小球藻中二十碳五烯酸对小鼠免疫活性的影响

发布时间：2017-03-23 18:13

  本文关键词：小球藻中二十碳五烯酸对小鼠免疫活性的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid, EPA)具有很多生物功能：如促进脑发育,抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等,且现在多数研究都是针对n-3多不饱和脂肪酸和n-6多不饱和脂肪酸不同比例所做的研究,而针对EPA免疫调节活性方面的研究还未见相关报道。本课题对小球藻(Chlorella, C95)进行前期培养、提取、分离纯化EPA研究的基础上,考察了EPA对小鼠免疫功能的影响。在当今压力倍增,造成人们免疫力下降的社会背景下,本文研究EPA的免疫功能具有重要的意义。 实验结果表明：(1)小球藻的培养及EPA的分离纯化结果显示：在实验室培养条件下,小球藻的生物量最高为4.05×107个/mL,测得小球藻粉中脂肪含量占干重的12.8%,其中EPA含量为19.67%。用硝酸银-硅胶柱纯化EPA,所得EPA的纯度为91.28%。 (2)动物实验的结果表明：环磷酰胺能显著降低小鼠免疫功能,给小鼠喂食过EPA后可以减缓环磷酰胺造成小鼠免疫低下的程度。在预防组中,给予小鼠补充高剂量的EPA可以显著减弱环磷酰胺造成的小鼠脾脏指数、胸腺指数、血清溶血素等免疫器官的影响,与模型组小鼠相比,三个指标分别达到49.01+4.67、27.39±1.90和66.63±4.86；在细胞免疫水平上,高剂量的EPA可增强巨噬细胞的增殖活性、吞噬活性以及LPS和ConA诱导的脾细胞的增殖活性,NK细胞的杀伤活性。 在正常组细胞中,两个剂量的EPA都可以提高实验中的各种指标,但不是EPA剂量越高作用效果越好。本实验的研究表明,正常小鼠每天服用44mg/kg(体重)EPA后,其免疫功能有显著增强,并在合理的范围内,不会引起炎症反应。 (3)TR-PCR结果表明：EPA可以有效预防环磷酰胺对小鼠脾细胞中IL-2、IL-6、 IL-12、TNF-α、IFN-γ五种细胞免疫因子及巨噬细胞中IL-1β、IL-6、IL-12、TNF-α、 IFN-γ五种细胞免疫因子造成的mRNA表达水平的降低,并且可以提高正常小鼠的免疫调节功能。
【关键词】：小球藻 二十碳五烯酸 硝酸银-硅胶 细胞因子 免疫功能
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-8
• 1 前言8-23
• 1.1 小球藻8
• 1.2 二十碳五烯酸简介8-9
• 1.3 二十碳五烯酸的来源9-11
• 1.3.1 动物来源9
• 1.3.2 海藻来源9-11
• 1.3.3 微生物发酵生产EPA11
• 1.3.4 生物合成生产EPA11
• 1.4 二十碳五烯酸的生理功能11-20
• 1.4.1 二十碳五烯酸与生物膜12-13
• 1.4.2 二十碳五烯酸与动脉粥样硬化13-14
• 1.4.3 二十碳五烯酸与心肌梗塞和脑梗塞14
• 1.4.4 二十碳五烯酸与脑发育14-15
• 1.4.5 二十碳五烯酸与减肥15
• 1.4.6 二十碳五烯酸与炎症15-16
• 1.4.7 二十碳五烯酸与癌症16-17
• 1.4.8 二十碳五烯酸与免疫17-20
• 1.5 免疫系统20-22
• 1.5.1 免疫器官20-21
• 1.5.3 免疫细胞21
• 1.5.4 细胞因子21-22
• 1.6 本论文的研究目的、意义与主要内容22-23
• 2 材料与方法23-36
• 2.1 实验材料23-27
• 2.1.1 菌种与实验动物23
• 2.1.2 主要药品23-25
• 2.1.3 仪器与设备25-26
• 2.1.4 主要培养基26
• 2.1.5 主要溶液26-27
• 2.2 实验方法27-36
• 2.2.1 小球藻的培养及样品制备27-29
• 2.2.2 二十碳五烯酸的体内免疫调节作用研究29-33
• 2.2.3 二十碳五烯酸对小鼠巨噬细胞免疫因子mRNA表达的影响33-36
• 3 结果与讨论36-57
• 3.1 小球藻的培养及EPA的分离纯化36-39
• 3.1.1 小球藻的培养36
• 3.1.2 小球藻中EPA的含量36-37
• 3.1.3 硝酸银-硅胶柱层析EPA的洗脱结果37-39
• 3.2 EPA对小鼠免疫器官的影响39-40
• 3.3 EPA对体液免疫的影响40-41
• 3.4 EPA对免疫细胞的影响41-45
• 3.4.1 EPA对巨噬细胞增殖的影响41-42
• 3.4.2 EPA对巨噬细胞吞噬活性的影响42-43
• 3.4.3 EPA对脾淋巴细胞增殖活性的影响43-44
• 3.4.4 EPA对NK杀伤细胞活性的影响44-45
• 3.5 EPA对免疫因子的影响45-57
• 3.5.1 EPA对脾细胞免疫因子的影响45-51
• 3.5.2 EPA对巨噬细胞分泌的免疫因子的影响51-57
• 4 结论57-58
• 5 展望58-59
• 6 参考文献59-66
• 7 攻读硕士学位期间发表论文情况66-67
• 8 致谢67

【参考文献】

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本文编号：264296