紫甘薯酰化花色苷与肠道菌群的相互作用研究

发布时间：2020-05-14 16:04

【摘要】：紫甘薯花色苷具有酰基化构造,且具有多种生理功效;本课题研究花色苷与肠道菌群之间的相互作用,有利于了解食物成分对肠道菌群与人体的共生关系的影响,为健康食品的开发提供依据。主要研究内容如下:首先从健康成年女性粪便中,采用传统培养方式,分离提取鉴定出大肠杆菌、肠球菌、双歧杆菌、乳杆菌四种菌属,通过生长曲线的绘制找出各自达到对数期的最佳时间,从而利于菌种活化,进行花色苷对菌种作用的影响研究。并测定其光密度值与菌落形成单位(colony-forming units,CFU)之间的线性关系。采用滤纸片法对紫甘薯花色苷提取物的抑菌活性进行试验,结果表明,紫甘薯花色苷对中性菌肠球菌生长没有抑制作用;对中性菌大肠杆菌生长具有一定的抑制作用,抑菌作用强度随着紫甘薯花色苷浓度的增加而增加,在花色苷质量浓度为12.8mg/mL时达到最大抑菌圈直径为9.20(±0.26)mm。有益菌体外培养结果表明,紫甘薯花色昔对乳杆菌和双歧杆菌的生长均有一定的促进增殖作用,紫甘薯花色苷的促进作用随着培养基中紫甘薯花色苷的浓度的增加而增加:当花色苷浓度分别为10.67mg/mL时,乳杆菌和双歧杆菌的A值达到最高,花色苷对菌种的促进增殖作用最明显。孵化时间在8-16h时,花色苷促进乳杆菌和双歧杆菌增殖的速率更大些;相比而言,紫甘薯花色苷对乳杆菌具有较大的促进增殖作用。实验采用高速逆流色谱法制备紫甘薯单体花色苷,研究了肠道菌对这种双酰基化的芍药素-3-咖啡酰-阿魏酰槐糖苷-5-葡糖苷的作用。肠道菌群对单体花色哲含量降低有着不同程度上的促进作用,且肠道菌群对花色苷降解能力大于四种混合菌的能力。研究了单体菌对该单体花色苷的作用,四种菌对花色苷的降解能力:大肠杆菌双歧杆菌乳杆菌肠球菌。通过HPLC(520nm和280nm)法比较分析,初步研究了大肠杆菌对单体花色苷的降解机理。推测在本研究的时间范围内,大肠杆菌的作用没有使单体花色苷发生水解或者裂解等反应,即没有被降解成更小的分子。分子中呈现紫外吸收的芳香环结构并没有被整体破坏,只是花色苷呈色基团发生了改变,形成了没有颜色的降解产物。这可能是在中性pH条件下,大肠杆菌的作用促进了花色苷由蓝色或紫色的醌型碱转变成部分无色的甲醇假碱形式,随着时间延长,变成这种甲醇假碱形式的基团逐渐增多,而整个分子量没有变化。
【图文】：

测得ｌｇ健康成年女性粪便中四种菌的平板活菌数，如表３－１所示。每个所含肠道菌群构成种类、数量是不同的，因其宿主遗传、年龄、健康状态、生活膳食等［５５］因素影响。徐洁［７７］研究四川不同年龄志愿者的肠道菌群构成，表明处生理年龄时期的健康人其肠道菌群存在差异。逡逑表３－１四种菌的活菌数逡逑Ｔａｂｌｅ邋３－１邋Ｆｏｕｒ邋ｂａｃｔｅｒｉａ邋ｏｆ邋ｖｉａｂｌｅ邋ｃｏｕｎｔ逡逑菌种逦菌种总数（ＣＦＵ／ｇ）逡逑大肠杆菌逦１．２６ｘｌ０１０逡逑肠球菌逦８．９５ｘｌ０４逡逑双歧杆菌逦１．２２ｘｌ0ｑ逡逑乳杆菌逦２．３６ｘ１０ｓ逡逑３．２菌种分离镜检逡逑（１）大肠杆菌：采用伊红美蓝鉴别性琼脂培养基（ＥＭＢ）培养。如图３－１革兰染色呈红色，为革兰氏阴性无芽孢杆菌，菌落边缘整齐，，圆形，湿润，黑有金属光泽。周身存在鞭毛，可以运动，无芽孢，形状椭圆，有长短不一形状

（ａ）逦（ｂ）逡逑图３－２肠球菌菌落图（ａ）与镜检图（ｂ）逡逑Ｆｉｇ．３－２邋Ｃｏｌｏｎｙ（ａ）邋ａｎｄ邋ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｉｃ（ｂ）邋ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ邋ｏｆ邋Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ逡逑（３）
【学位授予单位】：天津科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R151

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本文编号：2663601