章鱼蛋白钙对小鼠的补钙功效研究

发布时间：2020-09-29 14:27

【摘要】：目的本文研究以章鱼下脚料为原料制备的章鱼蛋白钙(Octopusprotein-calcium OP-Ca)在小鼠体内吸收代谢情况及其补钙功效,为章鱼蛋白钙作为补钙制剂的应用提供科学依据。方法章鱼蛋白钙螯合率的测定:使用微波消解--火焰原子吸收法测定螯合态钙及总钙钙离子含量,计算得章鱼蛋白钙样品螯合率。动物实验:SPF级ICR小鼠60只,雄性,3周龄。将小鼠按体重随机分为5组,分别为正常对照组、低钙组、碳酸钙组、低剂量OP-Ca组和高剂量OP-Ca组,每组12只。除正常对照组外,其余四组喂饲低钙基础饲料。低、高剂量OP-Ca组的灌胃剂量分别为39.9、119.7 mgCa/(kg·d),碳酸钙组灌胃剂量为119.7 mg/(kg·d)。正常对照组和低钙组灌胃给予等体积去离子水。灌胃时间为4W,期间小鼠自由摄食,饮用去离子水,每周测定小鼠体重和体长。钙吸收代谢试验:灌胃至25d时,将小鼠转移至代谢笼中,记录小鼠每天的摄食量,并收集小鼠24h粪便和尿液,连续收集3d。使用火焰原子吸收法测定小鼠粪钙和尿钙含量,计算小鼠钙表观吸收率和储留率,探讨章鱼蛋白钙在小鼠体内的吸收代谢状况。血清生化指标和股骨指标的测定:灌胃至28d后禁食8h,摘眼球取血,分离血清,测定小鼠血清钙、碱性磷酸酶(AKP)含量,探讨章鱼蛋白钙对小鼠血清生化指标的影响。脱颈椎处死小鼠,分离双侧股骨,测定小鼠股骨密度,并进行CT扫描,测定小鼠皮质骨厚度;火焰原子吸收法测定小鼠股骨钙含量,研究章鱼蛋白钙对小鼠骨骼营养状况的改善作用。结果(1)章鱼蛋白钙螯合态钙和总钙钙离子含量分别为3.25mg/g、3.78mg/g,螯合率为86%。(2)章鱼蛋白钙对小鼠钙表观吸收率和储留率的影响:低、高剂量章鱼蛋白钙组钙表观吸收率分别为75.29±2.11%,66.59±2.34%,储留率分别76.30±2.44%、68.27±2.64%,均显著高于碳酸钙组(56.64±2.02%、54.32±1.67%)(p0.05)。(3)章鱼蛋白钙对小鼠血清生化指标的影响:低、高剂量章鱼蛋白钙组血清 Ca 分别为 2.10±0.08mmol/L、2.23±0.10mmol/L,显著高于低钙组(1.98±0.10mmol/L)(P0.05),且高剂量组显著高于碳酸钙组(2.11±0.13mmol/L)(P0.05)。低、高剂量章鱼蛋白钙组血清碱性磷酸酶含量分别为13.10±2.26金氏单位/1OOmL、12.25±1.73金氏单位/1OOmL,显著低于低钙组(18.79±3.82 金氏单位/100mL)(P0.05),与碳酸钙组(15.63±1.76 金氏单位/1OOmL)相比,高剂量组血清AKP含量显著降低(P0.05)。(4)章鱼蛋白钙对小鼠股骨指数、股骨长度的影响:低、高剂量章鱼蛋白钙组股骨指数分别为5.24±0.12mg/g、5.42±0.31mg/g,显著高于低钙组(4.60±0.33mg/g)(P0.05),与碳酸钙组(4.92±0.22 mg/g)相比,股骨指数均显著增加(P0.05)。(5)章鱼蛋白钙对小鼠股骨密度、骨钙含量、皮质骨厚度的影响:低剂量组股骨密度、.骨钙含量、皮质骨厚度分别为1.44±0.02g/cm3、235.30±8.97mg/g、0.66±0.03mm,高剂量章鱼蛋白钙组股骨密度、骨钙含量、皮质骨厚度分别为1.60±0.07g/cm3、249.12±10.39mg/g、0.70±0.02mm,均显著高于低钙组(1.23±0.06g/cm3、217.24±9.30mg/g、0.54±0.02mm)(P0.05),且高剂量组股骨密度、骨钙含量、皮质骨厚度,均显著高于碳酸钙组(1.38±0.03g/cm3、230.46±7.90mg/g、0.61±0.01mm)(P0.05)。结论:章鱼蛋白钙与碳酸钙相比,能显著提高钙的表观吸收率和储留率,维持机体的血钙及血清碱性磷酸酶水平;并可以提高骨密度及骨钙含量、增加皮质骨厚度,提高骨骼强度,改善机体钙的营养状态。
【学位授予单位】：厦门大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R151
【图文】：

逑有机钙是蛋白肽（氨基酸）的Ｃ－端羧基、Ｎ－端氨基、氨基酸侧链以及肽链中逡逑的亚氨基和羰基与钙离子配位形成的稳定螯合物［１７］（图１．２，１．３），是目前安全逡逑性能以及吸收利用率都较理想的补钙产品，化学稳定性高，生化稳定性好，真正逡逑实现了金属矿物质的有机化。有研宄表明，蛋白螯合钙由于其独特的螯合结构和逡逑转运机制，具有耗能少、转运速度快、载体不易饱和、易吸收等优点，克服了目逡逑前补钙产品含钙量低时，吸收率及生物利用率下降，含钙量水平过高时，又可能逡逑出现生物毒性的两个主要缺陷。在补充钙的同时还可以补充生物活性肽，是目前逡逑补钙效果最好的一类补钙制剂［１８１。逡逑Ｒ逦ＣＪｈＩ逦Ｃ邋……—＜３逡逑Ｉ邋Ｉ逡逑Ｃａ逡逑／邋＼逡逑Ｏ逦ｉＳＴＪｈＬ逡逑Ｉ邋Ｉ逡逑０＝＝＝＝０逦Ｏｉｌ逦Ｒ逡逑图１．２蛋白螯合钙结构式［１９］逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１．２邋Ｔｈｅ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ邋ｆｏｒｍｕｌａ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｈｅｌａｔｅ邋ｃａｌｃｉｕｍ逡逑二＇－NB’逡逑端逡逑图１．３蛋白肽金属螯合物模拟三维结构［２Ｇ］逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１．３邋Ｔｈｅ邋ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ邋ｓｐａｔｉａｌ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｍｅｔａｌ邋ｃｈｅｌａｔｅ逡逑按照蛋白肽食物来源的不同，我们将蛋白螯合钙分为两类，植物来源的蛋白逡逑３逡逑

逑有机钙是蛋白肽（氨基酸）的Ｃ－端羧基、Ｎ－端氨基、氨基酸侧链以及肽链中逡逑的亚氨基和羰基与钙离子配位形成的稳定螯合物［１７］（图１．２，１．３），是目前安全逡逑性能以及吸收利用率都较理想的补钙产品，化学稳定性高，生化稳定性好，真正逡逑实现了金属矿物质的有机化。有研宄表明，蛋白螯合钙由于其独特的螯合结构和逡逑转运机制，具有耗能少、转运速度快、载体不易饱和、易吸收等优点，克服了目逡逑前补钙产品含钙量低时，吸收率及生物利用率下降，含钙量水平过高时，又可能逡逑出现生物毒性的两个主要缺陷。在补充钙的同时还可以补充生物活性肽，是目前逡逑补钙效果最好的一类补钙制剂［１８１。逡逑Ｒ逦ＣＪｈＩ逦Ｃ邋……—＜３逡逑Ｉ邋Ｉ逡逑Ｃａ逡逑／邋＼逡逑Ｏ逦ｉＳＴＪｈＬ逡逑Ｉ邋Ｉ逡逑０＝＝＝＝０逦Ｏｉｌ逦Ｒ逡逑图１．２蛋白螯合钙结构式［１９］逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１．２邋Ｔｈｅ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ邋ｆｏｒｍｕｌａ邋ｏｆ邋ｔｈｅ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃｈｅｌａｔｅ邋ｃａｌｃｉｕｍ逡逑二＇－NB’逡逑端逡逑图１．３蛋白肽金属螯合物模拟三维结构［２Ｇ］逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋１．３邋Ｔｈｅ邋ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎ邋ｓｐａｔｉａｌ邋ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ邋ｏｆ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｍｅｔａｌ邋ｃｈｅｌａｔｅ逡逑按照蛋白肽食物来源的不同，我们将蛋白螯合钙分为两类，植物来源的蛋白逡逑３逡逑

第二章章鱼蛋白钙对小鼠的补钙功效研究逡逑２．１实验材料逡逑２．１．１实验样品章鱼蛋白钙样品由福州大学制备（图２．１）。逡逑ＩＩ梦逡逑图２．１章鱼蛋白钙样品逡逑Ｆｉｇｕｒｅ邋２．１邋Ｓａｍｐｌｅ邋ｏｆ邋ｏｃｔｏｐｕｓ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｃａｌｃｉｕｍ逡逑２．１．２实验仪器与试剂逡逑（１）

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本文编号：2829846