07:15

【摘要】：目的：探讨乙醇对小鼠生育力的影响，间接反映酒精对男性生育力的影响，为男性不育的预防和治疗提供科学依据。方法：实验选用7～12周龄雄性健康昆明小鼠50只，体重25g～30g，随机分为5组，每组10只，分别为对照组，试验组(4组)。根据每天灌喂乙醇的量，将试验组分成0.1ml、0.2ml、0.3ml、0.4ml四组。小鼠预饲1周后开始灌喂给药，每日1次。试验于小鼠灌胃的第4，第8，第12天进行切片制作、HE染色、生精细胞凋亡的凝胶电泳法检测、TUNEL法定量检测生精细胞凋亡、以及Bc1-2/Bax免疫组织化学试验。结果: ⑴对照组和0.1ml/kg组小鼠睾丸组织结构发育正常，生精上皮完整。0.2ml/kg组曲精小管上皮细胞层数未见显著减少，初级生精细胞和次级生精细胞结构疏松，但生精上皮基本能保持完整。0.3ml/kg组曲精小管上皮细胞层数亦未见减少，初级生精细胞和次级生精细胞结构被破坏，精原细胞数目极度减少，核形态不规则。0.4ml/kg组睾丸组织结构已出现严重受损，曲精小管生精上皮已从基膜上脱落、与结缔组织分离，初级生精细胞和次级生精细胞的结构完全被破坏，上皮细胞分层不可辨；精原细胞消失，次级精母细胞和精子细胞细胞核体积明显减小，形态不规则，管腔中无精子。 ⑵睾丸组织生精细胞凋亡DNA特征性梯状带的检测在第4d和8d时，对照组、0.1ml/kg组、0.2ml/kg组、0.3ml/kg组、0.4ml/kg组均未见凋亡的特征性梯状条带；而在第12d时，对照组和0.1ml/kg组没有检测出特征性梯状条带，溶剂组检测出明显的特征性梯状条带。 ⑶T UNEL法定量检测生精细胞凋亡，第4天时，0.3ml/kg组、0.4ml/kg组的生精细胞凋亡指数较对照差异显著（P＜0.05）；第8天时0.2ml/kg组和0.3ml/kg组的生精细胞凋亡指数较对照组差异显著（P＜0.05），0.4ml/kg组的生精细胞凋亡指数较正常组和阴性组差异极显著（P＜0.01）；第12天时，0.3ml/kg组、0.4ml/kg组较正常组的生精细胞凋亡指数差异显著（P＜0.05），其中第8天0.4ml/kg组在所得实验数据中最高达到0.4，，为实验数据中最大值。 ⑷乙醇对雄性小鼠睾丸生精细胞凋亡调控基因Bax和Bcl-2蛋白表达，随着乙醇浓度的升高阳性表达面积增大，呈现一定的剂量－效应关系，随着乙醇浓度的增加灰度值降低。随着乙醇浓度的增加阳性表达面积比降低，乙醇各浓度组灰度值均比对照组低，但是比较差异不显著（P＞0.05），说明高剂量的乙醇会使Bcl-2蛋白的表达浓度减少。结论：持续高剂量的乙醇能够诱导促凋亡基因Bax蛋白的表达，阻止抑制凋亡基因Bcl-2蛋白的表达，持续高剂量的乙醇能够诱发睾丸生殖细胞的凋亡，以致损伤小鼠的生殖能力。
【图文】：

对照组

图 2-1 对照组 8d 睾丸组织（×400）图 2-2 0.1ml/kg 组 8d 睾丸组织（×400）Fig.2-1 Tissues of 8d testicle from control group（×400） Fig.2-2 Tissues of 8d testicle from 0.1ml/kggroup（×400）图2-3 0.2ml/kg组8d睾丸组织（×400）图2-4 0.3ml/kg组8d睾丸组织（×400）Fig.2-3 Tissues of 8d testicle from 0.2ml/kg group（×400） Fig.2-4 Tissues of 8d testicle from 0.3ml/kg group（×400）

对照组

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