褪黑素抑制氰戊菊酯胚胎期暴露所致斑马鱼发育毒性的机制研究

发布时间：2020-04-12 14:58

【摘要】：目的:明确褪黑素(Melatonin,MLT)对氰戊菊酯(Fenvalerate,FEN)胚胎期暴露所致斑马鱼发育毒性的抑制作用。方法:(1)体视显微镜下观察和计算斑马鱼存活率和畸形率;(2)自发运动活性检测行为;(3)试剂盒检测脂质过氧化物丙二醛(MDA),抗氧化酶铜-锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX,GPx)和过氧化氢酶(CAT)活性;(4)AO染色检测凋亡;(5)实时定量荧光PCR检测神经相关基因(Dlx2、Shha、Ngn1、Elavl3、Gfap),氧化应激相关基因(Cu/Zn SOD、GPx、CAT、Nrf2、HO-1)和凋亡相关基因(Bax、Bcl-2、Fas、caspase 8、caspase 9、caspase3)的表达。结果:(1)100μg/L FEN处理至120 hpf时,斑马鱼存活率为43.33%(P0.05),畸形率为58.24%(P0.05);10-9 mol/L MLT可使斑马鱼存活率、畸形率恢复至对照组水平(P0.05)。(2)100μg/L FEN暴露可减弱斑马鱼的运动能力(P0.05),下调斑马鱼神经相关基因(Dlx2、Shha、Ngn1、Elavl3、Gfap)的水平(P0.05);MLT可恢复斑马鱼的运动能力及神经相关基因水平(P0.05)。(3)FEN暴露可升高MDA、Cu/Zn SOD、GPx、CAT的活性,以及上调氧化应激相关基因(Cu/Zn SOD、GPx、CAT、Nrf2、HO-1)的m RNA表达水平,MLT显著缓解FEN所致的氧化应激反应(P0.05)。(4)AO染色表明FEN暴露至120 hpf可显著增加斑马鱼头部凋亡,增加凋亡相关基因(Bax、Fas、caspase 8、caspase 9、caspase 3)的表达,减少抗凋亡基因Bcl-2的表达(P0.05)。MLT可显著缓解FEN导致的凋亡,使凋亡相关基因m RNA水平恢复至对照组水平(P0.05)。结论:1.氰戊菊酯胚胎期暴露可致斑马鱼发育毒性,褪黑素可抑制氰戊菊酯所致的发育毒性;2.褪黑素抑制氰戊菊酯所致斑马鱼发育毒性的机制可能与抑制斑马鱼体内氧化应激水平,降低凋亡相关。
【图文】：

大约为对照组的50%（P<0.001）；当 FEN 浓度为 150 μg/L 时，斑马鱼存活率为 7.41%。120 hpf（图1 F）可知，FEN 浓度小于 100 μg/L 时，斑马鱼畸形率与对照组相比差异无统计学意义（P>0.05）；FEN 浓度为 100 μg/L 时，，斑马鱼畸形率为 58.24%（P<0.001）。因此，FEN 处理最适时间为 120 hpf，最适浓度为 100 μg/L。

与单独 FEN 处理组相比差异有统计学意义（P<0.001）。图2B 结果表明，10-7mol/L 和 10-8mol/L MLT 预处理后，斑马鱼畸形率与对照组相比明显升高（P<0.001），与单独 FEN 处理组相比差异无统计学意义（P>0.001）；10-9
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R114

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本文编号：2624853