基于纳米磁珠的水体中蒽快速检测方法的建立

发布时间：2017-03-29 05:06

  本文关键词：基于纳米磁珠的水体中蒽快速检测方法的建立，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：多环芳烃（PAHs）主要来源于有机物热解或不完全燃烧，是一类广泛存在于自然环境中，具有致癌性和致突变性的持久性有机污染物，近年来，PAHs在河流、湖泊、海域等水体中被相继检出，引发严重的生态风险。目前，PAHs的检测主要依赖于仪器检测、细胞检测和免疫学检测等手段。其中，免疫分析技术以其高效快速、灵敏准确、操作简便等诸多优点，被越来越多地应用到水体中PAHs的检测中。 本文以环境中优先控制PAHs中的蒽（ANT）为目标，将小分子ANT分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联制备完全抗原ANT-BSA和ANT-OVA。使用ANT-BSA免疫Balb/c小鼠，取免疫后小鼠的乆淋巴结细胞或脾细胞与SP2/0细胞融合后，筛选到2株杂交瘤细胞D3和H8。体内诱生腹水法大量生产腹水后，使用亲和层析法纯化得到抗蒽单克隆抗体。用纯化后的单抗建立了酶标板间接竞争酶联免疫吸附试验（ic-ELISA）和磁珠（IBM）ic-ELISA两种检测方法，并对两种检测方法的检测条件进行了优化。 酶标板-ic-ELISA检测蒽的线性回归方程是Y=0.4253x-0.1883，R2=0.9901，线性检测范围为4.76ng/mL~362.16ng/mL，最低检测限为3.65ng/mL。蒽的半数抑制浓度为41.53ng/mL，与芘交叉反应率为5.80%，与其他14种PAHs的交叉反应率皆小于1%。平均板内变异系数为5.95%，平均板间变异系数为12.86%。模拟样本检测，回收率在100.07%～111.08%之间。分别从长春、大庆、锦州、北京四地采集了一份水样进行检测，，样品中蒽的含量分别为5.63ng/mL、13.78ng/mL、4.42ng/mL和4.65ng/mL，自来水中未检出。 IBM-ic-ELISA检测蒽的线性回归方程是Y=0.3128x+0.0383，R2=0.9761，线性检测范围为1.575~568.585ng/mL，最低检测线为2.431ng/mL。平均板内变异系数为8.28%，平均板间变异系数为13.44%。模拟样本检测，回收率在101.59%~106.77%之间。对上述4个样本进行检测，样品中蒽的含量依次为4.28ng/mL、12.42ng/mL、4.17ng/mL和5.13ng/mL。
【关键词】：蒽 单克隆抗体 酶联免疫吸附试验 纳米磁珠
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R123.1
【目录】：

• 中文摘要5-6
• Abstract6-8
• 目录8-9
• 英文缩写词表9-10
• 引言10-11
• 第一篇 文献综述11-21
• 第1章 多环芳烃概述11-17
• 1.1 多环芳烃简介11-12
• 1.2 PAHs 的危害12-13
• 1.3 我国水环境中 PAH s 的污染现状简介13-14
• 1.4 PAHs 的检测方法14-17
• 第2章 免疫磁珠在免疫分析中的应用17-21
• 2.1 纳米材料在免疫分析中的应用17-18
• 2.2 免疫磁珠（immunomagnetic bead, IMB）的简介18-21
• 2.2.1 免疫磁珠的结构18-19
• 2.2.2 免疫磁珠的性质19
• 2.2.3 免疫磁珠技术的原理19-21
• 第二篇 研究内容21-64
• 实验1 蒽单克隆抗体的制备与鉴定21-37
• 1.1 材料21-24
• 1.2 方法24-30
• 1.3 结果30-34
• 1.4 讨论34-36
• 1.5 小结36-37
• 实验2 酶标板 IC ELISA 方法的建立及初步应用37-52
• 2.1 材料37
• 2.2 方法37-41
• 2.3 结果41-50
• 2.4 讨论50-51
• 2.5 小结51-52
• 实验3 IBM ic ELISA 方法的建立及初步应用52-64
• 3.1 材料52
• 3.2 试验方法52-55
• 3.3 结果55-62
• 3.4 讨论62-63
• 3.5 小结63-64
• 参考文献64-71
• 导师简介71-72
• 作者简介及科研成果72-73
• 致谢73

【参考文献】

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本文编号：273721