利用蜜蜂研究蜂王浆抗衰老的主要成分

发布时间：2017-03-27 20:10

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【摘要】：蜜蜂是由三型蜂组成的一种社会性昆虫,因为工蜂的寿命较短,用蜜蜂作为抗衰老模型动物开展相关的研究时效会更好。蜂王浆是工蜂咽下腺和上额腺分泌的用于饲喂蜂王的乳白色、淡黄色或浅橙色浆状物质,富含蛋白质、碳水化合物、维生素和矿物质。具有多种医疗保健功效,是一种常见的保健食品。线虫寿命试验、果蝇寿命试验都证明了蜂王浆具有很好的抗衰老作用,具有延寿因子。本研究试图通过比较中蜂和意蜂在饲养盒内的存活情况,探索两种蜜蜂建立实验模型的可行性与差异性,并开展了蜂王浆的抗衰老作用和抗衰老的有效成分研究。研究结果如下：(1)蜂王浆成分的分离：新鲜蜂王浆经过磷酸缓冲液溶解、离心、硫酸铵沉淀和透析得到蜂王浆的水溶性蛋白组分提取RJP30和RJP60,得率分别为0.95%和10.83%。新鲜蜂王浆经过磷酸缓冲液溶解,离心和Tris-Hcl溶液透析得到蜂王浆粗蛋白,得率为11.07%。蜂王浆经95%的乙醇萃取,干燥得到醇提物(EERJ),得率为9.78%。(2)模型建立：实验室内恒温恒湿培养箱35℃,50%相对湿度条件下,饲喂相同饲料的盒养中蜂和盒养意蜂。比较他们的存活时间,实验发现中蜂在41天的试验期内死亡率极低,相比意大利蜜蜂,选择中蜂作为模型动物将增加试验周期。因此,我们认为中蜂作为模型动物还需要进一步深入探究。(3)蜂王浆的抗衰老作用：盒养意蜂作为模型动物,不同剂量的蜂王浆添加到50%的蔗糖溶液中,50%蔗糖溶液,牛血清蛋白作为对照组,观察蜜蜂的寿命。实验结果显示蜜蜂在25日龄之前,12%蜂王浆组的存活率较4%蜂王浆组高,8%蜂王浆组与4%蜂王浆组的存活率基本保持一致。试验结束时,4%蜂王浆组存活的蜜蜂数量最多,所以选择4%剂量的蜂王浆作为延长蜜蜂寿命试验的最佳蜂王浆添加量。(4)蜂王浆组分的抗衰老作用：将分离所得的RJCP, RJP30. RJP60和蜂王浆醇提物。分别添加至50%的蔗糖溶液中,实验结果表明RJP60可以有效延长蜜蜂的寿命。蜂王浆中除含有蛋白质以外,还含有大量的小分子活性物质。蜂花粉营养非常全面,被誉为“微型营养库”,所以,选择蜂花粉作为对照组研究蜂王浆的抗衰老作用,研究四种常见蜂花粉与蜂王浆对蜜蜂寿命的影响。实验结果表明蜂王浆延长蜜蜂寿命与其营养全面没有直接关系,蜂王浆中含有特殊的延寿因子。但是,电泳结果显示RJP60是一个混合物,其中的一个成分或者多个组分在蜂王浆延长蜜蜂寿命方面起主要作用,有待于进一步研究。
【关键词】：工蜂 蜂王浆 水溶性蛋白质 硫酸铵沉淀法 寿命
【学位授予单位】：福建农林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R151.3
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 第一章 绪论12-28
• 1 蜂王浆12-19
• 1.1 蜂王浆的理化性质12-14
• 1.2 蜂王浆的药理作用14-17
• 1.3 蜂王浆蛋白的分离纯化17
• 1.4 蜂王浆的生产17-19
• 2 蜜蜂19-21
• 2.1 中华蜜蜂20
• 2.2 意大利蜜蜂20-21
• 3 抗衰老21-26
• 3.1 衰老学说21-23
• 3.2 衰老模型23-25
• 3.3 抗衰老制剂25-26
• 4 本文研究的主要内容及意义26-28
• 第二章 蜂王浆蛋白的分离纯化28-37
• 1 实验材料和方法28-33
• 1.1 实验材料与设备28-32
• 1.2 实验方法32-33
• 1.2.1 蜂王浆主要理化指标的测定32
• 1.2.2 王浆组蛋白的分离32
• 1.2.3 蜂王浆粗蛋白的分离32
• 1.2.4 蜂王浆中醇提物的提取32-33
• 1.2.5 SDS-PAGE电泳33
• 2 实验结果33-35
• 2.1 蜂王浆的理化指标33-34
• 2.2 蜂王浆组分的分离34
• 2.3 SDS电泳结果34-35
• 3 结论与讨论35-37
• 3.1 结论35-36
• 3.2 讨论36-37
• 第三章 蜜蜂延寿模型的建立37-42
• 1 实验材料和方法37-39
• 1.1 实验材料37-38
• 1.2 仪器设备38
• 1.3 实验方法38-39
• 1.3.1 模型的建立38-39
• 1.3.2 实验分组设计39
• 1.3.3 数据统计39
• 2 实验结果39-40
• 3 结论与讨论40-42
• 3.1 结论40
• 3.2 讨论40-42
• 第四章 蜂王浆对蜜蜂寿命的影响42-46
• 1 实验材料和方法42-43
• 1.1 实验材料42
• 1.2 实验设备42
• 1.3 实验方法42-43
• 2 实验结果43-44
• 3 结论与讨论44-46
• 3.1 结论44-45
• 3.2 讨论45-46
• 第五章 蜂王浆抗衰老的成分研究46-53
• 1 实验材料和方法46-48
• 1.1 实验材料46
• 1.2 实验设备46-47
• 1.3 实验方法47-48
• 1.3.1 蜂王浆组分对蜜蜂寿命的影响47-48
• 1.3.2 蜂王浆和蜂花粉对蜜蜂寿命的影响48
• 2 实验结果48-51
• 2.1 蜂王浆组分对蜜蜂寿命的影响48-50
• 2.2 蜂王浆和蜂花粉对蜜蜂寿命的影响50-51
• 3 结论与讨论51-53
• 3.1 结论51
• 3.2 讨论51-53
• 第六章 结论和展望53-55
• 参考文献55-60
• 致谢60

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本文编号：270992