母鼠微量镉暴露对雄性子代性腺分化发育的影响及其机制的研究

发布时间：2020-02-16 08:43

【摘要】：目的:研究妊娠期微量镉(Cd)暴露对雄性胎鼠性腺分化发育的影响及作用机制。方法：将SD孕鼠16只随机分为4组：镉组（A组）、己烯雌酚组（B组）、镉加他莫昔酚组（C组）和正常对照组（D组），每组4只。A组于孕期第9、11、13天隔日腹腔注射氯化镉1.5mg/(kg.d)，B组于妊娠第9-17天隔日皮下注射己烯雌酚100μg/(kg.d)，C组注射氯化镉的同时给予雌激素受体拮抗剂他莫昔酚（TMX）50mg/(kg.d)，D组注射与镉等体积生理盐水。于妊娠第18天，每个组行剖宫产取雄性胎鼠，计录胎鼠数量、体长、胎盘重量，计算雄性胎鼠所占比例；胎鼠睾丸作光、电镜观察；免疫组化测定各组胎鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）表达水平；RT-PCR法测定苗勒氏管抑制物（MIS）表达量。结果：（1）与正常组比较，，各组每只孕鼠每胎平均妊娠胎鼠数以及雄性胎鼠比例没有明显差异（p㧐0.05），镉组和己烯雌酚组胎盘重量、胎鼠体重以及胎鼠体长均低于正常组（p＜0.05）；（2）光镜下，A组和B组睾丸生精小管内支持细胞排列紊乱，间质成分增生，C组改变较轻，D组未见明显的形态学改变；（3）电镜下，A组和B组均可见支持细胞、生殖母细胞及间质细胞线粒体肿胀、内质网扩张以及间质细胞内脂滴堆积，C组超微结构退变轻于A组和B组；（4）A组和B组间质细胞中StAR阳性产物表达均显著低于D组(P0.05)，C组StAR阳性产物表达虽低于D组，其差异没有统计学意义（P0.05），但却明显高于A组(P0.05)；（5）各组间MIS表达差异无统计学意义（P0.05）。结论：（1）镉是一种环境内分泌干扰因子，其干扰胚胎期雄性大鼠性腺发育过程的机制与己烯雌酚相似。（2）镉对胎鼠性腺分化发育的影响不是通过MIS的途径。目的:研究妊娠期及哺乳期微量镉暴露对雄性仔鼠性腺发育的影响及作用机制。方法：将SD孕鼠16只随机分为4组：镉组（A组）、己烯雌酚组（B组）、镉加他莫昔酚组（C组）和正常对照组（D组），每组4只。A组于孕期第9、11、13天及产后隔日腹腔注射氯化镉1.5mg/(kg.d)，B组于妊娠第9-17天及产后隔日皮下注射己烯雌酚100μg/(kg.d)，C组注射氯化镉的同时给予雌激素受体拮抗剂他莫昔酚50mg/(kg.d)，D组注射与镉等体积生理盐水。产后30天，每个组取雄性仔鼠及其右侧睾丸称重；电子显微镜观察仔鼠睾丸形态学改变；免疫荧光法检测睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）表达水平；RT-PCR法测定抑制素B(inhibin-B)表达量。结果：（1）与D组相比, A、B两组仔鼠体重及睾丸重量降低(P0.05)；（2）A组和B组睾丸生精上皮均发生不同程度的发育阻滞和超微结构损伤，C组超微机构损伤较轻；（3）A、B两组仔鼠睾丸间质细胞中StAR表达强度明显低于C组和D组(P0.05)；（4）A组、B组胎鼠睾丸inhibin-B表达量降低，与D组比较有统计学意义（P0.05），C组胎鼠睾丸inhibin-B表达量虽有降低，但与D组比较没有统计学意义（p＞0.05）。结论：（1）镉能对青春期前雄性大鼠性腺发育过程产生干扰作用。（2）镉和己烯雌酚对StAR和inhibin-B表达水平的影响作用相似，说明镉具有雌激素样效应。
【图文】：

熔解曲线,单峰,己烯雌酚,胎鼠

图 1.2 MIS 熔解曲线为单峰Fig.1.2 melting temperature of MIS is the single-peak扩增结果见表 1-3。四个组胎鼠睾丸中 MIS 表达差异无统计学意义（P>0表 1-3 四个组中目的基因 MIS 相对定量结果(x—±s)Tab.1-3 The relative quantitative results of gene MIS from each group(x—±s)组别 2K镉组 0.93己烯雌酚组 0.95镉+TMX 组 0.91正常组 1.00

熔解曲线,单峰,睾丸,己烯雌酚

图 2-2 inhibin-B 的熔解曲线为单峰Fig.2-2 dissolve curve of inhibin-B is the single-peak扩增结果见表 2-3。镉组、己烯雌酚组 30 天仔鼠睾丸 inhibin-B 表达量降低，与正常组比较有统计学意义（P<0.05），镉+TMX 组 30 天仔鼠睾丸 inhibin-B 表达量也有降低，但与正常组比较没有统计学意义（P＞0.05）；与镉+TMX 组比较，镉组、己烯雌酚组睾丸 inhibin-B 表达量亦降低（P<0.05）。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R114

【参考文献】