目的:邻苯二甲酸二甲酯(DMP)在全球范围内被广泛应用,常用于化妆品、香水等护理产品、驱蚊油、清漆和包装袋、塑料薄膜等塑料制品中。在水体、土壤、大气中都能检测到DMP,其经由大气、水、食物等进入生物体中,对机体健康产生威胁。目前,在国内外尚未见DMP对小鼠的生殖毒性作用研究,本实验对C57小鼠连续灌胃DMP,分别在20和40天观察小鼠卵巢、睾丸各项指标的变化,探讨DMP对小鼠生殖毒作用,以期为DMP的毒理检测和预防提供资料,为其安全应用提供依据。方法:选择80只健康C57小鼠,剂量分组为4组,每组20只,雌雄各半,即雌、雄性阴性对照组(玉米油)、低0.5g·kg~(-1)DMP组、中1.0 g·kg~(-1)DMP组、高2.0g·kg~(-1)DMP组,每天灌胃1次。分别于20和40天后,眶静脉窦取血后脱臼处死,观察雄性小鼠血清性激素水平(T、FSH、LH)、睾丸组织标志酶活性(LDH、SDH、G-6-PD)、ATP酶、脂质过氧化损伤(SOD、CAT、GSH-PX、MDA)、精子计数及畸形率、睾丸细胞周期及凋亡率;雌性小鼠血清性激素水平(P、E_2、FSH、LH)、卵巢细胞凋亡率指标的变化情况。结果:1.各组小鼠体重、肛殖距、睾丸脏器系数和卵巢脏器系数的变化雄鼠染毒20天,1.0g·kg~(-1)DMP组睾丸脏器系数明显高于对照组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组睾丸脏器系数明显低于0.5和1.0g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。染毒40天,1.0和2.0g·kg~(-1)DMP组小鼠肛殖距明显低于其他各组(P0.05)。各染毒组的睾丸脏器系数明显低于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加睾丸脏器系数呈降低趋势。雌鼠染毒20天,各染毒组卵巢脏器系数明显高于对照组(P0.05);1.0g·kg~(-1)DMP组卵巢脏器系数明显低于0.5 g·kg~(-1)DMP组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组卵巢脏器系数明显高于0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。染毒40天,0.5g·kg~(-1)DMP组卵巢脏器系数明显高于对照组(P0.05);1.0和2.0g·kg~(-1)DMP组卵巢脏器系数明显低于其他各组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组卵巢脏器系数明显低于1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。2.各组小鼠血清中性激素水平变化雄鼠染毒20天,0.5 g·kg~(-1)DMP组T含量明显高于对照组(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP组T含量明显低于0.5 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。2.0 g·kg~(-1)DMP组FSH含量明显高于对照组和1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。各染毒组LH含量均低于对照组(P0.05)。染毒40天,各染毒组T含量均明显低于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加T含量变化呈升高趋势。各染毒组FSH含量均低于对照组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组FSH含量明显高于0.5 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。雌鼠染毒40天,各染毒组小鼠血清中E_2含量明显高于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加E_2含量变化呈降低趋势。2.0 g·kg~(-1)DMP组小鼠FSH含量明显低于其他组(P0.05)。2.0 g·kg~(-1)DMP组小鼠LH含量明显高于其他组(P0.05)。3.各组小鼠睾丸组织酶活性变化染毒20天,各染毒组LDH含量均高于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加LDH含量变化呈升高趋势。0.5和2.0 g·kg~(-1)DMP组G-6-PD含量明显低于其他各组(P0.05)。0.5 g·kg~(-1)DMP组SDH含量明显低于对照组(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP组含量明显高于其他各组(P0.05)。染毒40天,1.0和2.0g·kg~(-1)DMP组的LDH含量明显低于其他各组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组的LDH含量明显低于1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。各染毒组睾丸匀浆中的G-6-PD含量明显高于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加G-6-PD含量变化呈升高趋势。2.0 g·kg~(-1)DMP组SDH含量明显高于对照组和1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。4.各组雄性小鼠睾丸组织中Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase、Na~+-K~+-ATPase活性变化染毒20天,1.0和2.0g·kg~(-1)DMP组Na~+-K~+-ATPase活性明显低于其他各组(P0.05);2g·kg~(-1)DMP组Na~+-K~+-ATPase活性明显低于1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。各剂量组Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性明显低于对照组(P0.05);2g·kg~(-1)DMP组Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性明显低于0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。染毒40天,0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP组Na~+-K~+-ATPase活性明显低于其他各组(P0.05)。1.0 g·kg~(-1)DMP组Na~+-K~+-ATPase活性明显低于0.5g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。1.0 g·kg~(-1)DMP组Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性明显高于其他各组(P0.05)。5.雄性小鼠睾丸组织中脂质过氧化水平变化染毒20天,各染毒组睾丸匀浆中MDA含量明显低于对照组(P0.05);2.0g·kg~(-1)DMP组含量明显低于0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。各染毒组小鼠的GSH-Px含量明显高于对照组(P0.05)。1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP组的SOD含量明显高于其他各组(P0.05)。0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP组的明显高于对照组(P0.05);1.0 g·kg~(-1)DMP组的CAT含量明显高于0.5 g·kg~(-1)DMP组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组的CAT含量明显低于其他组(P0.05)。染毒40天,0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP组MDA含量明显高于对照组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组MDA含量明显低于其他组(P0.05)。各染毒组小鼠的GSH-Px含量均明显低于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加GSH-Px含量变化呈先降低后升高趋势。6.各组小鼠睾丸细胞凋亡和周期、卵巢细胞凋亡变化雄鼠染毒20天,0.5和1.0 g·kg~(-1)DMP组G0/G1期明显高于对照组(P0.05)。各染毒组S期明显低于对照组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组S期明显高于0.5g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。各染毒组G2/M期明显高于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加G2/M期变化呈降低趋势。各染毒组凋亡率明显高于对照组(P0.05)。染毒40天,0.5 g·kg~(-1)DMP组G0/G1期明显高于其他各组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组G0/G1期明显低于对照组和1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。各染毒组S期明显低于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加S期变化呈升高趋势。1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP组G2/M期明显高于其他各组(P0.05)。各染毒组凋亡率均明显高于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加凋亡率变化呈先升高后降低趋势。雌鼠染毒20天,0.5g·kg~(-1)DMP组卵巢细胞凋亡率明显低于对照组(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP组卵巢细胞凋亡率明显高于其他各组(P0.05)。染毒40天,0.5g·kg~(-1)DMP组卵巢细胞凋亡率明显低于对照组(P0.05);1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP组卵巢细胞凋亡率明显高于其他各组(P0.05)。7.各组雄性小鼠精子相对计数和精子畸形率的变化染毒20天,各染毒组相对精子数明显低于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加相对精子数变化呈先升高后降低趋势。1.0和2.0 g·kg~(-1)DMP组精子畸形率明显高于其他各组(P0.05);随着染毒剂量的增加精子畸形率变化呈升高趋势。染毒40天,0.5 g·kg~(-1)DMP组相对精子数明显高于对照组(P0.05);1.0和2.0g·kg~(-1)DMP组相对精子数明显低于其他各组(P0.05);2.0 g·kg~(-1)DMP组相对精子数明显高于1.0 g·kg~(-1)DMP组(P0.05)。各染毒组精子畸形率明显高于对照组(P0.05);随着染毒剂量的增加精子畸形率变化呈升高趋势。结论:1.DMP可引起雄性小鼠血清中LH和T含量降低,FSH活性升高;雌性小鼠血清中E_2和LH含量增加,FSH活性下降。2.随着染毒时间延长,DMP可导致小鼠睾丸组织中LDH含量变化呈先增加后减少趋势;G-6-PD含量变化呈先减少后增加趋势;高剂量DMP导致SDH含量增加。3.DMP可降低小鼠睾丸组织中Na~+-K~+-ATPase活性,染毒40天,1 g·kg~(-1)DMP组睾丸组织中Ca~(2+)-Mg~(2+)-ATPase活性升高。4.染毒20天,小鼠睾丸匀浆中MDA含量减少;SOD含量增加;0.5和1.0g·kg~(-1)DMP组CAT含量增加,2.0g·kg~(-1)DMP组CAT含量减少。染毒40天,0.5和1.0g·kg~(-1)DMP组MDA含量增加,2.0g·kg~(-1)DMP组MDA含量减少。随着染毒时间延长,DMP可导致GSH-Px的含量变化呈先增加后减少趋势。5.DMP影响小鼠睾丸细胞周期变化,并可引起睾丸细胞和卵巢细胞凋亡。6.DMP可导致小鼠精子数量减少,并使小鼠精子畸形率增加。
【学位单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2019
【中图分类】：R114
【部分图文】：
图 3.1 DMP 染毒 20 天后睾丸细胞周期变化a:对照组 b:0.5 g·kg-1DMP 组 c:1.0 g·kg-1DMP 组 d:2.0 g·kg-1DMP 组
图 3.1 DMP 染毒 20 天后睾丸细胞周期变化a:对照组 b:0.5 g·kg-1DMP 组 c:1.0 g·kg-1DMP 组 d:2.0 g·kg-1DMP 组
图 3.3 DMP 染毒 40 天后睾丸细胞周期变化a:对照组 b:0.5 g·kg-1DMP 组 c:1.0 g·kg-1DMP 组 d:2.0 g·kg-1DMP 组
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本文编号：
2819319
