花生粕发酵物对鼠生长发育和学习记忆能力的影响及抗氧化活性研究

发布时间：2020-07-11 04:54

【摘要】：花生粕发酵后营养特性得到明显改善。本次研究以花生粕纳豆杆菌发酵提取物对衰老雌鼠和初断乳小鼠进行灌胃干预,探究其对鼠的生长发育、学习记忆能力的影响及抗氧化活性研究。第一部分:花生粕发酵物对衰老雌鼠脏器指数、脂质代谢、认知及抗氧化活性的影响目的:应用D-半乳糖建立大鼠衰老模型,同时给予花生粕发酵提取物(HFW)灌胃干预,分析HFW对衰老雌鼠脏器指数、脂质代谢、认知及抗氧化活性的影响,探究HFW对衰老雌鼠安全性和生理机能的影响,为疾病的防控和开发利用花生粕资源提供理论依据。方法:将大鼠随机分为正常对照组(N)、衰老模型组(M)、HFW低剂量+M组(FL)、HFW中剂量+M组(FM)、HFW高剂量+M组(FH)和维生素E阳性对照组(Y)。除N组注射生理盐水外,其余各组应用D-半乳糖诱导衰老模型。诱导模型同时给予不同物质灌胃,N组及M组给予生理盐水灌胃;FL组、FM组及FH组给予不同剂量HFW灌胃;Y组给予维生素E灌胃。(1)每周记录大鼠体重及一般情况;(2)8 w后,进行Morris水迷宫实验检测学习记忆能力;(3)试剂盒法测定血清和脑组织的超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,全自动生化分析仪检测血清脂质代谢相关指标;(4)取出海马经固定、包埋、制成组织切片,经HE染色观察组织形态学变化;免疫组织化学技术检测海马区γ-氨基丁酸受体1(GABAR1)和N-甲基-D-天冬氨酸2B受体(NMDAR2B)的表达。结果:1.模型评价:M组大鼠血清SOD活性(312.475±15.019 U/m L)明显低于N组(341.678±16.727 U/m L),MDA含量(15.183±0.714 mmol/m L)明显高于N组(8.557±0.613 mmol/m L),说明造模成功。2.脏器指数及脂质代谢指标:(1)试验期间,FM、FH组大鼠平均体重分别增加7.99%、12.18%;(2)各组大鼠的肝脏指数和脾脏指数均无统计学差异(P0.05);与N组相比,M组大鼠的胸腺指数明显减小(P0.05);FM、FH组和Y组大鼠的胸腺指数均明显高于M组(P0.05);(3)与M组相比,HFW各处理组的胆固醇(TC)含量、甘油三酯(TG)含量及低密度脂蛋白(LDL)含量均表现为降低的趋势(P0.05),而高密度脂蛋白(HDL)含量呈现升高的趋势(P0.05);各组大鼠血脂酶含量无统计学差异(P0.05),表明实验剂量的HFW对大鼠肝脏无损伤。3.认知功能:(1)水迷宫实验结果显示,M组大鼠平均潜伏期较N组明显延长,跨越平台次数减少,在目标象限的时间比和路程比明显减少(P0.05);FM、FH和Y组大鼠平均潜伏期较M组均明显缩短,跨越平台次数增多,在目标象限的时间比和路程比均明显增加(P0.05)。(2)M组大鼠脑组织细胞排列紊乱,数目减少,可见空泡样改变;HFW各剂量组随灌胃剂量增加,细胞形态及排列均明显改善,变形细胞数量显著减少;Y组细胞的数目及排列均明显改善。(3)与N组相比,M组大鼠海马GABAR1表达明显上调,NMDAR2B表达明显下调(P0.05)。与M组相比,FH组大鼠的GABAR1表达明显下调(P0.05)。HFW各组与Y组大鼠的NMDAR2B表达与M组大鼠差异无统计学意义(P0.05)。4.抗氧化活性:与N组相比,M组大鼠血清及脑组织中SOD活性明显降低(P0.05),MDA含量明显升高(P0.05)。FM组、FH组大鼠的SOD活性明显高于M组,MDA含量明显低于M组(P0.05)。结论:利用D-半乳糖造模成功。(1)中、高剂量的HFW可有效改善衰老引起的体重下降、血脂代谢异常,有效提高衰老大鼠的抗氧化活性;(2)HFW可通过提高抗氧化活性及下调GABAR1的表达,明显延缓衰老引起的认知功能下降。第二部分:花生粕发酵物对小鼠生长发育及学习记忆能力的影响目的:探究HFW对小鼠生长发育和学习记忆能力的影响。方法:将50只初断乳雄性昆明小鼠按体重随机分为5组:正常对照组(A)、花生粕发酵物低剂量组(B)、花生粕发酵物中剂量组(C)、花生粕发酵物高剂量组(D)、花生粕未发酵组(E)。每天灌胃干预,干预物质分别为生理盐水、低剂量发酵物、中剂量发酵物、高剂量发酵物和未发酵物提取液,持续4周。每周记录小鼠体重及一般情况,Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力。实验结束后,颈椎脱臼处死小鼠,立即取出肝脏、肾脏、脾脏,称重并记录。结果:(1)D组小鼠的平均日增重和肝脏指数较A组和E组均明显增加(P0.05);B组和C组的平均日增重较E组明显增加(P0.05)。(2)与A组和E组相比,D组小鼠的平均潜伏期明显缩短(P0.05),穿越平台次数明显增多(P0.05),在目标象限的时间比、路程比明显增加(P0.05)。结论:花生粕发酵物可以促进小鼠的生长发育,中、高剂量HFW可以提高学习记忆能力。
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R151
【图文】：

图 1 干预方式对大鼠体重的影响N-正常对照组；M-衰老模型组；FL-花生粕发酵物低剂量组；FM-花生粕发酵物中剂量组；FH-花生粕发高剂量组；Y-阳性对照组。 大鼠脏器指数变化表 1 干预方式对大鼠脏器指数的影响（mean SD，mg g-1）分组 肝脏指数 胸腺指数 脾脏指数N 27.327 1.005 1.711 0.113 2.352 0.133M 26.250 1.386 1.409 0.119a2.111 0.089FL 26.314 0.977 1.554 0.102 2.215 0.142FM 26.998 1.074 1.637 0.136b2.305 0.153FH 26.788 1.321 1.644 0.118b2.218 0.120Y 26.767 1.395 1.658 0.099b2.414 0.135N-正常对照组；M-衰老模型组；FL-花生粕发酵物低剂量组；FM-花生粕发酵物中剂量组；FH-花生粕发高剂量组；Y-阳性对照组.a 表示 M 组与 N 组相比，P＜0.05；b 表示各处理组与 M 组相比，P＜0.05.如表 1 所示，各组大鼠的肝脏指数和脾脏指数均无统计学差异（P＞0.05）。

第一部分 花生粕发酵物对衰老雌鼠脏器指数、脂质代谢、认知及抗氧化活性的影响3 HFW 对衰老大鼠认知功能的影响3.1 Morris 水迷宫实验我们用水迷宫实验评估了大鼠的学习记忆能力，各组大鼠最后一天训练的游泳轨迹（图 2）和探索实验的游泳轨迹（图 3）；各组大鼠 5 d 训练的平均潜伏期（图 4）、空间探索实验跨越平台的次数、平均游泳速度以及在目标象限的时间比、路程比（表 4）。

3 HFW 对衰老大鼠认知功能的影响3.1 Morris 水迷宫实验我们用水迷宫实验评估了大鼠的学习记忆能力，各组大鼠最后一天训练的游泳轨迹（图 2）和探索实验的游泳轨迹（图 3）；各组大鼠 5 d 训练的平均潜伏期（图 4）、空间探索实验跨越平台的次数、平均游泳速度以及在目标象限的时间比、路程比（表 4）。图 2 水迷宫实验各组大鼠最后一天游泳轨迹由图 2 可知，在最后一天的定位航行实验中，N 组、FM 组、FH 组和 Y 组大鼠可以较快、较准的找到目标象限所在位置。

【参考文献】

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本文编号：2749985