氟对小鼠海马神经毒性作用及相关基因的影响

发布时间：2017-03-26 20:11

  本文关键词：氟对小鼠海马神经毒性作用及相关基因的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：[目的]研究氟对小鼠海马组织中CREB、BDNF、NCAM、SCF 和 VEGF在基因和蛋白水平的表达,以期探索氟对海马神经发生的影响,探索氟的神经毒性作用,为临床氟中毒症状和进一步采取干预措施提供动物性实验依据。[方法]选用昆明雄性小鼠48只,适应环境一周后,按体重随机分成对照组、低氟组、中氟组和高氟组,每组12只。对照组供给蒸馏水,处理组依次供给含有25、50、100mg/L NaF的蒸馏水并在同一条件下饲养。攻毒8周后处死,采用HE染色、透射电子显微镜、QRT-PCR以及western blotting等技术手段对小鼠海马形态学、海马突触超微结构以及神经发生相关因子cAMP应原件结合蛋白(CREB)、脑源性生长因子(BDNF)、神经细胞粘附因子(NCAM)、干细胞因子(SCF)、血管内皮生长因子(VEGF) mRNA基因和蛋白表达水平进行了检测。[结果]1.HE染色结果显示：对照组细胞排列有序,细胞核大而圆,位于细胞中央,核仁清晰可见。处理组神经细胞发生了明显的变化,神经细胞排列无规则,神经细胞数目少,细胞膜与周围组织分界模糊,神经元皱缩。2.应用QRT-PCR检测与小鼠海马神经发生相关因子的mRNA表达水平,结果显示：与对照组相比,高氟组CREB、BDNF、NCAM和SCF mRNA表达水平显著降低,VEGF无差异显著性。western blotting检测结果表明：所有处理组CREB蛋白表达的水平与对照组相比均有差异显著性；BDNF蛋白在所有处理组与对照组相比表达降低,高氟组与对照组比较差异显著(P0.01)。NCAM蛋白表达水平的多少,随着氟浓度的增加而降低,且其蛋白表达水平在中和高氟组与对照组相比有差异显著性。中、高氟组SCF蛋白表达水平虽然低于对照组,但并无统计学意义。3.透射电子显微镜下观察,与对照组相比,处理组海马神经细胞的细胞核的形状变得不规则,核膜的轮廓模糊,双层结构破坏,核浆中的电子密度增加,染色质聚集。海马突触间隙变宽,突触后膜致密物密度变薄,突触活性区变短,突触前后膜结构模糊,突触小泡明显减少,突触内线粒体肿胀,线粒体内嵴断裂消失。[结论]攻毒60日龄后,氟影响了小鼠海马的组织形态和超微结构,对海马神经产生了毒性作用。这一过程可能是氟通过改变CREB、BDNF和NCAM在基因和蛋白水平的下调,影响突触的可塑性,从而影响了海马的神经发生,产生的神经毒性作用。
【关键词】：氟中毒 海马 小鼠 突触可塑性
【学位授予单位】：山西农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R114;S859.82
【目录】：

• 摘要6-7
• 前言7-9
• 第一章 动物模型的建立及氟对小鼠海马形态结构及超微结构的观察9-15
• 1 材料与方法9-11
• 1.1 试验材料9-10
• 1.2 试验方法10-11
• 2 试验结果11-13
• 2.1 小鼠海马组织形态学变化11-12
• 2.2 氟暴露对海马组织超微结构的影响12-13
• 3 分析讨论13-14
• 3.1 氟影响了小鼠海马组织形态学结构13-14
• 3.2 氟对小鼠海马超微结构的影响14
• 4 本章结论14-15
• 第二章 氟对小鼠海马神经发生相关基因表达的影响15-25
• 1 材料与方法15-20
• 1.1 试验材料15-16
• 1.2 试验方法16-20
• 2 试验结果20-21
• 2.1 海马组织中总RNA的提取及质量鉴定20
• 2.2 60天氟暴露影响了小鼠海马组织CREB、BDNF、SCF、NCAM、VEGF基因 mRNA的表达量20-21
• 3 分析与讨论21-24
• 3.1 氟对环磷酸腺苷反应原件结合蛋白(CREB)和BDNF的影响21-22
• 3.2 氟对神经细胞粘附因子(NCAM)的影响22-23
• 3.3 氟对神经干细胞因子(SCF)的影响23-24
• 3.4 氟对血管内皮生长因子(VEGF)的影响24
• 4 小结24-25
• 第三章 氟对小鼠海马神经发生相关蛋白表达的影响25-34
• 1 材料与方法25-29
• 1.1 试验材料25-26
• 1.2 试验方法26-29
• 2 试验结果29-31
• 2.1 蛋白标曲的制备29-30
• 2.2 不同剂量氟对小鼠海马CREB和BDNF的影响30
• 2.3 不同剂量氟对小鼠海马NCAM的影响30
• 2.4 不同剂量氟对小鼠海马SCF的影响30-31
• 3 分析与讨论31-33
• 3.1 氟对小鼠海马组织CREB和BDNF的影响31-32
• 3.2 氟对NCAM和SCF的蛋白表达水平的影响32-33
• 4 结论33-34
• 全文结论34-35
• 英文缩略词表35-36
• 参考文献36-40
• Abstract40-42
• 致谢42

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 刘晓莉;李红;乔德才;;适量运动对大鼠海马神经元脑源性神经营养因子表达的影响[J];沈阳体育学院学报;2008年03期

2 章子贵,许晓璐,申秀英,徐晓虹;氟中毒对小鼠学习记忆相关脑区突触结构的影响[J];卫生研究;1999年04期

3 孙增荣,刘风贞,吴丽娜,吕严,于德奎;高氟饮水对小鼠脑功能的影响[J];中国地方病学杂志;2000年04期

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本文编号：269319